9817例女性人乳頭瘤病毒感染現(xiàn)狀分析

徐彩炎 任俊逸 劉會(huì)強(qiáng) 祁 君 滕秀香

宮頸癌是最常見的婦科惡性腫瘤之一，研究表明，宮頸癌是女性癌癥死亡的第3大病因[1]。人乳頭瘤病毒(human papillomavirus，HPV)是一種無(wú)包膜的雙鏈環(huán)狀DNA病毒，主要通過(guò)性傳播，是宮頸癌致病的主要因素之一[2]。HPV按照致癌潛能分為高危型、中危型和低危型，高危型包括16、18、33、35、39、45、51、52、56型等，其中16和18型最為常見，可導(dǎo)致70%的鱗狀細(xì)胞癌和80%以上的宮頸腺癌[3]。然而在不同地區(qū)、年齡、人種之間，HPV基因型的分布與不同的種族、地區(qū)和習(xí)俗相關(guān)[4～6]。北京地區(qū)近3年未見大規(guī)模HPV感染流行病學(xué)報(bào)道，不能有效地反映當(dāng)前本地區(qū)HPV的感染情況[7]。本研究通過(guò)分析2019～2022年于首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京中醫(yī)醫(yī)院健康體檢中心及婦科門診的9817例女性HPV及薄層液基細(xì)胞學(xué)技術(shù)(TCT)檢測(cè)結(jié)果，分析出其分布、構(gòu)成及相關(guān)性，為北京地區(qū)HPV疫苗研發(fā)、宮頸疾病的篩查和防治提供數(shù)據(jù)支持。

材料與方法

1.資料來(lái)源：9817例女性患者來(lái)源于2019年1月～2022年4月于首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京中醫(yī)醫(yī)院就診的健康體檢人群、婦科門診患者。納入患者年齡為18～89歲，患者平均年齡為39.34±8.76歲。按照年齡段共分為6組：<25歲、25～34歲、35～44歲、45～54歲、55～64歲及≥65歲。所有患者均為初次就診，且有性生活史。所有患者均知情，自愿參與檢查。本研究通過(guò)筆者醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理學(xué)委員會(huì)審批。

2.標(biāo)本采集:使用窺陰器充分暴露宮頸，用棉拭子將宮頸口過(guò)多的分泌物輕輕擦拭干凈，將一次性采樣器插入宮頸，緊貼宮頸口，順時(shí)針稍用力轉(zhuǎn)動(dòng)5～10圈，以取得足夠的脫落細(xì)胞；將采樣器放入裝有標(biāo)本保存液的瓶?jī)?nèi)輕搖洗滌數(shù)次，盡量將細(xì)胞洗脫下來(lái)，擰緊瓶蓋，立即送檢。

3.標(biāo)本檢測(cè):采用熒光PCR法對(duì)HPV分型進(jìn)行檢測(cè)，試劑盒為HPV核酸分型測(cè)試劑盒，其中包括30種HPV亞型，包括13種高危型(HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68)，5種中危型(HPV26、53、66、73、82)和12種低危型(HPV6、11、40、42、43、44、54、61、70、72、81、89)。由專業(yè)檢測(cè)人員記錄核實(shí)檢測(cè)結(jié)果。TCT檢測(cè)：TCT結(jié)果按照組織病理學(xué)TBS分類法分為8種類型：①未見上皮內(nèi)病變(no intraepithelial lesions or malignant lesions，NILM)；②無(wú)明確診斷意義的不典型鱗狀細(xì)胞(atypical squamous cell of undetermined significance，ASC-US)；③不能排除高級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變不典型鱗狀細(xì)胞(atypical squamous cells-cannot exclude HIS，ASC-H)；④低級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變(low grade squamous intraepithelial lesion，LSIL)；⑤高級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變(low grade squamous intraepithelial lesions，HSIL)；⑥鱗狀細(xì)胞癌(squamous cell carcinoma，SC)；⑦不典型腺上皮細(xì)胞(atypical glandular epithelial cells，AGC)；⑧腺原位癌(adenocarcinoma in situ，AIS)。

4.統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:應(yīng)用SPSS 26.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料以百分?jǐn)?shù)(%)表示，采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1.HPV感染基本特征: 9817例患者中，HPV感染人數(shù)為2024例，陽(yáng)性率為20.6%，其中單一亞型感染1510例(74.6%)，多重感染514例(25.4%)，高危型感染1158例(57.2%)，中危型感染142例(7.0%)，低危型感染81例(4.0%)。在測(cè)序的30種基因亞型中，HPV26、40、54、61、70、72、89亞型未在樣本中檢出。高危型感染前5位分別是HPV52(5.22%)、HPV58(2.98%)、HPV16(2.91%)、HPV51(2.51%)和HPV56(1.61%)。具體HPV基因亞型分布情況如圖1所示。

