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不同產地川烏炮制前后差異性成分研究

2022-06-18 08:50:41吳丹丹劉艷郭鵬飛匡海學楊炳友
廣西植物 2022年5期
關鍵詞:高效液相色譜質量控制

吳丹丹 劉艷 郭鵬飛 匡海學 楊炳友

摘要:為建立川烏及制川烏的高效液相色譜(HPLC)指紋圖譜,并結合化學計量學方法和主成分含量測定和比較3個不同產地川烏炮制前后的差異成分。該文采用HPLC法,利用中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(2012版)計算相似度,并結合聚類分析(HCA)、主成分分析(PCA)、偏最小二乘判別分析(PLSDA)、正交偏最小二乘判別分析(OPLSDA)及主成分含量測定結果進行綜合分析。結果表明:(1)建立了3個產地15批川烏炮制前后的HPLC指紋圖譜,分別標定了25個和14個共有峰,并通過對照品指認出6個共有峰,分別為苯甲酰新烏頭原堿(峰16)、苯甲酰烏頭原堿(峰17)、苯甲酰次烏頭原堿(峰18)、新烏頭堿(峰21)、次烏頭堿(峰22)、烏頭堿(峰23)。(2)化學計量學方法分析顯示,川烏炮制前后的30批樣品被明顯分為2類,15批川烏被分為3類,15批制川烏被分為3類,新烏頭堿、次烏頭堿等6個成分可能是不同產地川烏炮制前后的潛在差異成分。(3)炮制前后主成分含量測定結果均有不同程度的變化,四川江油所產川烏炮制前后部分成分含量明顯高于另外兩個產地所產川烏。該研究建立的指紋圖譜精密度、重復性、穩定性均較好,結合化學計量學分析方法和主成分含量測定分析,可為不同產地川烏炮制前后質量控制提供參考。

關鍵詞:川烏,高效液相色譜(HPLC),指紋圖譜,化學計量學方法,含量測定,質量控制

中圖分類號:Q946

文獻標識碼:A

文章編號:1000-3142(2022)05-0820-13

DifferentcomponentsbetweenAconitiRadixand

itsprocessedproductfromdifferentregions

Abstract:ToevaluatethedifferencesofAconitiRadixandAconitiRadixPreparatafromthreedifferentregionsbychemometricsandprincipalcomponentcontentdeterminations.Thehighperformanceliquidchromatography(HPLC)methodwasestablishedonaWatersSunFireC18(4.6mm×150mm,5μm),andacetonitrileglacialaceticacid(0.2%)solution(triethylamineadjustedpHto6.20)wasadoptedasthemobilephaseforgradientelution,withtheflowrateof1.0mL·min1andthedetectionwavelengthof235nm.Thefingerprintswereanalyzedbythesoftwareof“SimilarityEvaluationSystemforChromatographicFingerprintofTraditionalChineseMedicine(2012)”.Thediscriminantanalysisofhierarchicalclusteranalysis(HCA),principalcomponentanalysis(PCA),orthogonalpartialleastsquaresdiscriminantanalysis(OPLSDA)andpartialleastsquaresdiscriminantanalysis(PLSDA)wereemployed,combinedwithchemometricsandthedeterminationresultsofprincipalcomponents.Theresultswereasfollows:(1)HPLCfingerprintsof15batchesofAconitiRadixanditsprocessedproductsfromthreeareaswereestablished,25and14commonfingerprintpeakswerecalibratedin15batchesofrawandprocessed,sixpeakswereidentifiedbythemixedreferenceproduct.Theywerebenzoylmesaconitine(peak16),benzoylaconitine(peak17),benzoylhypaconitine(peak18),mesaconitine(peak21),hypaconitine(peak22),aconitine(peak23).(2)Chemometricsshowedthat30batchesofsampleswereclusteredintotwocategories,15batchesofAconitiRadixwereclassifiedintothreeclasses,15batchesofAconitiRadixPreparatawereclassifiedintothreeclasses.SixcomponentscontainingmesaconitineandhypaconitinemaybethepotentialdifferentcomponentsofAconitiRadixfromdifferentregionsbeforeandafterprocessing.(3)Thecontentdeterminationresultsofprincipalcomponentschangedinvaryingdegreesbeforeandafterprocessing,andthedeterminationresultsofsomeprincipalcomponentsinJiangyouofSichuanproducingareabeforeandafterprocessingweresignificantlyhigherthanthoseintheothertwoproducingareas.Thefingerprintmethodwhichestablishedinthestudyisaccurate,repeatable,andreliable.Furthermore,combinedwithchemometricsandprincipalcomponentcontentdetermination,itcouldbeusedforthequalitycontrolofAconitiRadixanditsprocessedproductfromdifferentregions.

