CYP3A5、CYP2C9、AGTR1基因多態性對單藥治療原發性高血壓療效的影響研究

易天驕，趙友云

1.湖北中醫藥大學，湖北武漢 430065；2.湖北中醫藥大學附屬醫院/湖北省中醫院檢驗科，湖北武漢 430074

口服降壓藥物是原發性高血壓患者穩定血壓以及預防心腦血管疾病的重要治療手段。降壓藥的選擇與使用主要依靠診療指南和臨床經驗，但存在服用相同抗壓藥物而產生不同療效的原發性高血壓患者[1]。藥物基因組學研究也發現，遺傳多態性能夠影響藥物作用的程度，從而產生藥物療效的個體差異[2]。因此，確定個性化的降壓治療方法是改善血壓管理的關鍵[3]。基于此，本研究旨在探討CYP3A5、AGTR1和CYP2C9基因多態性是否與鈣離子拮抗劑(CCB)類和血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑(ARB)類藥物的臨床降壓療效有關。

1 資料與方法

1.1一般資料 將2020年9月至2021年6月在湖北省中醫院門診就診的首發且未經治療的原發性高血壓患者共106例納入研究。納入標準：年齡18～65歲；原發性高血壓1級或2級的新發患者；血常規、尿常規及肝腎功能指標均正常；每晚睡眠時間6～<9 h；從不吸煙者或已戒煙者；根據《中國高血壓防治指南2018年修訂版》[4]推薦的方法進行降壓藥物的選擇，使用CCB或ARB類降壓藥單藥治療。排除標準：繼發性高血壓或高血壓3級的患者；心力衰竭、冠狀動脈粥樣硬化性心臟病、心臟瓣膜病、肺源性心臟病、甲狀腺功能亢進(甲亢)性心臟病、心肌疾病、先天性心臟病、嚴重肝腎功能不全、心包疾病、嚴重貧血、感染、發熱性疾病患者；每晚睡眠時間<6或≥9 h；有抑郁癥狀、意識障礙、嚴重溝通障礙的患者；拒絕基因檢測者；依從性欠佳者。納入研究的患者中72例口服CCB類降壓藥，46例口服ARB類降壓藥治療。所有研究參與者均已簽署知情同意書，本研究經湖北省中醫院倫理委員會批準。

1.2方法

1.2.1基本資料的獲取 依病例報告表進行標準化流程訪談，獲取患者性別、年齡、體重、身高、血壓、心率、體質量指數(BMI)等基本資料。

1.2.2療效觀察 記錄患者原始血壓以及用藥情況，然后每周隨訪，共隨訪4次，根據血壓狀況判定顯效(收縮壓下降≥20 mm Hg或舒張壓下降≥10 mm Hg)、有效(收縮壓下降<20 mm Hg或舒張壓下降<10 mm Hg)和無效(收縮壓、舒張壓均無明顯變化)。

1.2.3基因型檢測 基因型檢測采用PCR熔解曲線法。采集患者2 mL靜脈血，EDTA抗凝。DNA提取和擴增試劑使用TIANLONG EX-DNA試劑盒(購自西安天隆生物技術公司)，嚴格按照試劑說明書操作。GeneRotex 96型全自動核酸提取儀和QuantStudio Dx型全自動熒光定量PCR儀分別為西安天隆生物技術公司和美國ABI公司產品。每次實驗設置陰性和陽性對照，保證檢測質量。

2 結 果

2.1CCB、ARB類藥物的療效與原發性高血壓患者基本資料的關系 72例口服CCB類單藥的原發性高血壓患者中，顯效34例、有效17例、無效21例。46例口服ARB類單藥的原發性高血壓患者中，顯效22例、有效13例、無效11例。單用CCB或ARB類藥物的療效與患者性別、年齡、身高、體重、BMI等基本資料無關(P>0.05)，見表1。

表1 CCB、ARB單藥治療的原發性高血壓患者基本資料比較

續表1 CCB、ARB類用藥原發性高血壓患者基本資料比較

2.2原發性高血壓患者CYP3A5、CYP2C9和AGTR1基因多態性對療效的影響 對于單用CCB或ARB類降壓藥的患者而言，CYP3A5的基因多態性為療效的影響因素(P<0.05)，而CYP2C9和AGTR1的基因多態性不是療效的影響因素(P>0.05)，見表2。

表2 原發性高血壓患者CYP3A5、CYP2C9和AGTR1基因多態性對單用CCB或ARB療效的影響

2.3原發性高血壓患者CYP3A5基因型對單用CCB或ARB類藥物療效的影響 經有序多分類Logistic回歸分析發現：對于單用CCB類藥物的原發性高血壓患者，CYP3A5 *3/*3基因型的臨床療效是*1/*1基因型的1.379倍，但差異無統計學意義(P>0.05)，*1/*3基因型比*1/*1基因型療效提高8.973倍，差異有統計學意義(P<0.05)；對于單用ARB類藥物的原發性高血壓患者，CYP3A5 *3/*3基因型的臨床療效是*1/*1基因型的6.09倍，差異有統計學意義(P<0.05)，*1/*3基因型比*1/*1基因型提高療效7.025倍，差異有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 原發性高血壓患者CYP3A5基因型對單用CCB或ARB類藥物療效的影響

3 討 論

細胞色素酶(CYP450)負責大多數臨床使用的藥物的代謝。CYP活性的個體差異是導致藥物治療失敗的一個重要因素。CYP3A5、CYP2C9基因與CYP450酶有關且具有和臨床相關的遺傳多態性。

