皮炎濕疹患者微生物感染情況與骨橋蛋白表達的相關性

李麗娜

【摘要】 目的：探究皮炎濕疹患者微生物感染情況，并就其與骨橋蛋白（OPN）表達情況的相關性進行分析。方法：選擇2019年5月-2021年6月于盤錦遼油寶石花醫院接受治療的100例皮炎濕疹患者為研究組，另選同期于盤錦遼油寶石花醫院接受體格檢查的50例健康個體為對照組。分別對研究組患者皮損部位、非皮損部位及對照組正常皮膚樣本進行細菌、真菌培養，實施菌種鑒定及菌落計數分析，并就兩組個體血清OPN表達情況進行對比，分析細菌真菌感染與皮炎濕疹患者OPN表達情況的相關性。結果：對照組皮膚樣本金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、馬拉色菌感染率均低于研究組皮損樣本，表皮葡萄球菌低于研究組非皮損樣本，差異均有統計學意義（P<0.05）。皮損樣本細菌真菌密度、金黃色葡萄球菌密度、OPN水平均高于非皮損樣本（P<0.05），急性滲出型皮損細菌真菌密度、金黃色葡萄球菌密度及OPN水平均高于慢性斑塊型皮損（P<0.05）。研究組100例患者中，后期發生繼發感染18例，未繼發感染82例，研究組繼發感染和未繼發感染患者細菌、金黃色葡萄球菌及馬拉色菌檢出率均高于對照組（P<0.05），且繼發感染患者細菌、金黃色葡萄球菌檢出率均高于未繼發感染患者（P<0.05）。研究組細菌真菌定植密度與其血清OPN表達水平呈明顯正相關（r=0.749 1，P=0.000 3）。結論：微生物定植與皮炎濕疹的發生和發展關系密切，患者血清OPN水平會明顯升高，可以考慮將其應用于皮炎濕疹診療鑒別中。

【關鍵詞】 皮炎濕疹 微生物感染 骨橋蛋白 相關性

Correlation between Microbial Infection and Osteopontin Expression in Patients with Dermatitis and Eczema/LI Li’na. //Medical Innovation of China， 2022， 19（13）： -161

[Abstract] Objective： To explore the microbial infection in patients with dermatitis and eczema， and to analyze its correlation with the expression of osteopontin （OPN）. Method： A total of 100 patients with dermatitis and eczema who received treatment in Panjin Liaoyou Baoshihua Hospital from May 2019 to June 2021 were selected as the research group， and 50 healthy individuals who received physical examinations in Panjin Liaoyou Baoshihua Hospital during the same period were selected as the control group. Bacteria and fungi were cultured on skin lesions， non-skin lesions， and normal skin samples of the control group. The identification of bacteria and the analysis of colony count were carried out. The serum OPN expression of two groups were compared， and the correlation between bacterial and fungal infection and OPN expression in patients with dermatitis and eczema was analyzed. Result： The infection rate of Staphylococcus aureus， Staphylococcus epidermidis and Malassezia infection in the skin samples of the control group were lower than those in the skin lesion samples of the study group， Staphylococcus epidermidis was lower than that in the non-lesion samples of the study group， and the differences were statistically significant （P<0.05）. The bacterial and fungal density， Staphylococcus aureus density and OPN level of skin lesion samples were higher than those of non-lesion samples （P<0.05）. The bacterial and fungal density， Staphylococcus aureus density and OPN level of acute exudative skin lesions were higher than those of chronic plaque-type skin lesions （P<0.05）. Among 100 patients in the study group， 18 cases developed secondary infections in the later period， 82 cases did not develop secondary infections. The detection rates of bacteria， Staphylococcus aureus and Malassezia in the study group were significantly higher than those in the control group （P<0.05）， and the detection rates of Staphylococcus aureus and bacteria in patients with secondary infection were significantly higher than those in patients without secondary infection （P<0.05）. There was a significant positive correlation between the colonization density of bacteria and fungi and the expression level of serum OPN in the study group （r=0.749 1， P=0.000 3）. Conclusion： Microbial colonization is closely related to the occurrence and development of dermatitis and eczema， the level of serum OPN in patients will be significantly increased， it can be considered for the diagnosis and treatment of dermatitis and eczema.