Keywords:AconitiRadix,highperformanceliquidchromatography(HPLC),fingerprints,chemometricmethod,contentdetermination,qualitycontrol

川烏味辛、苦,性熱,有大毒,一般炮制后用(唐梅等,2017;中華人民共和國藥典,2020;葉協滔等,2020),主產于四川、陜西、云南等地,其道地產區為四川江油,多以栽培品為主。由于各地種植程度不等及栽培環境不同,對川烏質量產生了極大的影響(林華和鄧廣海,2011;趙軍寧等,2020)。現代醫學研究表明,川烏具有抗炎(Yuetal.,2019)、鎮痛(Wangetal.,2015;Nyirimigaboetal.,2015)、抗腫瘤(Wang&Chen,2010)等作用,同時也對心臟(Liuetal.,2019;Lietal.,2020)和中樞(Qinetal.,2012;Liuetal.,2017)等有毒性作用。川烏中所含的雙酯型生物堿既是其有效成分同時又是其毒性成分(Qinetal.,2012),炮制后可將其水解為單酯型生物堿,從而降低毒性(Liuetal.,2017)。但是,由于炮制不當或錯誤使用等問題,常導致中毒事件發生,因此嚴格控制川烏炮制前后的質量尤為重要(Shaw,2010)。

目前,中藥材質量控制的方法以含量測定為主(Shaw,2010;Luoetal.,2016),但由于中藥成分復雜且不明確,僅以單個或幾個成分的含量進行質量控制,不能全面地反映藥材的質量,因此能夠實現多成分、多指標質量控制的指紋圖譜技術開始受到廣泛的關注(Zhuetal.,2013;趙翡翠等,2014;Zhengetal.,2014;馬麗娟等,2016;Luoetal.,2018;Miaoetal.,2019)。然而,對川烏的高效液相色譜(HPLC)指紋圖譜研究僅為不同產地的川烏差異比較(熊江等,2005;林華和鄧廣海,2011;司欣鑫,2019;魏惠珍等,2020;楊磊,2020)和炮制前后差異比較(于永軍等,2009;黃志芳等,2011;鄧廣海,2011;秦語欣,2016),共有峰標定均較少,對差異性成分的研究不明確且沒有將HPLC指紋圖譜與多元統計分析和含量測定的方法相結合,綜合考察產地因素對川烏炮制前后差異成分的影響。因此,本實驗選取川烏3個主要產地炮制前后的川烏樣品,建立HPLC指紋圖譜并結合化學計量學方法及主成分含量測定,篩選3個不同產地川烏炮制前后的潛在差異成分,為川烏與制川烏質量控制提供參考。

1材料與方法

1.1材料和儀器

乙腈和冰醋酸為色譜純,其余試劑均為分析純;實驗用水為屈臣氏蒸餾水;新烏頭堿(以下簡稱Mes,批號CHB180311)、烏頭堿(以下簡稱Aco,批號CHB180408)、次烏頭堿(以下簡稱Hyp,批號CHB180524)、苯甲酰新烏頭原堿(以下簡稱BMA,批號CHB180310)、苯甲酰烏頭原堿(以下簡稱BAC,批號CHB180309)、苯甲酰次烏頭原堿(以下簡稱BHA,批號CHB180307)均購自成都克洛瑪生物科技有限公司,純度均≥98%。川烏藥材采自于陜西省漢中市城固縣三合鎮龍王廟村2組、四川省江油市太平鎮普照村2組、四川省綿陽市平武代壩村3個產地各5批,共15批川烏樣品,已均被黑龍江中醫藥大學藥學院樊銳鋒副教授鑒定均為毛茛科植物烏頭(Aconitumcarmichaelii)的干燥母根,保存于黑龍江中醫藥大學中藥化學實驗室。制川烏的炮制方法采用2020版《中國藥典》方法蒸制(中華人民共和國藥典,2020)。

高效液相色譜儀(e2695,美國Waters公司);色譜柱為WatersSunFireC18(150mm×4.6mm,5μm);旋轉蒸發儀(OSB2100,日本EYELA公司)。

