山東省采集臍帶血及對應母血人類嗜T淋巴細胞病毒篩查情況分析

雒 猛，邵 維，李艷婷，陳富強，王 忠△，劉金玲1,，楚中華

1.山東省臍帶血造血干細胞庫，山東濟南 250102；2.山東省齊魯干細胞工程有限公司，山東濟南 250102;3.山東省血液中心，山東濟南 250014；4.山東大學齊魯醫院輸血科，山東濟南 250012

人類嗜T淋巴細胞病毒(HTLV)是20世紀80年代初發現的第一個人類反轉錄病毒，主要包括HTLV-Ⅰ型和HTLV-Ⅱ型。HTLV-Ⅰ型在加勒比海地區、南美東北部、日本西南部及非洲的某些地區流行。HTLV-Ⅱ型在美國黑人、印第安人及歐洲等地的靜脈吸毒者中流行，我國是一個HTLV低流行國家，有研究顯示在福建、廣東、廣西和浙江等沿海地區HTLV流行率較高[1-2]。HTLV是成人T淋巴細胞白血病/淋巴瘤(ATL)的病原體，也可引起HTLV-Ⅰ型相關性脊髓病/熱帶痙攣性下肢輕癱的慢性炎癥性疾病[3-5]。HTLV主要通過血液傳播、性傳播和母嬰傳播[6-7]。2015年原國家衛生和計劃生育委員會辦公廳下發了《關于血站做好人類嗜T淋巴細胞病毒監測的通知》，目前我國對HTLV的篩查及分析研究主要關注于在采供血機構的獻血者中血清抗體篩查和母嬰垂直傳播的母乳喂養傳播情況[8-15]。針對母嬰垂直傳播的胎盤傳播方式的報道甚少，本研究通過檢測儲存臍帶血的產婦靜脈血及有反應性母血對應的臍帶血HTLV抗體，分析其結果，為HTLV的母嬰傳播方式積累資料。

1 材料與方法

1.1標本來源 2020年8月5日至2020年9月1日于山東省臍帶血造血干細胞庫采集的臍帶血及對應的母血標本12 803份。

1.2儀器與試劑 全自動加樣儀(瑞士，Hamilton Micro lab star)，全自動酶聯免疫分析儀(瑞士，Hamilton Micro lab Fame 24/20)。HTLV抗體檢測試劑盒A[酶聯免疫吸附試驗(ELISA)，北京萬泰中聯科技股份有限公司]，HTLV抗體檢測試劑盒B[ELISA，艾康生物技術(杭州)有限公司]，試劑均合格且在有效期內使用。

1.3方法 所有操作均嚴格按照試劑盒說明書要求進行。依據說明書的要求設置臨界值，當檢測孔的吸光度值≥臨界值時為HTLV抗體有反應性，當檢測孔的吸光度值<臨界值時，為HTLV抗體無反應性。采用試劑A檢測母血有反應性時，采用試劑A和B同時對母血與對應的臍帶血進行雙孔復查，復查的4孔只要有1孔為反應性，則檢測結果為有反應性。復查有反應性的母血與對應的臍帶血標本送至國家衛生健康委臨床檢驗中心使用核酸檢測(NAT)法和蛋白印跡(WB)法進一步確認。

2 結 果

12 803份母血標本，經ELISA初篩5份有反應性，母血ELISA初篩有反應性率為0.039%(5/12 803)；初篩有反應性的5份母血對應的臍帶血，經ELISA篩查3份有反應性，母血ELISA初篩有反應性對應臍帶血篩查有反應性率為60%；經確認試驗，ELISA初篩有反應性的5份母血標本，母血確認陽性1份，母血不確定1份，對應的臍帶血確認陽性1份，母血ELISA初篩有反應性確認陽性率為20%；所有母血標本中，確認陽性率為0.007 8%(1/12 803)，見表1。