[Key words] Dermatitis and eczema Microbial infection Osteopontin Correlation

First-author’s address： Panjin Liaoyou Baoshihua Hospital， Liaoning Province， Panjin 124010， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2022.13.038

皮炎濕疹類皮膚疾病是皮膚科的常見病和多發病[1]。其臨床表現主要包括瘙癢、紅斑、丘疹、水皰、脫屑、肥厚等，一般皮疹會并發滲出或融合傾向，臨床上常將出現上述癥狀且無法做出明確診斷者先擬診斷為皮炎濕疹[2-3]。皮炎濕疹具有治療難度大、易反復等特點，其發病原因較為復雜，目前發病機制尚未明確，多數研究認為其是在多種內外因素綜合影響下導致的皮膚炎癥反應性皮膚病[4]。皮炎濕疹當前尚缺乏特效治療手段，但該癥遷延不愈的特性導致急速治療后患者易出現皮膚萎縮、色素沉著、感染加重等現象，因而臨床上建議治療上應強調對因治療[5]。近些年大量針對皮炎濕疹類皮膚病的病因學研究發現，機體免疫功能紊亂是該癥的發病基礎，而微生物定植是誘發或加重機體免疫機能紊亂的重要原因之一，雖然皮炎濕疹患者出現發熱、淋巴結腫大等系統感染癥狀較少，但患者常因瘙癢抓撓導致其皮膚屏障被破壞，進而增加了微生物尤其是部分細菌、真菌和病毒的感染率[6]。已有的研究報道指出，細菌感染尤其是金黃色葡萄球菌感染同特異性皮炎的發病密切相關，金黃色葡萄球菌會分泌多種超抗原特性的外毒素進而加重皮炎癥狀[7]，也有研究指出馬拉色菌也同該癥有一定關聯[8]。骨橋蛋白（OPN）是一種廣泛存在于細胞外基質中的糖基化蛋白，該蛋白被證實具有增強腸道保護屏障、保護全身免疫的作用，近些年也有研究指出OPN具有細胞因子的功能特點，在皮膚科疾病的發生發展中也起到了重要作用[9]。本研究擬就皮炎濕疹患者微生物感染情況進行分析研究，并就微生物定植情況與患者血清OPN蛋白表達相關性進行分析，以期為改善此類患者預后提供臨床參考。現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2019年5月-2021年6月于盤錦遼油寶石花醫院接受治療的100例皮炎濕疹患者為研究組，另選同期于盤錦遼油寶石花醫院接受體格檢查的50例健康個體為對照組。納入標準：（1）研究組經臨床診斷確診，符合皮炎濕疹相關診斷標準[10]，對照組為健康個體;（2）意識清晰，能配合調研;（3）年齡≥18歲。排除標準：（1）合并精神疾病;（2）合并全身免疫系統疾;（3）近3個月服用皮質醇類藥物治療;（4）酒精或藥物依賴;（5）合并嚴重肝腎功能障礙;（6）妊娠或哺乳期女性;（7）伴發其他系統嚴重疾病;（8）近期服用免疫抑制劑。本研究已經醫院倫理學委員會批準，患者及家屬均知情同意并簽署知情同意書。

1.2 方法 研究組皮損部位和非皮損部位（皮膚對稱部位或距離皮損至少5 cm處正常部位）及對照組前臂屈側處，使用消毒后的鏤空圓形不干膠粘貼靶部位皮膚處，在鏤空處使用無菌棉簽反復擦拭（橫向、縱向和斜向各10次），而后將棉簽投入稀釋液中反復震蕩80次，取10 μL接種于羊血平皿培養基中，于35 ℃有氧環境下培養24～48 h，對分離出來的細菌菌落及菌落數進行記錄。另取部分稀釋液離心處理后除去上清液，沉淀物置于沙堡培養基與馬拉色菌培養基中，37 ℃條件下培養30 d，觀察分離的真菌菌種。采集不同部位皮膚樣本后，使用乙醇和二甲苯脫水，甲醛溶液固定后石蠟包埋切片，切片處理脫蠟后使用過氧化氫處理10 min，使用酶聯免疫吸附法（ELISA）對樣本中OPN表達水平進行檢測，應用試劑盒均購自北京博奧森生物技術有限公司，操作嚴格按照試劑盒說明書進行，指標連續檢測3次取平均值作為最終結果。

1.3 觀察指標 比較兩組皮膚樣本細菌真菌構成種類、研究組皮膚樣本細菌真菌定植量及OPN表達情況、不同皮炎濕疹類型患者細菌真菌檢出情況及研究組細菌真菌定植密度與OPN表達情況相關性。

1.4 統計學處理 采用SPSS 22.0軟件對所得數據進行統計分析，符合正態分布的計量資料用（x±s）表示，多組間比較采用方差分析，兩組間比較采用獨立樣本t檢驗;計數資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗;相關性分析使用Pearson相關系數。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組一般資料比較 兩組一般資料比較，差異均無統計學意義（P>0.05），具有可比性，見表1。

2.2 兩組皮膚樣本細菌真菌構成種類比較 對照組皮膚樣本金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、馬拉色菌感染率均低于研究組皮損樣本，表皮葡萄球菌低于研究組非皮損樣本，差異均有統計學意義（P<0.05）。見表2。

2.3 研究組皮膚樣本細菌真菌定植量與OPN表達水平比較 皮損樣本細菌真菌密度、金黃色葡萄球菌密度、OPN水平均高于非皮損樣本（P<0.05），急性滲出型皮損細菌真菌密度、金黃色葡萄球菌密度及OPN水平均高于慢性斑塊型皮損（P<0.05），見表3。