1.2方法

1.2.1色譜條件WatersSunFireC18(4.6mm×150mm,5μm)色譜柱,流動相為乙腈(A)-0.2%冰醋酸水溶液(B,三乙胺調pH值6.20),梯度洗脫(0~8min,5%~13%A;8~13min,13%~21%A;13~25min,21%~26%A;25~50min,26%~26%A;50~53min,26%~29%A;53~58min,29%~37%A;58~63min,37%~40%A;63~73min,40%~80%A);體積流量1.0mL·min1;檢測波長235nm;柱溫35℃;進樣量20μL。

1.2.2對照品溶液的制備分別取對照品適量,用0.01%鹽酸甲醇溶液定容,配制成含Mes0.06mg·mL1、Aco0.06mg·mL1、Hyp0.05mg·mL1、BMA0.05mg·mL1、BAC0.06mg·mL1、BHA0.06mg·mL1的混合對照品溶液,備用。

1.2.3供試品溶液制備分別取川烏和制川烏粉末(過三號篩)適量置于具塞錐形瓶中,依次加入氨試液2.0mL、異丙醇25mL和乙酸乙酯25mL,超聲提取2次(300W,40kHz,25℃以下),每次30min,靜置過夜,過濾,合并濾液。減壓濃縮(40℃以下),0.01%鹽酸甲醇溶液定容至5.0mL,進樣前離心,取上清液過0.22μm微孔濾膜,備用。

1.2.4含量測定取對照品適量,用0.01%鹽酸甲醇溶液定容,配制成含Mes3.17mg·mL1、Aco3.18mg·mL1、Hyp3.00mg·mL1、BMA0.61mg·mL1、BAC0.10mg·mL1、BHA0.13mg·mL1的混合對照品儲備液,備用。按“1.2.3”項下“供試品溶液制備”方法制備供試品溶液,并按“1.2.1”項下“色譜條件”重復測定3次。

1.2.5方法學考察

1.2.5.1線性關系考察取“1.2.2”項下混合對照品儲備液,梯度稀釋,并按“1.2.1”項下“色譜條件”進樣檢測,記錄峰面積。橫坐標(X)為質量濃度、縱坐標(Y)為峰面積,進行線性回歸,分別得到線性回歸方程。

1.2.5.2精密度考察取“1.2.2”項下混合對照品儲備液,按“1.2.1”項下“色譜條件”重復測定5次,記錄峰面積。

1.2.5.3穩定性考察取川烏樣品(S1)適量,按“1.2.3”項下“供試品溶液制備”方法制備供試品溶液,并按“1.2.1”項下“色譜條件”分別于室溫在0、2、4、8、12、24h進樣檢測,記錄峰面積。

1.2.5.4重復性考察取川烏樣品(S1)5份,按“1.2.3”項下“供試品溶液制備”方法制備供試品溶液,并按“1.2.1”項下“色譜條件”進樣檢測,記錄峰面積。

1.2.5.5加樣回收率考察取已知含量的川烏樣品(S1)適量,按一定比例(50%、100%、150%)加入混合對照品儲備液(Mes、Aco、Hyp、BMA、BAC、BHA),按“1.2.3”項下“供試品溶液制備”方法制備供試品溶液,并按“1.2.1”項下“色譜條件”重復測定3次,記錄各峰面積。

1.2.6指紋圖譜的建立分別取混合對照品溶液、15批川烏和15批制川烏制備的供試品溶液,按“1.2.1”項下“色譜條件”進樣檢測,記錄色譜圖。其混合對照品色譜圖見圖1。將所得15批川烏及15批制川烏的圖譜導入到“中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(2012版)”中,設S1樣品的圖譜為參照圖譜,時間窗寬度設為0.1min,選用中位數法,進行多點校正,以全譜峰進行峰匹配,生成對照指紋圖譜,分別得到15批川烏與15批制川烏樣品的指紋圖譜及其對照指紋圖譜,見圖2與圖3。

2結果與分析

2.1相似度分析

川烏樣品S1~S15與參照指紋圖譜的相似度結果分別為0.949、0.948、0.951、0.776、0.952、0.902、0.926、0.925、0.923、0.908、0.969、0.970、0.955、0.956、0.955,除樣品S4與參照圖譜的相似度為0.776外,其余樣品與參照圖譜的相似度均≥0.902,可知除陜西漢中產地外其余產地川烏相似

