血清SAA、S100A12和ApoA1在早發型新生兒敗血癥診斷和隨訪中的臨床價值*

符發仙，吉張艷，鄺少丹

海南省東方市人民醫院兒科，海南東方 572600

敗血癥在新生兒中發病率和病死率較高，也可能產生嚴重后果及長期影響，如神經發育不良、哮喘或過敏性疾病風險增加等[1]。由于血培養耗時較長且準確性較低，且目前還沒有理想的實驗室生物標志物進行敗血癥診斷，因此新生兒敗血癥的早期診斷具有較大的挑戰性[2]。血清淀粉樣蛋白(SAA)是一種由肝臟合成的高度保守的蛋白質，已被證實為一種炎性反應急性期產物。在血液循環中，SAA可取代載脂蛋白A1(ApoA1)與高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)結合，導致HDL-C分子的半衰期大大降低。此外，宿主對感染的反應與釋放內源性損傷相關的分子模式(DAMPs)有關，包括S100蛋白家族成員。其中S100A12主要在粒細胞中表達，經病原體刺激釋放可能導致全身炎癥和血栓性并發癥以及繼發性器官衰竭。SAA、S100A12、ApoA1在許多急性和慢性疾病中都有報道，然而其作為早發型新生兒敗血癥的診斷或隨訪監測標志物的作用尚不清楚。因此，本研究旨在評價SAA、S100A12和ApoA1水平在早發型新生兒敗血癥診斷和隨訪監測中的價值。

1 資料與方法

1.1一般資料 本研究是一項前瞻性單中心研究，共納入2018年3月至2021年3月在本院分娩的229例早產新生兒為研究對象，其中男141例，女88例；胎齡(34.00±1.16)周，出生體質量(2 714.97±599.36)g。納入標準：具有感染高危因素或疑似細菌感染臨床表現，出生后72 h內入院。其中113例新生兒在出生3 d內被診斷為早發型新生兒敗血癥(敗血癥組)，男67例，女46例；胎齡(34.09±1.13)周，出生體質量(2 751.55±520.83)g。敗血癥診斷標準參照《新生兒敗血癥診斷及治療專家共識(2019年版)》[3]，所有患兒均有敗血癥臨床表現，結合白細胞計數(WBC)、中性粒細胞百分比(NEUT%)、血細菌培養等明確診斷。其余116例納入一般感染組。另外，納入100例非感染早產新生兒為對照組，其中男68例，女32例；胎齡(34.26±1.09)周，出生體質量(2 830.00±499.53)g。對照組新生兒由出生后因感染因素以外的其他原因入院，包括暫時性呼吸急促、黃疸、慢性缺血性二尖瓣反流、胃食管反流等。排除圍生期窒息、先天性畸形、有抗菌藥物治療史或手術史、年齡>3 d、有高脂血癥或低血脂家族史的新生兒。用標準的實驗室方法來鑒定培養基上生長的微生物。患兒在取得血液、尿液、腦脊液或其他培養物后，通過靜脈注射抗菌藥物進行治療。試驗得到受試者監護人完全知情的同意，并經本院倫理委員會批準。

1.2方法 在入院第0天(D0)時，所有新生兒都進行了靜脈血及尿液取樣分析和培養。常規血液檢查包括全血細胞計數[WBC、血小板計數(PLT)、降鈣素原(PCT)、NEUT%]、血氣分析、血液化學成分(葡萄糖水平、腎臟和肝臟功能)、凝血試驗和血清C反應蛋白(CRP)水平。在入院后D0、D1、D3、D7時，采集敗血癥患兒的靜脈血樣，采用分離膠促凝管取全血3 mL，在2 500 r/min分離血液10 min后，30 min內檢測血清SAA、S100A12和ApoA1水平。應用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)試劑盒(上海通蔚生物公司)測定血清SAA、S100A12的水平。以水平軸為標準品濃度，垂直軸為吸光度值，用相關軟件繪制標準曲線，計算待測指標水平，嚴格按照說明書指示進行操作，試驗前所有試劑混合均勻。應用全自動生化儀測定ApoA1的水平，其原理為免疫透射比濁法，所用試劑盒購自上海科華生物工程股份有限公司。

