胃癌組織高爾基體磷蛋白3蛋白表達(dá)與根治術(shù)后腫瘤復(fù)發(fā)的關(guān)系

劉中松

南陽(yáng)南石醫(yī)院普外科，河南 南陽(yáng) 473000

胃癌是指起源于胃黏膜上皮的消化道惡性腫瘤，在我國(guó)各種癌癥中發(fā)病率位居首位，死亡率已經(jīng)超過(guò)世界平均水平的2倍［1］。調(diào)查指出［2］，我國(guó)早期胃癌的占比僅為20%，5年總體生存率不足50%，嚴(yán)重威脅人們的生命。另有資料顯示［3］，我國(guó)新診斷的實(shí)體瘤中根治術(shù)后1年復(fù)發(fā)率高達(dá)60%，而胃癌患者一旦復(fù)發(fā)，將會(huì)有80%的病例生存期不足5年。因此探討胃癌根治術(shù)后腫瘤復(fù)發(fā)的因素十分重要。高爾基體磷蛋白3（GOLPH-3）可激活細(xì)胞中雷帕霉素靶蛋白（mTOR）通路促進(jìn)細(xì)胞增殖和生長(zhǎng)，而mTOR通路的激活與胃癌等多種惡性腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)［4］。據(jù)此推測(cè)GOLPH-3蛋白陽(yáng)性表達(dá)很可能能夠參與胃癌的發(fā)生和發(fā)展，但其與根治術(shù)后腫瘤復(fù)發(fā)是否有關(guān)鮮見(jiàn)報(bào)道。基于此，本研究選取108例實(shí)施胃癌根治術(shù)的患者探討上述問(wèn)題，旨在為胃癌根治術(shù)后復(fù)發(fā)的預(yù)防提供方向，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年2月—2019年10月南陽(yáng)南石醫(yī)院收治的108例實(shí)施胃癌根治術(shù)的患者作為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)活檢證實(shí)為胃癌患者；臨床病理特征明確，方便跟蹤隨訪，對(duì)本研究知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：胃癌復(fù)發(fā)患者或其他部位惡性腫瘤轉(zhuǎn)移至胃部者；合并肝腎等嚴(yán)重器質(zhì)性疾病者，有精神障礙者，不配合診療者；伴有嚴(yán)重外傷或急性感染性疾病者。108例患者中男81例，女27例；年齡34～80歲，平均年齡（59.58±10.25）歲；臨床分期：I期16例、II期70例、III期22例；分化程度：未/低分化42例，中/高分化66例；病理類(lèi)型：腺癌48例、鱗癌29例、腺鱗癌19例、印戒細(xì)胞癌10例、未分化癌2例。

1.2 方法

GOLPH-3蛋白表達(dá)檢測(cè)：取手術(shù)切除的胃癌組織和邊緣正常組織采用免疫組化法檢測(cè)。將組織修剪為1mm3組織塊，置于中性福爾馬林溶液中固定，然后常規(guī)浸蠟、包埋、切片，脫蠟后以梯度濃度酒精水化并進(jìn)行抗原熱修復(fù)。滴加一抗（購(gòu)自Abcam中國(guó)公司），4℃過(guò)夜；滴加二抗（酶標(biāo)記，購(gòu)自Abcam中國(guó)公司），室溫30 min。滴加顯色劑，5 min后以自來(lái)水沖洗，蘇木素復(fù)染，3 min后以自來(lái)水沖洗，氨水反藍(lán)。脫水后二甲苯透明，封片后觀察。以無(wú)色、淡黃色、棕黃色、棕褐色分別評(píng)為0分、1分、2分、3分；以陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)＜5%、≥5%且＜25%、≥25%且＜50%、≥50%且＜75%、≥75%分別評(píng)分0分、1分、2分、3分、4分。計(jì)算二者乘積，結(jié)果≤1分記為GOLPH-3蛋白陰性表達(dá)，否則記為陽(yáng)性表達(dá)［5］。

1.3 觀察指標(biāo)

