Th1/Th2亞群細胞因子聯合中性粒細胞CD64和人白細胞DR抗原評估慢性阻塞性肺疾病急性加重的價值

朱彩平，周世新，賀小紅

（東莞康華醫院呼吸與危重癥醫學科，廣東東莞 523000）

慢性阻塞性肺疾?。╟hronic obstructive pulmonary disease，COPD）是呼吸科常見的肺部氣道慢性炎癥性疾病，患者支氣管細胞壞死，形成潰瘍，導致正常支氣管組織細胞結構被破壞，氣道壁代償性修復，引發氣道管壁厚度增加，氣道管壁阻力上升，出現不可逆氣流受限，肺功能減退[1]。由于大氣污染、吸煙、細菌感染及病毒感染等不良因素的影響，誘發慢性阻塞性肺疾病急性加重（acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease，AECOPD），患者短期內出現劇烈咳嗽、呼吸困難加重、痰量增多呈膿性，且常伴發熱等炎癥反應，對患者健康造成嚴重威脅，病死率、致殘率較高[2]。臨床多采用外周血白細胞、C反應蛋白（CRP）對AECOPD進行鑒別，但其敏感度及特異度較低、局限性較大。Th1/Th2亞群細胞因子含量與機體免疫功能相關，有助于反映患者是否感染[3]。中性粒細胞CD64是新發現的穿膜糖蛋白，在機體發生感染時會急劇上升，是有效的炎癥標記物[4]。人白細胞DR抗原（HLA-DR）是單核巨噬細胞抗原重要分子，在免疫應答中起到關鍵作用[5-6]?；诖?，本研究分析Th1/Th2亞群細胞因子聯合中性粒細胞CD64和HLA-DR對AECOPD的評估價值，以期為此類患者的診斷提供幫助，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2020年7月至2021年12月東莞康華醫院收治的296例AECOPD患者設為觀察組，另選取同期院內322例COPD穩定期復診患者設為對照組進行回顧性分析。觀察組患者中男性194例，女性102例；年齡41～65歲，平均年齡（55.64±7.18）歲；病程1.5～12年，平均病程（7.28±2.14）年。對照組患者中男性201例，女性121例；年齡42～68歲，平均年齡（56.27±7.61）歲；病程2～10年，平均病程（7.45 ±2.03）年。兩組患者性別、年齡、病程等一般資料比較，差異均無統計學意義（均P＞0.05），組間具有可比性。本研究經東莞康華醫院醫學倫理委員會批準。納入標準：①均符合《慢性阻塞性肺疾病基層診療指南（2018年）》[7]中COPD和AECOPD的診斷標準；②年齡＞40歲。排除標準：①近期使用過激素、免疫抑制劑治療者；②患惡性腫瘤、癌癥等疾病者；③合并自身免疫系統疾病者；④合并心、肝、腎功能嚴重異常者。

1.2 檢驗方法①Th1/Th2亞群細胞因子檢測方法：觀察組患者于入院時及治療7 d后，對照組患者于復診時抽取其清晨空腹靜脈血5 mL，采用流式細胞儀（美國Becton Dickinson公司，型號：FACS Canto II）檢測白細胞介素-6（IL-6）、γ干擾素（IFN-γ）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）水平，試劑盒均購于R&D公司。②CRP、降鈣素原（PCT）測定：采用電化學發光全自動免疫分析儀（德國羅氏公司，型號：ELecsys 2010）及其配套試劑盒測定血清PCT、CRP水平。③CD64指數、HLA-DR表達率測定：采用流式細胞儀檢測中性粒細胞CD64、HLA-DR水平，并計算CD64指數、HLA-DR表達率。

1.3 觀察指標①比較觀察組患者入院時及治療7 d后，對照組患者復診時Th1/Th2亞群細胞因子、炎癥因子及CD64指數、HLA-DR表達率。②分析入院時IL-6、 IFN-γ、TNF-α水平及CD64指數、HLA-DR表達率對AECOPD發生的預測價值。③進行一致性分析。IL-6、IFN-γ、TNF-α水平及CD64指數、HLA-DR表達率中任意一項指標預測AECOPD為陽性則結果判定為陽性。

1.4 統計學分析采用SPSS 22.0統計學軟件進行數據處理。計量資料以（±s）表示，兩組間比較行獨立樣本t檢驗；多組間比較行方差分析，其兩兩比較行LSD-t檢驗。計數資料以[例(%)]表示，組間比較行χ2檢驗。采用受試者工作曲線（ROC）分析入院時IL-6、IFN-γ、TNF-α水平及CD64指數、HLA-DR表達率對AECOPD發生的預測價值。一致性分析采用Kappa檢驗。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者檢測指標比較觀察組患者入院時CRP、PCT、IL-6、IFN-γ、TNF-α水 平 及CD64指數顯著高于觀察組治療7 d后及對照組復診時，HLADR表達率顯著低于觀察組治療7 d后及對照組復診時，差異有統計學意義（P＜0.05）；觀察組患者治療7 d后IL-6、IFN-γ、TNF-α水平及CD64指數顯著高于對照組復診時，HLA-DR表達率顯著低于對照組復診時，差異有統計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 兩組患者檢測指標比較（±s）