2 結 果

2.13組臨床資料的比較 對比3組新生兒臨床資料，結果顯示，敗血癥組產前發熱比例和胎膜早破比例均高于對照組和一般感染組，且住院時間更長(P<0.05)；其余指標在3組間比較，差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 臨床資料在3組新生兒間的比較

2.23組新生兒血清SAA、S100A12、Apo-A1水平比較 與對照組相比，一般感染組和敗血癥組患兒血清SAA、S100A12水平升高，同時血清ApoA1水平降低(P<0.05)；敗血癥組患兒血清SAA、S100A12水平高于一般感染組患兒，血清ApoA1水平則低于一般感染組患兒(P<0.05)。見表2。

表2 3組新生兒入院時血清SAA、S100A12、ApoA1水平比較

2.33組感染指標異常情況比較 與對照組相比，一般感染組和敗血癥組患兒的WBC、PLT、PCT、NEUT%、CRP指標異常率均升高(P<0.05)，然而一般感染組和敗血癥組患兒上述感染指標異常率比較，差異無統計學意義(P>0.05)。見表3。

表3 3組新生兒感染指標異常情況比較[n(%)]

2.4血清SAA、S100A12及ApoA1水平對早發型新生兒敗血癥的診斷價值 經ROC曲線分析，血清SAA、S100A12、ApoA1水平對于早發型新生兒敗血癥診斷和鑒別診斷均有一定的價值，其中SAA和S100A12診斷和鑒別診斷早發型新生兒敗血癥的曲線下面積(AUC)均大于0.7，說明診斷效能良好；而ApoA1的AUC均小于0.7，提示診斷效能一般。見表4、5。

表4 血清SAA、S100A12及ApoA1水平對早發型新生兒敗血癥的診斷價值分析

表5 血清SAA、S100A12及ApoA1水平對早發型新生兒敗血癥的鑒別診斷價值分析

2.5早發型新生兒敗血癥患兒血清SAA、S100A12及ApoA1水平動態變化 隨訪D0、D1、D3、D7各指標的水平變化，結果顯示，發生早發型新生兒敗血癥患兒血清SAA、S100A12水平都有不同程度升高，同時血清ApoA1水平則不同程度降低，但隨著治療的進行，血清SAA、S100A12水平逐漸降低，同時血清ApoA1水平則逐漸升高。見表6。

表6 早發型新生兒敗血癥患兒血清SAA、S100A12及ApoA1水平動態變化情況

3 討 論

新生兒敗血癥是威脅新生兒生命的重大疾病，近期發布的《新生兒敗血癥診斷及治療專家共識(2019年版)》[3]是我國新生兒專家第三次針對新生兒敗血癥制定的專家共識。共識的頒布為新生兒敗血癥診斷和治療提供了可靠依據。血細菌培養仍是診斷敗血癥的金標準，然而血培養需要24～48 h才可得到陽性結果。另外，由于新生兒采血量不足、采血前多已應用抗菌藥物治療等原因，細菌培養陽性率明顯降低。近年來，許多臨床檢測指標(如細胞因子、細胞表面抗原等)已逐漸應用于新生兒敗血癥的早期診斷。

SAA是一種非特異性急性時相反應蛋白，屬于載脂蛋白家族。生理情況下，人體血液中SAA水平極低，僅為2.33 μg/mL，在炎癥及組織損傷時，SAA可迅速增加，在8～12 h達峰值，可升高至最初濃度的100～1 000倍，但由于SAA半衰期極短，當刺激因素消退后，可在肝臟及腎臟中迅速代謝而使血清水平降至正常[4]。SAA的降解產物能以淀粉樣蛋白A(AA)原纖維的方式沉積在不同的器官中，在慢性炎癥性疾病中會導致嚴重的并發癥。SAA水平是反映感染性疾病早期炎癥程度的敏感指標，因此有助于炎癥診斷。目前已有多項研究表明，SAA可作為新生兒敗血癥早期診斷的良好指標[4-6]。DENG等[7]研究結果顯示，SAA與CRP、PCT聯合應用診斷新生兒敗血癥的準確率可以從單獨應用SAA的72%～76%提高到82%～85%。以上研究表明，SAA與CRP、PCT等指標聯合后，診斷陽性率明顯提高，這些指標是新生兒敗血癥早期診斷的可靠指標。