CYP3A5基因多態性可能是高血壓的遺傳易感因素。CCB作為CYP3A5底物，CYP3A5基因多態性可能對CCB代謝產生影響。唐楊玲等[5]報道，原發性高血壓患者CYP3A5的基因多態性對氨氯地平的藥物代謝產生影響。KIM等[6]發現，CYP3A5*3/*3攜帶者CCB血藥濃度低于*1/*1基因型，XIANG等[7]也證實了該結論。但有日本學者認為CYP3A5并非是影響CCB代謝的主要因素[8]，而且與LANGAEE等[9]的研究結論相同。我國的一項臨床治療研究報道，CYP3A5*3/*3基因型患者舒張壓下降幅度顯著高于*1/*3和*1/*1基因型的患者[10]，文娟等[11]的研究也得到了相似的結果。相反，周君等[12]認為，CYP3A5基因多態性與CCB降壓藥療效之間的關聯可能不大。

本研究中，CYP3A5*1/*3基因型患者的CCB療效優于*1/*1基因型。分析原因：CYP3A5*1為野生型，而位于第三號內含子的6986密碼子A>G(CYP3A5*3)是決定人群CYP3A5表達與活性的最主要因素，CYP3A5*3突變會引起mRNA剪接發生改變，終止密碼子提前，蛋白質截短，不能表達正確表達CYP3A5蛋白，從而使CYP3A5酶活性消失。ARB類藥物對CYP3A5*3/*3和*1/*3基因型的受試者療效較好。ARB的代表性藥物為厄貝沙坦，主要由肝酶代謝。CYP3A5多態性會影響藥物的肝內代謝，CYP3A5*3的變異會導致代謝酶活性的改變，而影響了厄貝沙坦等ARB類藥物的降壓療效。另外，有研究報道CYP3A5基因多態性對使用纈沙坦治療患者的降壓效果無影響，原因可能在于纈沙坦大約70%以原型經膽汁排泄，30%經腎臟排泄，不經肝臟進行生物轉化[13]。

CYP2C9基因發生突變可能引起CYP2C9酶的空間結構與功能發生根本改變，最終會致使CYP2C9酶活性出現下降甚至喪失，所以就會造成對其底物的代謝清除能力發生根本變化，但CYP2C9基因多態性與CCB降壓療效相關的文章罕見。有研究報道，CYP2C9基因多態性與CCB類降壓藥物療效無關，因為多數CCB類藥物能顯著抑制CYP2C9的活性[14]。對于ARB類藥物，一些研究認為CYP2C9*3基因突變可能會影響ARB類藥物的代謝，CHEN等[15]發現CYP2C9*1/*3型攜帶者的氯沙坦生物等效性要高于CYP2C9*1/*1型攜帶者。韓國一項研究發現CYP2C9*3攜帶者中厄貝沙坦代謝率下降[16]。療效方面，陳露露等[17]及王魯雁等[18]的研究顯示CYP2C9基因型與ARB降壓效果無關，相同的結論也在其他研究中被證明[19]。相反，HALLBERG等[20]發現CYP2C9*3基因變異與厄貝沙坦的療效有關聯。

作為細胞色素P450代謝酶系中的重要成員，CYP2C9是ARB類降壓藥物的重要肝臟代謝酶，CYP2C9在CYP450基因多樣性和藥物代謝中起著非常重要的作用。本次研究中，CYP2C9基因多態性與ARB療效之間無關的主要原因可能在于選擇的樣本來源人群、地區及樣本量的差異,因此尚需加大樣本量進一步深入研究。

AGTR1為血管緊張素Ⅱ受體，是ARB類藥物的作用靶點，而CCB的降壓機制為阻斷細胞膜上鈣離子通道及擴張血管，與AGTR1相關性不大。因而本次只考慮了AGTR1 A1166C基因多態性與ARB類藥物降壓療效的關系。人類AGTR1基因有5種多態性，其中與臨床關系最密切的是1166A/C。有學者研究認為AGTR1基因A1166C多態性可能是我國原發性高血壓的風險因子之一。由于地區、種族等差異，不同學者看法不一。左彥方等[21]認為AGTR1(1166A>C)是影響原發性高血壓的一個重要因素，但董輝等[22]、張欣然等[23]看法相反。療效方面，龔洪濤等[24]及王魯雁等[18]研究顯示AGTR1基因多態性與ARB類降壓藥物療效無關。不同的是，董輝等[22]發現男性中具有AGTR1 1166C等位基因的個體敏感性較高，降壓療效更好，DE DENUS等[25]發現AGTR1 1166C攜帶者在坎地沙坦治療后反應更佳。

本次研究中，AGTR1基因多態性對ARB類降壓藥物療效亦無影響。分析原因：ARB類藥物作用于AGTR1而發揮降壓療效，而AA和AC基因型的血清AGTR1表達一致導致降壓療效無明顯差別。其次，1166A/C多態性與血管壁對AngⅡ反應之間不存在相關性。HILGERS等[26]予以不同濃度的外源Ang Ⅱ輸注(0.5～3.0 ng/kg)，結果未發現不同基因型之間血壓、醛固酮和腎血流動力學的差異。SPIERING等[27]研究證實此觀點。

綜上所述，本研究顯示CYP3A5基因多態性可能是影響CCB、ARB類藥物療效的關鍵因素，但暫未發現CYP2C9、AGTR1的基因多態性與CCB、ARB類藥物療效相關。未來還需進行多中心、大樣量的前瞻性研究，以進一步探討CYP3A5、CYP2C9和AGTR1基因多態性對CCB、ARB類藥物療效的影響。