度較好;制川烏樣品SS1~SS15與參照指紋圖譜的相似度結果分別為0.812、0.870、0.756、0.738、0.925、0.914、0.913、0.900、0.898、0.862、0.836、0.924、0.903、0.912、0.904,除樣品SS3和SS4與參照圖譜的相似度為0.756和0.738外,其余樣品與參照圖譜的相似度均≥0.812,可知除陜西漢中產地,另外兩個產地相似度均較好,但也存在一定差異。

2.2化學計量法分析

2.2.1聚類分析(HCA)采用MetaboAnalyst5.0(https://www.metaboanalyst.ca/MetaboAnalyst/home.xhtml)統計學網站對15批川烏和15批制川烏指紋圖譜的34個特征峰峰面積進行聚類熱圖分析。由圖4可知,30批樣品被明顯聚為兩類,川烏(S1~S5為陜西漢中川烏的五個批次,S6~S10為四川江油川烏的五個批次,S11~S15為四川綿陽川烏的五個批次)聚為一類,制川烏(SS1~SS5為陜西漢中制川烏的五個批次,SS6~SS10為四川江油制川烏的五個批次,SS11~SS15為四川綿陽制川烏的五個批次)聚為一類。即川烏和制川烏能被明顯區分,說明川烏炮制前后化學成分有一定差異,可通過指紋圖譜的聚類分析將其分類。根據熱圖分析可判斷制川烏中峰2、3、5、7、9、16(BMA)、17(BAC)、18(BHA)、25、28、29代表的化學成分明顯高于川烏;川烏中峰10、11、12、13、15、19、20、21(Mes)、22(Hyp)、23(Aco)、24、26、27、30、31、32、34代表的化學成分明顯高于制川烏;四川江油的川烏中峰10、11、12、13、19、20、

21(Mes)、23(Aco)、24、30、34代表的化學成分明顯高于另外兩個產地。

2.2.2主成分分析(PCA)采用SIMCA14.1統計學軟件對15批川烏和15批制川烏指紋圖譜的34個特征峰峰面積進行主成分分析,得分矩陣圖見圖5,模型參數R2X值及預測能力參數Q2值分別為0.751和0.541。結果顯示30批樣品可被分為兩組,其中川烏(S1~S15)為一組,制川烏(SS1~SS15)為一組,此分組與HCA結果基本一致。此外批次S10位于得分圖范圍外,推測這一批樣品與其他批質量差異較大。

2.2.3偏最小二乘判別分析(PLSDA)采用SIMCA14.1分析軟件,分別對15批川烏和15批制川烏指紋圖譜的34個特征峰峰面積進行PLSDA分析,得分圖見圖6和圖7。模型參數R2X值、穩定性參數R2Y值及預測能力參數Q2值分別為0.996、0.999、0.977,說明所建PLSDA模型穩定性良好。結果顯示在得分散點圖中3個產地的川烏明顯被分為3類,該分析結果與HCA和PCA結果基本一致。從3個產地15批川烏中共提取得到

16個主成分[變量投影重要性指標(variableimportanceinprojection,VIP),VIP>1.0],其中峰32、27、33、16(BMA)、9、21(Mes)、11、20、23(Aco)、34、24、28、19、31、13和18(BHA)的變化對不同產地川烏的區分貢獻較大;同樣對3個產地15批制川烏進行PLSDA分析,共提取8個主成分(VIP>1.1),模型參數R2X值、R2Y值及Q2值分別為0.973、0.999、0.912,結果顯示在得分散點圖中3個產地的制川烏明顯被分為3類,峰34、30、28、16(BMA)、17(BAC)、5、29、18(BHA)、25、14的變化對不同產地制川烏的區分貢獻較大,該分析結果與HCA和PCA結果基本一致。

2.2.4正交偏最小二乘判別分析(OPLSDA)采用SIMCA14.1軟件,對15批川烏和15批制川烏指紋圖譜的34個特征峰峰面積進行OPLSDA分析,提取得到8個主成分(VIP>1.0),模型參數R2X值、R2Y值及Q2值分別為0.721、0.960、0.941,在得分散點圖中炮制前后的川烏明顯被分為2類,峰22(Hyp)、2、1、21(Mes)、19、3、7和10的變化對炮制前后的區分貢獻較大,該分析結果與HCA和PCA結果基本一致,具體見圖8。采用置換檢驗(n=200)對當前模型進行驗證,檢驗參數R2=(0.0,0.143),Q2=(0.0,-0.396),結果見圖9,左側隨機排列產生的R2及Q2的值均小于右側的原始值,表明所建立的OPLSDA模型擬合良好,能夠用于川烏與制川烏的判別分析。

