原發(fā)性舍格倫綜合征30 例IL-27 表達水平及其與羥氯喹干預效果的關系

郭卉，沈安妮，邵一帆

九江市第一人民醫(yī)院，江西 九江 332000

原發(fā)性舍格倫綜合征（primary Sjogren's syndrome，PSS）又稱為原發(fā)性干燥綜合征，是一個主要累及外分泌腺體的慢性炎癥性自身免疫病。臨床上除有唾液腺和淚腺受損，分泌功能下降而出現(xiàn)口干、眼干外，尚有腺體外其他器官的受累而出現(xiàn)多系統(tǒng)損害的癥狀［1］，患者血清中則有多種自身抗體和高免疫球蛋白血癥［2］。目前PSS 的治療還是經驗性的，主要以對癥和替代治療為主，出現(xiàn)嚴重內臟損害者，可應用糖皮質激素和免疫抑制劑。國內外文獻報道均顯示羥氯喹治療PSS 可減輕患者的關節(jié)痛和改善患者的免疫學指標。

白細胞介素27（IL-27）是一種在免疫系統(tǒng)中發(fā)揮多效性的細胞因子，在生理和病理條件下均具有多種免疫調節(jié)活性［3］。IL-27 增強了Th1 和CD8 的功能T 細胞，促進Tfh 和Tr1 的發(fā)育，抑制Th2、Treg、Th9 和Th17 細胞的功能。IL-27 還參與調解B 細胞、NK、DCs 和巨噬細胞的免疫應答。IL-27 的產生在轉錄和轉錄后水平上都受到嚴格的調控［4］。IL-27 對免疫調節(jié)具有廣泛作用，它與眾多自身免疫性疾病有關。原發(fā)性舍格倫綜合征的致病機制至今尚未完全闡明，本研究通過檢測原發(fā)性舍格倫綜合征患者外周血中IL-27 的水平，旨在探討原發(fā)性舍格倫綜合征患者治療前后外周血中IL-27 的水平并了解羥氯喹的干預效果，以期為臨床治療提供參考依據。

1 資料與方法

1.1 研究對象

選取2019 年1 月至2020 年12 月于九江市第一人民醫(yī)院治療的持續(xù)單純應用硫酸羥氯喹片（上海上藥中西制藥有限公司，國藥準字H19990263）6 個月以上的原發(fā)性舍格倫綜合征患者（PSS 組）30 例和健康體檢者（對照組）30 例作為研究對象。其中原發(fā)性舍格倫綜合征患者組中男3 例，女27 例，平均年齡51.8 歲；對照組中男5 例，女25 例，平均年齡50.1 歲。兩組觀察對象在性別與年齡等一般資料間比較均差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），具有可比性。本研究符合醫(yī)學倫理原則要求。

1.2 入選標準

所有入選的原發(fā)性舍格倫綜合征患者均符合2016 年美國歐洲風濕病聯(lián)盟制定的分類診斷標準［5］,同時在整個觀察期持續(xù)單純應用羥氯喹（0.2～0.4 g/d），未用激素、免疫抑制劑、生物制劑或小分子靶向藥、植物制劑或中藥，未長期應用滴眼液、促進唾液分泌的藥物，并剔除合并糖尿病、腫瘤、感染或其他免疫系統(tǒng)疾病者。

1.3 標本采集及處理

用干燥管抽取所有原發(fā)性舍格倫綜合征患者及體檢者清晨空腹靜脈血兩管，每管約3 mL,經 4 000 r/min 離心5 min 后分離血清于-80 ℃冰箱凍存待檢。用酶聯(lián)免疫吸附試劑盒（BD 公司）檢測所有研究對象外周血中IL-27 的水平，所有步驟嚴格按照試劑盒說明書執(zhí)行。ESR 選用重慶天海動態(tài)血沉分析儀（ESR-2040）檢測，C 反應蛋白（CRP）、免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）和免疫球蛋白E（IgE）選用全自動特定蛋白儀（BECKMAN IMMAGE800）檢測。