（1）對(duì)比胃癌組織和邊緣正常組織GOLPH-3蛋白陽(yáng)性表達(dá)率。（2）對(duì)比復(fù)發(fā)和未復(fù)發(fā)患者胃癌組織GOLPH-3蛋白陽(yáng)性表達(dá)率：隨訪1年，隨訪方式為門(mén)診或電話等。（3）分析胃癌組織GOLPH-3蛋白陽(yáng)性表達(dá)與胃癌根治術(shù)后腫瘤復(fù)發(fā)的關(guān)系，可能影響后者的因素包括性別、年齡、臨床分期、分化程度、胃癌組織GOLPH-3蛋白陽(yáng)性表達(dá)、術(shù)后規(guī)范放化療、中醫(yī)藥輔助治療等。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 24.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料以例數(shù)和百分比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。采用COX模型分析胃癌根治術(shù)后腫瘤復(fù)發(fā)的危險(xiǎn)因素。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 胃癌組織和邊緣正常組織GOLPH-3蛋白陽(yáng)性表達(dá)率情況

108例胃癌患者有1例意外死亡，有2例主動(dòng)放棄治療，有3例轉(zhuǎn)院，均剔除本研究。胃癌組織GOLPH-3蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為78.43%（80/102），高于邊緣正常組織的55.88%（57/102）（χ2=11.757，P=0.001），見(jiàn)表1。

表1 胃癌組織和邊緣正常組織GOLPH-3蛋白陽(yáng)性表達(dá)率情況 例（%）

2.2 復(fù)發(fā)與未復(fù)發(fā)患者胃癌組織GOLPH-3蛋白陽(yáng)性表達(dá)率情況

102例胃癌患者隨訪1年內(nèi)共有39例復(fù)發(fā)，復(fù)發(fā)率為38.24%（39/102）。復(fù)發(fā)患者的胃癌組織GOLPH-3蛋白陽(yáng)性表達(dá)率高于未復(fù)發(fā)患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表2。

表2 復(fù)發(fā)與未復(fù)發(fā)患者胃癌組織GOLPH-3蛋白陽(yáng)性表達(dá)率情況 例（%）

2.3 胃癌組織GOLPH-3蛋白陽(yáng)性表達(dá)與胃癌根治術(shù)后腫瘤復(fù)發(fā)的關(guān)系分析

COX模型單因素和多因素分析結(jié)果均顯示，III期、未/低分化、胃癌組織GOLPH-3蛋白陽(yáng)性表達(dá)均是胃癌根治術(shù)后腫瘤復(fù)發(fā)的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），術(shù)后規(guī)范放化療、中醫(yī)藥輔助治療則是胃癌根治術(shù)后腫瘤復(fù)發(fā)的保護(hù)因素，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表3、表4。

表3 單因素分析

表4 多因素分析

3 討論

胃癌的發(fā)生與不健康飲食習(xí)慣、致癌物質(zhì)接觸、幽門(mén)螺旋桿菌感染及遺傳因素等均有關(guān)。有研究顯示［6］，基因突變和蛋白表達(dá)異常是胃癌發(fā)生和發(fā)展的病理基礎(chǔ)，尤其是參與細(xì)胞增殖、生長(zhǎng)、分化、凋亡等調(diào)控的通路異常表達(dá)可促使細(xì)胞大量增殖而凋亡減少，還可增強(qiáng)細(xì)胞的侵襲和遷移能力，誘發(fā)胃癌并促使腫瘤浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移。由此可知調(diào)控細(xì)胞生物學(xué)活性的蛋白表達(dá)異常可能參與胃癌預(yù)后效果不良。然而目前人們對(duì)胃癌發(fā)生和發(fā)展的機(jī)制認(rèn)識(shí)尚不明確，影響胃癌根治術(shù)后腫瘤復(fù)發(fā)的分子機(jī)制也仍需要深入研究。