表1 兩組患者檢測指標比較（±s）

注：與同組入院時比較，*P＜0.05。IL-6：白細胞介素-6；IFN-γ：γ干擾素；TNF-α：腫瘤壞死因子-α；CRP：C反應蛋白；PCT：降鈣素原；HLA-DR：人白細胞 DR 抗原。

組別 例數 時間點 IL-6(pg/mL) IFN-γ(pg/mL) TNF-α(pg/mL) CRP(mg/L) PCT(ng/mL) CD64指數 HLA-DR(%)觀察組296 入院時 109.79±25.53 18.27±3.61 51.37±12.48 100.15±12.04 1.11±0.15 7.72±2.19 45.98±6.89治療7 d后 85.12±17.24*15.24±3.01* 35.14±10.01* 45.92±7.68* 0.05±0.01*4.42±1.15*68.27±5.24*對照組322 復診時 30.04±5.89 13.56±3.24 28.51±9.17 44.82±7.54 0.06±0.02 3.28±1.14 80.63±8.07 F值 602.547 160.684 374.758 2.820 26.617 663.149 202.34 P值 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＞0.05 ＞0.05 ＜0.05 ＜0.05

2.2 入院時相關指標預測AECOPD的ROC分析經ROC分析，入院時IL-6、 IFN-γ、TNF-α水平及CD64指數、HLA-DR表達率預測AECOPD的ROC的曲線下面積分別為0.950、0.935、0.948、0.918、0.811，差異均有統計學意義(均P＜0.05)，見表2。入院時IL-6、 IFN-γ、TNF-α水平及CD64指數、HLA-DR表達率預測AECOPD的ROC曲線，見圖1。

圖1 入院時相關指標預測AECOPD的ROC曲線

表2 入院時相關指標預測AECOPD的ROC分析

2.3 聯合檢測的一致性分析入院時IL-6≥73.991 pg/mL、IFN-γ≥15.458 pg/mL、TNF-α≥38.295 pg/mL、CD64指 數≥5.145、HLA-DR表達率≤70.438%判定為陽性，聯合預測中任一指標為陽性則結果判定為陽性。經一致性分析，296例納入對象中聯合預測陽性268例，敏感度0.905，特異度為0.894，準確率為0.900，Kappa為0.799，見表3。

表3 聯合檢測的一致性分析

3 討論

COPD是危害人類健康的常見疾病之一，多與大氣污染、粉塵、遺傳、病原菌感染等因素相關。隨著人類生活方式的改變及環境因素的影響，患者疾病程度加重，發病率上升，導致患者上呼吸道病菌感染、氣道細菌負荷增加及氣道新菌株產生，出現AECOPD，且發病率增加，病死率上升[8]。另外，臨床對AECOPD多使用抗生素治療，導致抗生素濫用，影響細菌耐藥性，導致病情加重，治療難度增加。因此，尋找合適的生物標記物及早預測AECOPD，對病情的診斷及指導抗生素的使用具有十分重要的意義。

本研究結果顯示，AECOPD患者Th1/Th2亞群細胞因子及CD64指數、HLA-DR表達率均處于異常狀態，提示Th1/Th2亞群細胞因子及CD64指數、HLA-DR表達率的敏感性高于常規炎癥因子指標。其原因分析如下：Th1細胞分泌 TNF-α、IFN-γ等因子，在細胞免疫、抗感染方面發揮重要作用，Th2細胞通過分泌IL-6抑制機體免疫，降低免疫功能[9]。CD64具有較高的特異度、敏感度，在細胞吞噬、呈遞抗原、炎癥釋放等過程發揮重要作用[10]。HLA-DR是MHC-Ⅱ類分子，具有傳遞抗原肽給淋巴細胞、增強免疫應答的功能[11]。COPD患者機體受細菌組織、集落刺激因子、INF-γ等促炎因子的影響，CD64表達迅速上升，通過細胞毒性作用，加重炎癥反應[12]。AECOPD期間受到細菌、病毒感染，機體細胞交叉調節功能異常，Th1 /Th2動態平衡被破壞，免疫功能受損，HLA-DR表達率下降，可及時反映患者病情進展程度[13]。同時，CD64指標及HLA-DR表達率受藥物、種族等因素的干擾較小，作為實驗室檢測指標預測AECOPD具有一定的參考價值[14]。

經ROC分析，入院時IL-6、IFN-γ、TNF-α水平及CD64指數、HLA-DR表達率預測AECOPD的ROC的AUC分 別 為0.950、0.935、0.948、0.918、0.811，最 佳 截 斷 值 為73.991 pg/mL、15.458 pg/mL、38.295 pg/mL、5.145、70.438%。經一致性分析，Kappa值為0.799。上述結果提示Th1/Th2亞群細胞因子及CD64指數、HLA-DR表達率可作為AECOPD的生物標記物。

綜上，Th1/Th2亞群細胞因子及CD64指數、HLA-DR表達率聯合可及時反映AECOPD病情的嚴重程度，對預測AECOPD具有一定的參考作用，值得臨床應用。