裴美娟,于 迪,史新宇,于海波
顱內(nèi)動脈瘤(intracranial aneurysm,IA)是顱內(nèi)動脈血管壁因局限性病理性擴張而發(fā)生的瘤樣突起,是導(dǎo)致出血性腦卒中的重要疾病之一,總?cè)丝诎l(fā)病率為2%~5%,IA年破裂率為0.8%~2%,并與患病時間呈正相關(guān)。端粒是衰老領(lǐng)域近年來的研究熱點,端粒的重復(fù)序列TTAGGG帽結(jié)構(gòu)能夠發(fā)揮保護染色體、維持遺傳系統(tǒng)穩(wěn)定的作用。同時,端粒也會隨著細(xì)胞分裂而逐漸縮短,當(dāng)其縮短達到臨界長度時,會導(dǎo)致細(xì)胞失去分裂增殖能力并衰老凋亡。研究發(fā)現(xiàn),端粒長度變化在IA的發(fā)生發(fā)展中可能扮演重要作用,本實驗擬進一步探討在IA模型大鼠體內(nèi),不同組織中端粒長度變化是否一致,并與IA的大小進行相關(guān)性分析,以求尋找能夠更為準(zhǔn)確預(yù)測IA形成的生物學(xué)標(biāo)志物。
1.1 實驗動物 清潔級雌性SD大鼠50只,6~7周齡,體重200~250 g,購自軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實驗動物中心,每日光照12 h,5只/籠,標(biāo)準(zhǔn)飲食適應(yīng)性飼養(yǎng)1周。許可證號為SCXK-(軍)2012-0004。
1.2 主要儀器設(shè)備 手術(shù)顯微鏡及顯微手術(shù)器械(新天醫(yī)療有限公司),NanoDrop 2000(Thermo Fisher Scientific,美國),real-time PCR儀(Step One,美國),掃描電子顯微鏡(萊卡公司,美國)。
1.3 主要試劑耗材 0.9%氯化鈉注射液、戊巴比妥鈉、肝素鈉、L-甲硫氨酸(北京索萊寶科技),肝素抗凝管(積水醫(yī)療公司),DNA提取試劑盒(北京天根生物科技),real-time PCR試劑盒(UltraSYBR Mixture With ROXⅡ,北京康為世紀(jì)),Batson's #17組織侵蝕試劑盒(東莞市漢諾生物技術(shù))。
1.4 大鼠分組及模型的構(gòu)建 SD大鼠隨機分為2組(=25),IA組和對照組。腹腔內(nèi)注射1%戊巴比妥鈉(40 mg/kg)麻醉。 IA組操作:頸中線切口,分離頸總動脈和迷走神經(jīng),結(jié)扎右頸總動脈。……