GOLPH-3屬于一種磷酸化高爾基體膜蛋白，可參與執(zhí)行高爾基體的蛋白質(zhì)分選。該蛋白是第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)定位于反面高爾基網(wǎng)并被證實(shí)具有強(qiáng)大轉(zhuǎn)化能力的癌基因［7］。在既往相關(guān)報(bào)道中發(fā)現(xiàn)在胃癌、甲狀腺乳頭狀癌、膽囊癌等組織中GOLPH-3蛋白陽(yáng)性表達(dá)率均高于癌旁組織［8-10］，本研究中胃癌組織GOLPH-3蛋白陽(yáng)性表達(dá)率也高于邊緣正常組織，與上述研究結(jié)果相符，推測(cè)GOLPH-3蛋白高表達(dá)很可能參與胃癌的發(fā)生。GOLPH-3與高爾基體反面的基質(zhì)動(dòng)態(tài)相連，可快速?gòu)姆疵娓郀柣w管網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)向細(xì)胞質(zhì)移動(dòng)，且在此過(guò)程中可參與蛋白糖基化，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖，最終可打破細(xì)胞增殖和凋亡平衡，參與惡性腫瘤的發(fā)生。有研究［11］顯示，胃癌組織GOLPH-3蛋白表達(dá)與組織分化、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)、浸潤(rùn)程度均有關(guān)，且該蛋白陽(yáng)性表達(dá)率越高，組織分化程度越低，臨床分期越高，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的風(fēng)險(xiǎn)也越高，浸潤(rùn)程度也越嚴(yán)重，因此可用高蛋白陽(yáng)性表達(dá)率評(píng)價(jià)胃癌組織的惡性程度，推測(cè)預(yù)后不良的發(fā)生幾率。本研究中胃癌患者術(shù)后1年復(fù)發(fā)率38.24%，與既往報(bào)道的水平基本一致，證實(shí)胃癌根治術(shù)后復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)高；胃癌復(fù)發(fā)患者胃癌組織GOLPH-3蛋白陽(yáng)性表達(dá)率高于未復(fù)發(fā)患者，提示胃癌組織GOLPH蛋白陽(yáng)性表達(dá)可能與胃癌患者根治術(shù)后復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)有關(guān)。本研究單因素和多因素分結(jié)果均顯示胃癌組織GOLPH-3蛋白陽(yáng)性表達(dá)是胃癌根治術(shù)后腫瘤復(fù)發(fā)的危險(xiǎn)因素，提示蛋白陽(yáng)性表達(dá)的確可增加胃癌腫瘤復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)。

本研究還發(fā)現(xiàn)，III期、未/低分化也均是胃癌根治術(shù)后腫瘤復(fù)發(fā)的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，術(shù)后規(guī)范放化療、中醫(yī)藥輔助治療則是其保護(hù)因素，與既往相關(guān)報(bào)道結(jié)果一致［12-13］。但也有報(bào)道［14］顯示，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤浸潤(rùn)、病理類(lèi)型是胃癌根治術(shù)后復(fù)發(fā)的影響因素，本研究未探討上述因素的影響，主要是因?yàn)榱馨徒Y(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤浸潤(rùn)與臨床分期不相互獨(dú)立，病理類(lèi)型與腫瘤分化程度不相互獨(dú)立。根據(jù)上述研究結(jié)果，建議對(duì)III期、未/低分化的胃癌患者加強(qiáng)監(jiān)控，對(duì)所有胃癌根治術(shù)后患者實(shí)施規(guī)范放化療，必要時(shí)配合中醫(yī)藥治療以降低胃癌根治術(shù)后復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)。

綜上所述，胃癌組織GOLPH-3蛋白陽(yáng)性表達(dá)率高，根治術(shù)后腫瘤復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)也高，且胃癌根治術(shù)后腫瘤復(fù)發(fā)患者的胃癌組織GOLPH-3蛋白陽(yáng)性表達(dá)率更高，III期、未/低分化、胃癌組織GOLPH-3蛋白陽(yáng)性表達(dá)均是胃癌根治術(shù)后腫瘤復(fù)發(fā)的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，術(shù)后規(guī)范放化療、中醫(yī)藥輔助治療則是其保護(hù)因素，建議對(duì)有危險(xiǎn)因素加強(qiáng)防控，并積極配合實(shí)施術(shù)后規(guī)范放化療、中醫(yī)藥輔助治療。另外GOLPH-3蛋白可能參與胃癌的發(fā)生和發(fā)展，而是否可作為臨床治療的新靶點(diǎn)仍待進(jìn)一步研究探討。