血清神經特異性因子表達與腦膠質瘤患者術后腦損傷程度的相關性研究

羅肖宇，劉彩霞，石代樂，左路廣

腦膠質瘤是一種常見的神經系統腫瘤，主要表現為頭痛、顱內壓升高、神經障礙、癲癇發作等，占顱內原發性腫瘤的35%～60%［1-2］。手術切除是腦膠質瘤的主要干預手段，但手術過程中牽拉、電凝等操作可能損害腫瘤周圍腦組織，引起術后神經功能障礙，進而影響治療效果和預后情況［3］。有研究指出，神經特異性細胞因子能夠從微觀水平反映神經局部代謝狀況，對判斷腦損傷病情具有重要參考價值［4］。本研究通過監測腦膠質瘤患者圍手術期血清髓鞘堿性蛋白（myelin basic protein，MBP）、膠質纖維酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein，GFAP）水平變化，分析其與腦膠質瘤術后腦損傷程度的關系，為早期評估腦膠質瘤患者術后腦損傷情況提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018 年1 月至2020 年8 月河北北方學院附屬第一醫院神經外科進行手術治療的96 例腦膠質瘤患者，其中男54 例，女42 例；年齡35～65 歲［（49.65±8.97）歲］；病理分級：Ⅰ級5 例，Ⅱ級40 例，Ⅲ級51 例。

納入標準：（1）經影像學及病理檢查確診為腦膠質瘤［5］；（2）初診患者，尚未采取任何臨床干預措施；（3）由同一組手術醫師團隊行擇期開顱腫瘤切除術，術后遵醫囑接受規范化治療；（4）手術前意識清醒，配合治療并完成相關檢查。研究方案經醫學倫理委員會討論通過（218 倫批03 號），受試患者及家屬對研究內容知情同意。

排除標準：（1）顱腦損傷史、腦梗死或其他神經系統疾病；（2）全身其他部位腫瘤或急慢性感染疾病；（3）心肝肺腎等重要臟器功能損傷；（4）內分泌疾病、免疫系統疾病、凝血障礙或血液疾病；（5）已采取放化療等干預措施；（6）不配合治療、不耐受手術治療、隨訪缺失或其他原因死亡或失聯。

1.2 術后腦損傷判定標準 所有患者于術后7 d采用格拉斯哥昏迷評分法（Glasgow coma scale，GCS）評分判定術后腦損傷程度，觀察內容包括睜眼、語言、運動3 項，總分為15 分，其中3～8 分為重度受損，9～11 分為中度受損，12～14 分為輕度受損。

1.3 治療方法 所有患者入院后行常規開放腫瘤切除術，全身麻醉。首先開顱去除骨瓣，充分暴露膠質瘤中心及周圍浸潤部位，再小心切除腫瘤及病變組織，最大限度保護正常神經組織；對于體積較大或界限不清腫瘤，先切除瘤內，待減壓后再小心切除周圍病變組織，常規止血后逐層縫合，術后抗癲癇治療3 個月。

1.4 觀察指標 采集患者術前、術后3 d 及術后7 d 時外周血3 ml，以3 000 r/min（離心半徑5 cm）離心10 min，收集血清待檢。采用雙抗夾心ELISA法檢測血清MBP、GFAP 水平，檢測試劑購自武漢華美生物公司，全自動酶標儀（Triturus 型）購自瑞典Can Ag 公司。

1.5 統計學處理 采用SPSS 19.0 軟件進行統計分析，計量資料以±s表示，采用單因素方差分析或獨立t檢驗；計數資料以頻率和百分比（%）表示，采用χ2檢驗；繪制ROC 曲線分析血清MBP、GFAP對腦膠質瘤術后腦損傷程度的評估價值，采用Pear?son 法探討血清MBP、GFAP 水平與GCS 評分的相關性。P<0.05 表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 腦膠質瘤患者圍手術期血清MBP、GFAP 水平變化 與術前相比，腦膠質瘤患者術后3 d 和術后7 d 血清MBP、GFAP 水平明顯升高（P<0.05），且術后3 d 時血清MBP、GFAP 水平高于術后7 d（P<0.05）。見表1。

表1 96 例腦膠質瘤患者圍手術期血清MBP、GFAP 水平變化（± s）

表1 96 例腦膠質瘤患者圍手術期血清MBP、GFAP 水平變化（± s）

注：MBP 為血清髓鞘堿性蛋白，GFAP 為膠質纖維酸性蛋白

時間術前術后3 d術后7 d F 值P 值GFAP（ng/L）69.62±14.96 102.32±25.36 83.21±17.55 59.896<0.01 MBP（μg/L）4.38±1.16 7.02±1.85 5.69±1.42 60.121<0.01

2.2 術后不同腦損傷程度患者臨床特征比較 術后不同腦損傷程度患者性別、年齡和病理分級相比，差異無統計學意義（P>0.05）。見表2。

表2 術后不同腦損傷程度患者臨床特征比較

2.3 術后不同腦損傷程度患者圍手術期血清MBP、GFAP 水平比較 術后不同腦損傷程度患者術前血清MBP、GFAP 水平相比，差異無統計學意義（P>0.05）；而術后中重度損傷患者術后3 d 和術后7 d 時血清MBP、GFAP 水平高于輕度損傷患者，差異有統計學意義（P<0.05）。見表3。