對陜西漢中產地10批炮制前后川烏進行OPLSDA分析,共提取得到9個主成分(VIP>1.1),

模型參數R2X值、R2Y值及Q2值分別為0.991、0.999、0.995,結果顯示在得分散點圖中炮制前后的川烏明顯被分為2類,峰22(Hyp)、1、2、3、7、21(Mes)、6、5、19的變化對陜西漢中產地炮制前后川烏的區分貢獻較大,推測次烏頭堿(Hyp)可能為陜西漢中產地川烏炮制前后的差異成分,該分析結果與HCA和PCA結果基本一致,見圖10。

對四川江油產地10批炮制前后川烏進行OPLSDA分析,共提取得到15個主成分(VIP>1.1),模型參數R2X值、R2Y值及Q2值分別為0.792、0.998、0.994,結果顯示在得分散點圖中炮制前后的川烏明顯被分為2類,峰23(Aco)、22(Hyp)、26、24、32、6、19、21(Mes)、34、31、10、1、15、30、27的變化對四川江油產地炮制前后川烏的區分貢獻較大,推測烏頭堿(Aco)可能為四川江油產地川烏炮制前后的差異成分,該分析結果與HCA和PCA結果基本一致,見圖11。

對四川綿陽產地10批炮制前后川烏進行OPLSDA分析,共提取得到9個主成分(VIP>1.0),模型參數R2X值、R2Y值及Q2值分別為0.964、0.999、0.995,結果顯示在得分散點圖中炮制前后的川烏明顯被分為2類,峰2、22(BAC)、1、7、19、3、21(BMA)、17(BHA)、10的變化對四川綿陽產地炮制前后川烏的區分貢獻較大,推測苯甲酰烏頭原堿(BAC)可能為四川綿陽產地川烏炮制前后的差異成分,該分析結果與HCA和PCA結果基本一致,見圖12。

通過上述化學計量學方法分別對3個不同產地各10批川烏炮制前后的差異成分與所有產地30批川烏炮制前后的差異性成分進行篩選與比對,得出4個共有的差異成分,分別為峰1、19、21(Mes)和22(Hyp),與于永軍等(2009)報道的基本一致,被指認的新烏頭堿(Mes)和次烏頭堿(Hyp)可能為川烏炮制前后潛在差異成分。川烏3個不同產地的11個主要潛在差異成分,分別為峰11、13、19、20、21(Mes)、23(Aco)、24、27、31、32和34,結合文獻(魏惠珍等,2020)認為被指認的新烏頭堿(Mes)可能為不同產地川烏潛在差異成分;制川烏3個不同產地的6個主要潛在差異成分,分別為峰5、16(BMA)、17(BAC)、18(BHA)、25和29,被指認的苯甲酰新烏頭原堿(BMA)、苯甲酰烏頭原堿(BAC)和苯甲酰次烏頭原堿(BHA)可能為不同產地制川烏的潛在差異成分。

2.3方法學考察結果

2.3.1線性關系考察分別以質量濃度為橫坐標(X)與峰面積為縱坐標(Y),進行線性回歸,得到Mes、Aco、Hyp、BMA、BAC、BHA的線性回歸方程分別為Y=1430998172X+203326.359(r=0.9990)、Y=14679346.9618X-37144.5228(r=0.9997)、Y=16104467.1166X-50882.6064(r=0.9997)、Y=16143894.8115X-271765.7667(r=0.9996)、Y=26224738.8882X-121965.41(r=0.9995)、Y=28537646.8818X-45476467(r=0.9987),線性范圍分別為0.0127~0.3170mg·mL1、0.0127~0.3180mg·mL1、0.0120~0.3000mg·mL1、0.0780~0.9000mg·mL1、0.0130~0.1500mg·mL1、0.0169~0.1950mg·mL1。

2.3.2精密度考察計算Mes、Aco、Hyp、BMA、BAC、BHA峰面積的相對標準偏差(relativestandarddeviation,RSD)分別為1.69%、2.31%、2.02%、3.05%、2.98%、3.66%(n=5),表明儀器精密度較好。

2.3.3穩定性考察計算Mes、Aco、Hyp、BMA、BAC、BHA峰面積的RSD分別為3.64%、2.92%、3.81%、2.58%、1.69%、3.99%(n=6),表明該供試品溶液在室溫條件下24h內穩定。

2.3.4重復性考察計算Mes、Aco、Hyp、BMA、BAC、BHA峰面積的RSD分別為3.75%、3.88%、3.08%、3.19%、2.96%、2.01%(n=5),表明該方法重復性較好。