2.4 不同皮炎濕疹類型患者細菌真菌檢出情況比較 研究組100例患者中，后期發生繼發感染18例，未繼發感染82例。研究組繼發感染和未繼發感染患者細菌、金黃色葡萄球菌及馬拉色菌檢出率均高于對照組（P<0.05），且繼發感染患者細菌、金黃色葡萄球菌檢出率均高于未繼發感染患者（P<0.05）。見表4。

2.5 研究組患者細菌真菌定植密度與OPN表達情況相關性分析 研究組細菌真菌定植密度與OPN水平呈明顯正相關（r=0.749 1，P=0.000 3）。

3 討論

皮炎濕疹目前已成為臨床上較為常見的皮膚科疾病之一[11-12]，該癥具有治療難度大、易反復、臨床癥狀明顯等特征，數據顯示近些年皮炎濕疹的發病率呈現逐漸遞增趨勢，已對個體正常生活和工作造成了明顯影響，皮炎濕疹目前已成為重要的公共衛生疾病[13]。當前對皮炎濕疹發病機制的研究進展不大，臨床上普遍認為皮炎濕疹是在生物因素、心理因素、社會因素等多種因素綜合作用下造成的，三種因素可相互作用、相互影響[14]。目前有報道指出，部分皮膚病患者機體免疫功能會出現紊亂，而免疫紊亂、皮損等原因又為病原菌感染和定植制造了機會，進一步加重機體免疫功能失衡[15]，因而從調節機體微生物菌群定植方面入手可能將有助于加快皮炎濕疹患者康復，降低其復發率。

本研究通過設立對照分組的方式，就皮炎濕疹患者微生物感染情況及微生物定植與OPN表達的相關性進行了分析，結果顯示，在微生物定植種類方面，對照組皮膚樣本金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、馬拉色菌感染率均顯著低于研究組皮損樣本，表皮葡萄球菌低于研究組非皮損樣本，差異均有統計學意義（P<0.05），同時將研究組患者按照皮損部位與非皮損部位區分后二次分析顯示，急性滲出型皮損細菌真菌密度、金黃色葡萄球菌密度均高于慢性斑塊型皮損（P<0.05）。陸茂等[16]通過對28例特應性皮炎（AD）患者以及23例健康對照組個體開展分析發現，AD患者的皮損區域馬拉色菌拷貝數明顯高于非皮損區域，AD患者的馬拉色菌整體拷貝數也高于對照組個體，但該學者的研究結果指出馬拉色菌的拷貝數與其濕疹面積、嚴重度指數均無明顯相關性。劉婷等[17]則通過比較發現，皮炎濕疹皮損患者的病情與細菌感染、馬拉色菌及金葡菌的分布密切相關，且皮損的嚴重程度與炎癥因子、免疫水平、病原菌密度均有密切的關系，可以考慮將其作為皮炎濕疹患者臨床診斷及預后評估的參考指標。本文作者分析認為，正常情況下人體表面金黃色葡萄球菌檢出密度較低，結果提示皮損樣本細菌真菌密度、金黃色葡萄球菌密度均顯著高于非皮損樣本（P<0.05），而且將研究組患者按照病情區分后再次比較顯示，急性滲出型皮損細菌真菌密度、金黃色葡萄球菌密度均高于慢性斑塊型皮損（P<0.05）。這提示細菌真菌、金黃色葡萄球菌的過度定植可能加重了皮炎濕疹的病理進程，導致患者病情急性進展。

OPN是一種由破骨細胞、巨噬細胞、淋巴細胞、上皮細胞和血管平滑肌細胞等多種細胞分泌的蛋白質，在礦化組織的細胞外基質與炎癥組織的細胞外液中均有表達[18]。OPN在骨骼內含量較為豐富，能與一系列的細胞表面受體相結合，其作用主要為介導信號轉導過程，進而促進細胞黏附和聚集，臨床上常將OPN作為判斷炎癥反應嚴重程度的實驗室指標[19-20]。本研究結果顯示，研究組繼發感染和未繼發感染患者細菌、金黃色葡萄球菌及馬拉色菌檢出率均顯著高于對照組，且繼發感染患者細菌、金黃色葡萄球菌檢出率均明顯高于未繼發感染患者，差異均有統計學意義（P<0.05）。Pearson相關系數相關性分析也顯示細菌真菌定植密度與OPN水平呈正相關（P<0.05）。本文作者分析認為，該結果一方面印證了其他學者關于OPN與皮膚疾病相關的結果，另一方面也提示OPN參與了皮炎濕疹發生發展進程。以往臨床上對皮炎濕疹的鑒別診斷多依賴醫者查體，而該結果為皮炎濕疹的鑒別診斷提供了實驗室支撐。

綜上所述，微生物定植與皮炎濕疹的發生和發展關系密切，患者血清OPN水平會明顯升高，可以考慮將其應用于皮炎濕疹診療鑒別中。

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（收稿日期：2021-09-14） （本文編輯：程旭然）