表3 術后不同腦損傷程度患者圍手術期血清MBP、GFAP 水平比較（± s）

表3 術后不同腦損傷程度患者圍手術期血清MBP、GFAP 水平比較（± s）

注：MBP 為血清髓鞘堿性蛋白，GFAP 為膠質纖維酸性蛋白

損傷程度輕度損傷中重度損傷t 值P 值例數69 27 MBP（μg/L）GFAP（ng/L）術前4.33±1.08 4.49±1.12 0.593 0.555術后3 d 6.28±1.68 8.89±1.92 6.052<0.01術后7 d 5.51±1.29 6.15±1.36 2.037 0.044術前69.38±13.14 70.23±15.26 0.236 0.814術后3 d 92.07±21.05 128.54±25.04 7.227<0.01術后7 d 80.25±14.62 91.08±15.38 2.959 0.004

2.4 血清MBP、GFAP 水平與GCS 評分的相關性分析 術前血清MBP、GFAP 水平與GCS 評分無密切相關性（P>0.05）；而術后3 d 和術后7 d 血清MBP、GFAP 水平與GCS 評分均呈負相關（P<0.05）。見表4。

表4 血清MBP、GFAP 水平與GCS 評分的相關性

2.5 術后3 d 血清MBP、GFAP 水平對術后腦損傷程度的評估價值 以中重度腦損傷為觀察組，輕度腦損傷患者為對照組，分析血清MBP、GFAP 對術后腦損傷情況的評估價值。二者聯合檢測評估靈敏度與MBP、GFAP 單獨檢測比較差異無統計學意義（P>0.05）。聯合檢測評估特異度高于MBP、GFAP單獨檢測，差異有統計學意義（P<0.05）。見表5、圖1。

表5 術后3 d 血清MBP、GFAP 水平對術后腦損傷程度的評估價值

圖1 血清MBP、GFAP 評估術后腦損傷程度的ROC 曲線

3 討論

腦膠質瘤的治療需要在不損害功能區域腦組織前提下，盡可能完全切除病灶，同時聯合同步放、化療，最大限度改善預后和降低復發率。腦膠質瘤的病變部位特殊，手術風險較高，操作難度較大［6］。雖然精準醫學在神經外科的應用日益廣泛，腦膠質瘤診療效果有顯著提高，但手術切除病灶過程中不可避免會造成腦組織創傷，影響術后神經功能恢復［7］。因此，準確評估術后腦損傷情況對判斷臨床手術效果尤為重要。

GCS 是目前臨床上評估患者意識狀態的常用指標，但其為宏觀監測項目，所受的干擾因素較多，且主觀性較強，導致判定結果容易出現偏差［8］。近年來研究發現，多項神經特異性因子參與腦損傷的病理過程，可作為臨床查體和神經影像學檢查的補充，對腦損傷的診斷、評估具有重要參考價值［9］。MBP、GFAP 均是來源于神經細胞的特異性蛋白因子，MBP 主要存在于少突細胞中，GFAP 則是膠質細胞特有的骨架蛋白，兩者在維持神經細胞結構及功能完整性方面均發揮著積極作用［10］。有研究表明［11］，MBP、GFAP 是神經受損的敏感標志物，腦外傷、顱腦手術等均會導致其表達量升高，檢測血清MBP、GFAP 水平有助于輔助評估術后腦損傷程度。

本研究結果顯示，腦膠質瘤患者術后血清MBP、GFAP 水平顯著升高，且呈先升后降的變化趨勢，提示血清MBP、GFAP 水平可能作為評估術后腦損傷的參考指標。顱內腫瘤切除術可引起腦水腫和局部腦組織損傷，神經細胞受損，導致術后血清MBP、GFAP 水平快速升高；而隨著術后時間推移，顱內水腫逐漸消除，腦損傷得到恢復，血清MBP、GFAP 水平也逐漸降低。因此，動態監測血清MBP、GFAP 水平變化有助于掌握腦膠質瘤患者術后神經恢復情況。

腦膠質瘤的浸潤生長會對周圍神經產生壓迫，造成腦水腫、顱內代謝紊亂以及相關炎癥等，加重腦組織損傷程度。手術雖能緩解病灶對腦組織的物理壓迫，但術中牽拉、電凝等操作仍會造成醫源性腦損傷。另外，手術時間、機體應激、術后顱內水腫、出血等均是影響腦損傷程度的重要因素。GCS 評分是腦損傷患者意識狀態的重要指標，對判斷顱腦手術患者腦損傷程度和評估預后具有一定幫助［12］。本研究結果顯示，中重度損傷患者術后血清MBP、GFAP 水平高于輕度損傷患者，且血清MBP、GFAP 水平與GCS 評分呈顯著負相關，提示術后血清MBP、GFAP水平能從細胞代謝方面判斷腦組織受損程度，可作為評估術后腦損傷的潛在指標。

本研究中，術后3 d 血清MBP、GFAP 水平評估腦膠質瘤患者術后中重度腦損傷的靈敏度、特異度尚可，均在70%以上。但由于腦膠質瘤術后腦損傷病情復雜，單一指標的評估效能有限，可能會影響早期預測的準確性。本研究進一步分析發現，血清MBP 聯合GFAP 對中重度腦損傷預測的特異度有顯著提高，聯合預測的靈敏度與單一指標檢測無差異，提示血清MBP 和GFAP 聯合檢測能夠提高對腦膠質瘤術后腦損傷程度的評估效能，對臨床選擇合理治療方案具有重要意義。顱腦手術不可避免會造成神經受損，導致血清中MBP、GFAP 水平發生改變，在經過有效的治療后，2 項指標水平會逐漸恢復。而部分中重度腦損傷患者血清MBP、GFAP 水平同時升高，神經損傷較重，治療預后可能不太理想。

綜上所述，腦膠質瘤患者術后血清MBP、GFAP水平先升后降，其表達與術后腦損傷及修復情況有關，可作為評估腦膠質瘤手術腦損傷程度的潛在指標。但本研究所納入研究對象較少，研究結果可能存在偏差，今后需設計大樣本、多中心研究，驗證研究結果的準確性。