1.4 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 25.0 軟件對所有數(shù)據進行統(tǒng)計分析，實驗結果以表示，采用t檢驗，Spearman 法用于分析各指標間的相關性，以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 原發(fā)性舍格倫綜合征患者外周血中IL-27 的濃度變化

PSS 組和健康對照組外周血中IL-27 的水平分別為（14.54±1.54）pg/mL 和（24.64±1.83）pg/mL，PSS 組的IL-27 水平明顯低于對照組，兩組之間的差異有統(tǒng)計學意義（t=22.75，P＜0.001），見圖1。

2.2 PSS 組與對照組炎癥因子的結果比較

原發(fā)性舍格倫綜合征患者外周血中的炎癥因子ESR、CRP、IgA、IgG、IgM 以及IgE 水平分別高于對照組，且差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），詳見表1。

表1 PSS組和對照組的結果比較（）

表1 PSS組和對照組的結果比較（）

2.3 IL-27 與其他炎癥因子的相關性比較

根據Spearman 相關性分析結果顯示，在原發(fā)性舍格倫綜合征患者外周血中，IL-27 與ESR、CRP和IgG 分別呈負相關（r=-0.439 6、-0.382 6、-0.468 9，P＜0.05），而IL-27 與IgA、IgM 和IgE 之間無相關性（P＞0.05）。具體詳見圖2。

圖2 外周血IL-27表達水平與其他炎癥因子（A.ESR；B.CRP；C.lgG；D.lgA；E.lgM；F.lgE）的相關性比較

2.4 羥氯喹治療前后原發(fā)性舍格倫綜合征患者外周血中IL-27 的水平比較

羥氯喹治療前后原發(fā)性舍格倫綜合征患者外周血中IL-27 的水平分別為（14.54±1.54）pg/mL 和（22.52±1.89）pg/mL，羥氯喹治療前的IL-27 水平明顯低于治療后，差異有統(tǒng)計學意義（t=19.04，P＜0.001），見圖3。

圖3 羥氯喹治療前后外周血中IL-27的水平比較

3 討論

原發(fā)性舍格倫綜合征是指不具另一診斷明確的結締組織病（CTD）的干燥綜合征，是一種主要累及外分泌腺體的慢性炎癥性自身免疫病。原發(fā)性舍格倫綜合征的女性患者明顯多于男性，多于40～60歲發(fā)病。原發(fā)性舍格倫綜合征是一種全球性的自身免疫病，在我國人群的發(fā)病率為0.33%～0.77%，屬于風濕免疫科常見疾病。原發(fā)性舍格倫綜合征的常見臨床表現(xiàn)包括口眼干燥、關節(jié)腫痛及乏力、低熱等全身癥狀［6-7］。同時，原發(fā)性舍格倫綜合征患者血清中存在SSA 和Ro-52 等多種自身抗體［8-9］。

原發(fā)性舍格倫綜合征的發(fā)病原因至今不清，但大部分學者認為其是一個多種因素相互作用的結果，例如遺傳因素、感染因素和內分泌因素等都可能參與了疾病的發(fā)生和發(fā)展。有研究證實，HLA-B8、DR3 和DRw52 基因在原發(fā)性舍格倫綜合征患者中的陽性率顯著高于正常人群，這說明攜帶某些易感基因是原發(fā)性舍格倫綜合征的易感因素［10-11］。此外，在許多原發(fā)性舍格倫綜合征患者體內均發(fā)現(xiàn)EB 病毒有活躍復制，有專家推測EB 病毒可激活B 細胞，使之分化、增殖，進而產生大量的免疫球蛋白和自身抗體［12-13］。同時有學者認為，由于原發(fā)性舍格倫綜合征女性患者較多，因此雌激素的水平高可能也參與了疾病的發(fā)生發(fā)展［14］。