2.3.5加樣回收率考察計算Mes、Aco、Hyp、BMA、BAC、BHA的平均加樣回收率分別為97.97%、98.65%、97.91%、98.20%、97.02%、100.01%,RSD分別為4.75%、4.08%、3.28%、3.99%、4.06%、2.91%(n=3)。

2.4含量測定結果

30批炮制前后的川烏含量測定結果見表1及表2,本實驗中制川烏樣品的雙酯型生物堿可能由于含量極低均未檢出,故未列在表格中。由含量測定結果可知,3個產地川烏中四川江油所產川烏的新烏頭堿(Mes)和烏頭堿(Aco)含量明顯高于另外兩個產地,其中新烏頭堿含量最高,與熊江等(2005)研究結果一致,另外兩個產地川烏中的次烏頭堿(Hyp)含量最高,這可能與四川江油的地理環境有關(林華和鄧廣海,2011;Luoetal.,2018;魏惠珍等,2020)。炮制后單酯型烏頭堿含量均增加,雙酯型烏頭堿含量顯著減少,與于永軍等(2009)研究結果一致,其中四川江油產川烏炮制后苯甲酰新烏頭原堿(BMA)含量升高且明顯高于另外兩個產地,而另外兩產地川烏炮制后苯甲酰次烏頭原堿(BHA)含量升高地更顯著,以上含測結果與化學計量學分析結果相互佐證。

3討論與結論

本實驗分別選用無水乙醇、95%乙醇、異丙醇-乙酸乙酯(1∶1)3種溶劑對供試品進行超聲提取,結果表明,采用異丙醇-乙酸乙酯(1∶1)提取得到的供試品溶液,經HPLC檢測所得的色譜峰較多且峰形較好;另外本課題組還考察了乙腈-四氫呋喃(25∶15)-0.1mol·L1醋酸銨溶液(每1000mL加冰醋酸0.5mL)、乙腈-0.1mol·L1醋酸銨溶液、乙腈-冰醋酸(0.2%)水溶液(三乙胺調pH值6.20)3個流動相系統,最終選擇乙腈-冰醋酸(0.2%)水溶液(三乙胺調pH值6.20)作為流動相系統,分離度及峰形均較好,且基線較平穩,有利于指紋圖譜分析。

相似度分析結果顯示四川省兩個產地的川烏與制川烏相似度均高于陜西漢中;化學計量法分析結果顯示新烏頭堿和次烏頭堿可能為川烏炮制前后潛在差異成分,結合魏惠珍等(2020)推測新烏頭堿可能為不同產地川烏的潛在差異成分,苯甲酰新烏頭原堿、苯甲酰烏頭原堿和苯甲酰次烏頭原堿可能為不同產地制川烏的潛在差異成分;含量測定結果顯示3個產地川烏中四川江油的新烏頭堿含量最高,與熊江等(2005)研究結果一致,且明顯高于另外兩個產地,3個產地制川烏中四川江油的苯甲酰新烏頭堿含量明顯高于另外兩個產地。結合上述結果分析,新烏頭堿和苯甲酰新烏頭堿可能分別為四川江油道地產川烏與制川烏的差異性成分,且本實驗通過對比化學計量學結果發現,不同產地川烏及制川烏潛在差異成分不存在交集,對比于永軍等(2009)研究發現炮制前后化學成分差異較明顯,因此川烏生品及炮制品應分別建立產地差異質量控制標準。

綜上所述,建立川烏與制川烏的HPLC指紋圖譜可較為全面地反映3個產地川烏炮制前后的化學成分信息,結合化學計量學及主成分含量測定,使分析結果更科學和全面,可為完善川烏與制川烏的質量控制標準提供實驗依據。

參考文獻:

ChinesePharmacopoeiaCommission,2020.PharmacopoeiaofthePeople’sRepublicofChina:VersionⅠ[M].Beijing:ChinaMedicalSciencePress:40-43.[國家藥典委員會,2020.中華人民共和國藥典:一部[M].北京:中國醫藥科技出版社:40-43.]

DENGGH,2011.ThestudyofprocessingtechnologyandfingerprintofAconitiRadixandAconitiKusnezoffiiRadix[D].Guangzhou:GuangzhouUniversityofChinesemedicine.[鄧廣海,2011.川烏、草烏炮制工藝及指紋圖譜的研究[D].廣州:廣州中醫藥大學.]