S100A12屬于S100蛋白家族的成員之一。S100A12基因定位于人染色體1q21，DNA全長1 895 kb，其編碼的蛋白S100A12相對分子質量為10 575，由92個氨基酸組成[3]。S100A12表達于中性粒細胞，在淋巴細胞、單核細胞中低表達。S100A12可參與中性粒細胞的鈣調節作用以及花生四烯酸代謝作用[8]。S100A12的功能尚不完全明確，有證據表明其與中性粒細胞和紅細胞功能相關，可能與抗微生物功能及產生凋亡因子有關[9-10]。EBIHARA等[11]證實，S100A12水平在川崎病急性期高表達，應用丙種球蛋白治療24 h后，S100A12水平明顯下降并在1個月內恢復正常水平。FOELL等[12]研究表明，S100A12在炎癥性滑膜組織中高表達，并推測其與類風濕性關節炎的活動程度有關，因此S100A12蛋白可作為類風濕性關節炎的血清學指標。KAISER等[13]發現，檢測糞便中性粒細胞分泌的S100A12蛋白有助于鑒別診斷炎癥性腸病和腸易激綜合征，S100A12蛋白的水平可作為監測炎癥性腸病活動的非侵入性指標。由于S100A12是一種具有促進炎性反應的鈣結合蛋白，其主要作用是使血管內皮細胞黏附分子表達上調、激活炎癥細胞、化學趨化和抗微生物作用，因此可作為炎癥性疾病的診斷指標。本研究分析了S100A12在早發型新生兒敗血癥診斷中的價值，結果表明，S100A12診斷早發型新生兒敗血癥的價值較高。

載脂蛋白是血漿脂蛋白中的蛋白質部分，能夠結合和運輸血脂到機體各組織進行代謝。ApoA1由肝臟和小腸合成，是組織中含量最高的載脂蛋白，其功能主要是組成高密度脂蛋白(HDL)并維持其結構的穩定性和完整性，激活卵磷脂膽固醇脂酰轉移酶催化膽固醇酯化，另外，ApoA1還可作為HDL受體的配體。ApoA1可反映HDL水平，已知冠心病[14]、腦血管疾病[15]患者ApoA1水平偏低，未控制的糖尿病[16]、慢性肝病[17]、慢性腎功能衰竭[18]等均可引起ApoA1水平降低。

本研究通過對比一般感染組、敗血癥組和對照組患兒的臨床指標發現，與對照組相比，一般感染組和敗血癥組患兒感染指標，包括WBC、PLT、PCT、NEUT%、CRP的異常率均升高(P<0.05)，然而一般感染組和敗血癥組患兒上述感染指標異常率比較，差異無統計學意義(P>0.05)。說明只檢測常規生化指標可能對于新生兒敗血癥的鑒別準確性較低。而血清SAA、S100A12水平則對于早發型新生兒敗血癥的診斷和鑒別診斷則都具有較高的價值，AUC>0.7。為進一步探究SAA、S100A12及ApoA1水平在診斷早發型新生兒敗血癥和鑒別診斷中的臨床價值，本研究分別檢測了D0、D1、D3、D7時血清SAA、S100A12及ApoA1水平變化，發現SAA、S100A12及ApoA1隨著時間的遷移，各指標水平均有不同程度的動態變化，提示在發病早期及時檢測血清SAA、S100A12、ApoA1水平有助于臨床診斷和治療。

綜上所述，早發型新生兒敗血癥患兒普遍存在血清SAA、S100A12水平升高和ApoA1水平降低情況，檢測這3項指標有望為臨床診斷提供一定的幫助。