IL-27 是IL-12 家族的成員，由Epstein-Barr病毒誘導基因3（EBI3）和p28 亞基組成，前者與IL-12 p35 共享，后者是IL-27 的獨特亞基。IL-27通過其由兩條細胞內鏈組成的受體向細胞發(fā)出信號，gp130 與IL-6 和一條稱為IL-27Ra（也稱為WSX-1 或TCCR）的特定鏈共享。通過與其受體結合，IL-27 激活Janus 激酶（JAK）/信號轉導和轉錄激活劑（STAT）和絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）信號，以在不同生理和病理條件下發(fā)揮多種免疫調節(jié)活性［15-16］。IL-27 產生的主要來源是樹突狀細胞和巨噬細胞。IL-27 在調節(jié)自身免疫性疾病的免疫反應中發(fā)揮多效作用。IL-27 一方面通過促進Th1、CD8、NK、Tfh 和B 細胞增殖功能以及通過抑制Treg 和Th2 細胞生成發(fā)揮促炎作用。另一方面，IL-27 還通過增強 IL-10 的產生和抑制樹突狀細胞功能發(fā)揮抗炎作用［17-19］。

本次研究中原發(fā)性舍格倫綜合征患者外周血中的IL-27 的水平為（14.54±1.54）pg/mL，而對照組外周血中IL-27 的水平為（24.64±1.83）pg/mL，兩組結果相比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。原發(fā)性舍格倫綜合征患者外周血中IL-27 水平的降低提示了其可能在疾病的免疫功能調節(jié)方面起到了重要的作用，但IL-27 在原發(fā)性舍格倫綜合征中具體的作用機制還需要做進一步研究。本次研究發(fā)現(xiàn)，原發(fā)性舍格倫綜合征患者外周血中的ESR、CRP、IgA、IgG、IgM 以及IgE 的水平明顯高于健康對照組，并且差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），此次研究結果與既往曾旖等［20］、楊雪君等［21］、杜星辰等［22］研究結果相似。同時，經相關性研究分析，在原發(fā)性舍格倫綜合征患者外周血中，IL-27 與ESR、CRP 和IgG 分別呈負相關（r=-0.439 6，-0.382 6，-0.468 9，P＜0.05），而IL-27 與IgA、IgM 和IgE 之間無相關性（P＞0.05）。而鑒于ESR、CRP 和IgG 都是目前原發(fā)性舍格倫綜合征診療過程中應用較好的指標，而IL-27 與ESR、CRP 和IgG 有顯著的相關性，這就使IL-27 可成為原發(fā)性舍格倫綜合征的輔助診斷指標。

本次研究發(fā)現(xiàn)羥氯喹治療前后原發(fā)性舍格倫綜合征患者外周血中IL-27 的水平分別為（14.54±1.54）pg/mL 和（22.52±1.89）pg/mL，羥氯喹治療前的IL-27 水平明顯低于治療后。羥氯喹是一種4 氨基喹啉類藥物，目前廣泛應用于系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風濕性關節(jié)炎和舍格倫綜合征等自身免疫性疾病的治療。有國內外文獻報道，羥氯喹治療原發(fā)性舍格倫綜合征可改善患者體內多種免疫學指標，包括ESR、IgG、RF 和IL-6 等。鑒于本次研究發(fā)現(xiàn)IL-27 與ESR、CRP 和IgG 呈顯著負相關，說明羥氯喹可能通過提升原發(fā)性舍格倫綜合征患者外周血中IL-27 的水平而達到治療效果。

綜上所述，雖然原發(fā)性舍格倫綜合征致病過程及發(fā)病機制尚需要做進一步的研究，但通過研究已發(fā)現(xiàn)IL-27 在原發(fā)性舍格倫綜合征患者外周血中的水平顯著降低并與ESR、CRP 和IgG 顯著負相關使得其可作為原發(fā)性舍格倫綜合征的輔助診斷指標，同時羥氯喹的干預可以有效上調IL-27 水平，其可能通過調節(jié)IL-27 水平達到治療作用。