HUANGZF,YIJH,CHENDA,etal.,2011.HPLCspecificchromatogramofRadixAconitiPraeparataanddeterminationofsixestericalkaloids[J].ChinJPharmAnal,31(2):217-221.[黃志芳,易進海,陳東安,等,2011.制川烏HPLC特征圖譜研究和6種酯型生物堿的含量測定[J].藥物分析雜志,31(2):217-221.]

LIMT,XIEXF,CHENHM,etal.,2020.AconitineinducescardiotoxicitythroughregulationofcalciumsignalingpathwayinzebrafishembryosandinH9c2cells[J].JApplToxicol,40(6):1-14.

LINH,DENGGH,2011.HPLCfingerprintofRadixAconiti[J].ChinJExpTradMedForm,17(3):73-76.[林華,鄧廣海,2011.川烏HPLC指紋圖譜的研究[J].中國實驗方劑學雜志,17(3):73-76.]

LIUF,HANX,LIN,etal.,2019.Aconitumalkaloidsinducecardiotoxicityandapoptosisinembryoniczebrafishbyinfluencingtheexpressionofcardiovascularrelativegenes[J].ToxicolLett,305(2):10-18.

LIUS,LIF,LIY,etal.,2017.AreviewoftraditionalandcurrentmethodsusedtopotentiallyreducetoxicityofAconitumrootsinTraditionalChineseMedicine[J].JEthnopharmacol,207:237-250.

LUOH,HUANGZF,TANGXL,etal.,2016.DynamicvariationpatternsofaconitumalkaloidsindaughterrootofAconitumcarmichaelii(Fuzi)inthedecoctionprocessbasedonthecontentchangesofnineaconitumalkaloidsbyHPLC-MS-MS[J].IranJPharmRes,15(1):263-273.

LUOCM,YIFL,XIAYL,etal.,2018.ComprehensivequalityevaluationofthelateralrootofAconitumcarmichaeliiDebx.(Fuzi):simultaneousdeterminationofninealkaloidsandchemicalfingerprintingcoupledwithchemometricanalysis[J].JSepSci,42(5):980-990.

MALJ,CHENQX,HANL,etal.,2016.StudyonHPCE-DADfingerprintofaconitumandaconite[J].InnMongolTradChinMed,35(15):5.[馬麗娟,陳巧霞,韓樂,等,2016.烏頭附子類藥材HPCE-DAD指紋圖譜的研究[J].內蒙古中醫藥,35(15):5.]

MIAOLL,ZHOUQM,PENGC,etal.,2019.DiscriminationofthegeographicaloriginofthelateralrootsofAconitumcarmichaeliiusingthefingerprint,multicomponentquantification,andchemometricmethods[J].Molecules,24(22):4124.

NYIRIMIGABOE,XUYY,LIYB,etal.,2015.Areviewonphytochemistry,pharmacologyandtoxicologystudiesofAconitum[J].JPharmPharmacol,67(1):1-19.

QINY,WANGJB,ZHAOYL,etal.,2012.EstablishmentofabioassayforthetoxicityevaluationandqualitycontrolofAconitumherbs[J].JHazardMat,199-200(15):350-357.

QINYX,2016.StudyonfactorsaffectingqualityandqualitycontrolinprocessingofRadixAconiti[D].Beijing:BeijingUniversityofChineseMedicine.[秦語欣,2016.川烏炮制過程中影響質量的因素分析及質量控制研究[D].北京:北京中醫藥大學.]

SHAWD,2010.ToxicologicalrisksofChineseherbs[J].PlantaMed,76(17):2012-2018.

SIXX,2019.StudyonthequalityevaluationandgradestandardofAconitiRadix[D].Ya’an:SichuanAgriculturalUniversity.[司欣鑫,2019.川烏質量評價及等級標準研究[D].雅安:四川農業大學.]

TANGM,ZHAOLC,XUM,etal.,2017.ChemicalconstituentsandpharmacologicalactivitiesofAconitilateralisRadixPraeparata[J].Guihaia,37(12):1614-1627.[唐梅,趙立春,徐敏,等,2017.附子化學成分和藥理作用研究進展[J].廣西植物,37(12):1614-1627.]

WANGC,SUNDN,LIUCF,etal.,2015.MotherrootofAconitumcarmichaeliiDebeauxexertsantinociceptiveeffectinCompletFreund’sAdjuvantinducedmice:rolesofdynorpin/kappaopioidsystemandtransientreceptorpotentialvanilloidtype1ionchannel[J].JTranslMed,13(1):284.