表1 5份HTLV抗體結果情況

3 討 論

ELISA具有靈敏度、特異度高，準確性和重復性好，操作簡單且易于自動化操作等優點，已成為國內采供血機構HTLV抗體篩查的首選方法。不同廠家的檢測試劑因包被的單克隆抗體、方法學、生產工藝、質量等因素的不同，試劑間檢測結果存在一定的差異[7]。本研究發現在復檢2號母血標本和5號臍帶血標本時，兩種試劑出現有反應性和無反應性兩種相反的結果。NAT和WB確認陽性率遠遠低于ELISA初篩陽性率[8-14]。推測原因為存在與試劑相關的假陽性或者存在一些非特異性抗原的交叉反應引起的假陽性。而產婦作為特殊的人群，其體內的激素等因素與普通的獻血者存在一定的差異，產婦的血液對ELISA檢測結果假陽性或假陰性的影響，有待進一步研究。

關于HTLV的感染情況，國內很多學者均有報道。近10年來福建省寧德市HTLV初篩陽性率為0.589%(61/10 352)，確認陽性率為0.338%(35/10 352)，福建省南平市HTLV初篩陽性率高達0.149%(46/30 878),確認陽性率為0.016%(5/30 878)，廣東省深圳市HTLV初篩陽性率為0.198%(2/1 008)，廣東省廣州市HTLV初篩陽性率為0.105%(21/20 056)，廣東省廣州市的確認陽性率為0.015%(3/20 056)[1]。山東地區獻血者HTLV ELISA初篩陽性率為0.053%(31/58 395)，NAT陽性率為0.003%(2/58 395)，WB確認陽性率為0[8]。青島地區獻血者HTLV ELISA初篩陽性率為0.027%(11/40 341)，經確認均為陰性[9]。北京地區獻血人群中 HTLV-Ⅰ/Ⅱ抗體初篩陽性率為 0.019%(26/137 833)，確認陽性率為 0.001 5%(2/137 833)[10]。天津地區HTLV ELISA初篩陽性率為0.048%(8/16 791)，經確認全部為陰性[11]。長春地區獻血者HTLV ELISA初篩陽性率為0.038%(25/65 821)，確認全部為陰性[12]。石家莊地區獻血者HTLV ELISA初篩陽性率為0.061%(25/41 000)，確認陽性1份[13]。以上報道可以推測北方地區獻血者HTLV ELISA初篩陽性率處于較低的水平，介于0.01%～0.07%，但這些報道均為對無償獻血者的篩查。即使在我國HTLV流行率高的福建、廣東、廣西等地區，關于HTLV的篩查也基本側重于采供血機構，而對普通人群、高危人群、疾病患者、幼兒群體或產婦群體等HTLV的流行情況報道較少。本研究發現，山東省采集臍帶血對應母血標本的HTLV抗體ELISA初篩有反應性率為0.039%，母血確認陽性率為0.007 8%，提示除獻血人群外，孕產婦也存在HTLV感染的可能性。

HTLV-Ⅰ型通過被感染的細胞進行傳播，傳播途徑主要包括性傳播、血液傳播和母嬰傳播[14-16]。本研究發現，5份ELISA初篩陽性的母血標本中，HTLV確認陽性的母血其對應的臍帶血篩查和確認均為陽性，可以看出HTLV確實可以穿過胎盤屏障進行母嬰垂直傳播，攜帶HTLV的育齡女性，如何避免HTLV通過胎盤傳給嬰兒是值得探討的問題。

HTLV-Ⅰ型通過母乳喂養的傳播率為10%～25%[14]。母乳喂養傳播HTLV-Ⅰ的概率受母乳喂養時間、母乳病毒的含量等因素的影響[15]。含有HTLV病毒的乳液，經巴氏消毒或凍融后，病毒含量會降低[16]。由于沒有相關的疫苗，也沒有預防母嬰傳播的抗反轉錄病毒的方法，因此防止母嬰傳播的有效策略僅為避免母乳喂養或減少母乳喂養時間(前提是能夠提供安全可及的替代喂養方式)[15]。目前HTLV的篩查還未列入醫院的常規檢測項目，對臍帶血進行HTLV抗體篩查，可以合理地指導產婦進行母乳喂養，降低HTLV通過哺乳而傳給嬰兒的風險，防止嬰兒感染HTLV。

由于HTLV感染淋巴細胞不存在于血漿和紅細胞中，血站可以對每份血液進行白細胞濾除來降低HTLV經輸血傳播的風險，而臍帶血庫儲存的臍帶血干細胞主要來源于白細胞，這種濾除白細胞的方式顯然對臍帶血庫不適用，如何避免或降低臍帶血HTLV感染是值得研究的課題。