WANGFP,CHENQH,2010.TheC19-diterpenoidalkaloids[J].TheAlkaloidsChemBiol,69:1-577.

WEIHZ,YANGL,SONGXZ,etal.,2020.StudyonqualitymarkerofAconitiRadixbasedonmultivariatestatisticalanalysis[J].ChinMedMat,43(7):1658-1662.[魏惠珍,楊磊,宋細忠,等,2020.基于多元統計分析的川烏質量標志物研究[J].中藥材,43(7):1658-1662.]

XIONGJ,TANNH,ZHOUJ,2005.FingerprintandalkaloidcontentdeterminationofRadixAconiti[C].Wuhan:Proceedingsofthe8thNationalSymposiumontraditionalChinesemedicineandnaturalmedicineandthe5thNationalSymposiumonmedicinalplantsandplantpharmacy:343.[熊江,譚寧華,周俊,2005.川烏的指紋圖譜及生物堿含量測定[C].武漢:第八屆全國中藥和天然藥物學術研討會與第五屆全國藥用植物和植物藥學學術研討會論文集:343.]

YANGL,2020.StudyofqualitystandardofAconitiRadixqualityevaluationandgradestandardresearch[D].Nanchang:JiangxiUniversityofChineseMedicine.[楊磊,2020.川烏質量標準化研究-質量評價和等級標準研究[D].南昌:江西中醫藥大學.]

YEXT,ZHONGLY,ZHANGDY,etal.,2020.ResearchprogressonmultimaterialandmultiprocessprocessingofAconitiRadix[J].ChinJExpTradMedForm,26(18):202-209.[葉協滔,鐘凌云,張大永,等,2020.川烏的多物料,多流程炮制研究進展[J].中國實驗方劑學雜志,26(18):202-209.]

YUHH,LIM,LIYB,etal.,2019.BenzoylaconitineinhibitsproductionofIL6andIL8viaMAPK,Akt,NFκBsignalinginIL1βinducedhumansynovialcells[J].BiolPharmBull,43(2):334-339.

YUYJ,LIJS,CAIH,etal.,2009.ThecomparativestudyofHPLCfingerprintbetweenRadixAconitiandRadixAconitiPreparata[J].ChinArchTradChinMed,27(11):2456-2458.[于永軍,李俊松,蔡皓,等,2009.川烏炮制前后高效液相色譜指紋圖譜比較研究[J].中華中醫藥學刊,27(11):2456-2458.]

ZHAOFC,NIEJH,WANGW,etal.,2014.HPLCfingerprintanalysisofAconitumHerbalsinXinjiang[J].JChinPharmSci,49(24):2159-2164.[趙翡翠,聶繼紅,王偉,等,2014.基于HPLC指紋圖譜的準噶爾烏頭化學親緣關系研究[J].中國藥學雜志,49(24):2159-2164.]

ZHAOJN,HUAH,DAIY,etal.,2020.DaodiherbspharmacologyandnewideasofDaodiherbsstandardconstruction[J].ChinJChinMatMed,45(4):7-12.[趙軍寧,華樺,戴瑛,等,2020.道地藥材藥理學與道地藥材標準構建新思路[J].中國中藥雜志,45(4):7-12.]

ZHENGQF,ZHAOYL,WANGJB,etal.,2014.Spectrum-effectrelationshipsbetweenUPLCfingerprintsandbioactivitiesofcrudesecondaryrootsofAconitumcarmichaeliiDebeaux(Fuzi)anditsthreeprocessedproductsonmitochondrialgrowthcoupledwithcanonicalcorrelationanalysis[J].JEthnopharmacol,153(3):615-623.

ZHUHB,WANGCY,QIY,etal.,2013.FingerprintanalysisofRadixAconitiusingultraperformanceliquidchromatographyelectrosprayionization/tandemmassspectrometry(UPLCESI/MSn)combinedwithstoichiometry[J].Talanta,103:56-65.

(責任編輯周翠鳴)

收稿日期:2022-01-28

基金項目:國家重點研發計劃項目(2018YFC1707103);黑龍江省“頭雁”團隊項目

第一作者:吳丹丹(1990-),碩士研究生,研究方向為中藥藥效物質基礎及作用機制,(Email)dlwudd@163.com。

通信作者:楊炳友,博士,教授,研究方向為中藥藥效物質基礎及作用機制,(Email)ybywater@163.com。

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