圖1 HPV各亞型感染率分布

2.HPV各亞型在不同年齡段構(gòu)成比: 高危型HPV 陽(yáng)性率最高是25～34歲(39.5%)及45～54歲(15.9%)人群，其中HPV16亞型在<25歲HPV感染女性中占11.16%，在25～34歲感染女性中占10.87%，在35～44歲感染女性中占9.35%，感染率占比隨著年齡增長(zhǎng)逐漸下降，但≥65歲女性感染率所占比例又稍上升。HPV52亞型感染女性在各個(gè)年齡段的感染率所占比例都位居首位，而且分布較穩(wěn)定(16.26%～19.54%)，只在≥65歲女性感染率所占比例稍下降(11.76%)。HPV33、HPV6亞型在不同年齡段構(gòu)成比中比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，其他HPV亞型在不同年齡段構(gòu)成比中比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。不同年齡段各個(gè)亞型的構(gòu)成比詳見表1。

表1 HPV各亞型在不同年齡段構(gòu)成比(%)

3.單一或多重感染:2024例感染病例中，感染類型以單一感染為主，單一感染率13.81%，在陽(yáng)性病例中占67.33%，多重感染以雙重感染多見，在陽(yáng)性病例中占21.85%，詳見表2。

表2 HPV感染亞型數(shù)目及所占比例

4.各型HPV感染中不同TCT病理結(jié)果的構(gòu)成比:對(duì)2024例HPV陽(yáng)性病例的TCT結(jié)果進(jìn)行分析，可見HPV16、HPV82在細(xì)胞學(xué)改變中差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。HPV16在LSIL及HSIL中均占據(jù)構(gòu)成比首位，HPV52在NILM構(gòu)成比中所占比例最大，HPV58在ASC-US及ASC-H構(gòu)成比中所占比例最大,詳見表3。

表3 各型HPV感染中不同TCT病理結(jié)果的構(gòu)成比(%)

討 論

宮頸癌是女性最常見的惡性腫瘤相關(guān)性死亡疾病之一，也是世界上唯一病因明確的婦科惡性腫瘤。宮頸癌發(fā)生于子宮頸的鱗狀上皮和柱狀上皮移行交界處，這是一個(gè)極易發(fā)生化生過(guò)程的部位，宮頸上皮持續(xù)感染1種或多種致癌類型的HPV會(huì)導(dǎo)致癌前病變，如不及時(shí)診斷和治療，在10～20年內(nèi)將逐漸發(fā)展為浸潤(rùn)性宮頸癌[8]。研究表明，在99.7%的宮頸癌患者中可發(fā)現(xiàn)HPV[9]。宮頸癌的主要組織學(xué)類型為鱗狀細(xì)胞癌，占宮頸癌的95%，其余為腺癌和其他類型的上皮腫瘤[10]。

HPV感染是危害人類健康最常見的病毒之一，迄今為止共發(fā)現(xiàn)了100余種亞型。80%的女性在其一生中都可能感染過(guò)HPV，然而90%的HPV感染是暫時(shí)的，可以在感染后的8～10個(gè)月內(nèi)通過(guò)自身免疫系統(tǒng)清除。目前普遍認(rèn)為HPV16和HPV18是世界上最主要的高危亞型，然而在亞洲，HPV52和HPV58則更為常見[11]。

HPV疫苗是目前避免HPV感染最主要的方法之一[12]。然而現(xiàn)有的HPV疫苗是根據(jù)西方國(guó)家HPV感染特征制備的，我國(guó)HPV疫苗的研發(fā)和應(yīng)用仍然處于起步階段，我國(guó)各地區(qū)人口特征不同，HPV感染情況和特征也不同[13]。

本研究通過(guò)分析9817例北京地區(qū)女性宮頸上皮細(xì)胞樣本HPV基因檢測(cè)結(jié)果，評(píng)估了HPV在人群中的感染情況及相關(guān)基因分型的分布特征以及與TCT病理結(jié)果的相關(guān)性。結(jié)果顯示，北京地區(qū)女性HPV感染率為20.5%，高于世界范圍女性HPV總體感染率(10.4%)，考慮與來(lái)筆者醫(yī)院婦科門診就診時(shí)患者已有癥狀相關(guān)[4]。感染率前3位的亞型分別是HPV52、HPV58和HPV16，該數(shù)據(jù)與2022年茅書為等[14]對(duì)南京市女性HPV感染的調(diào)查結(jié)果相符，也與2014年馮金鴿等[15]對(duì)北京地區(qū)女性HPV感染的調(diào)查結(jié)果基本相符。根據(jù)2020年Zhang等[16]對(duì)中國(guó)女性HPV感染的調(diào)查結(jié)果，感染率最高的HPV亞型依次為HPV16、HPV52和HPV58，也與本研究結(jié)果基本相符。

本研究顯示，不同年齡段HPV感染率呈現(xiàn)“雙峰”分布，感染高峰在25～34歲及45～54歲，這與國(guó)外流行病學(xué)調(diào)查所發(fā)現(xiàn)的HPV感染率隨年齡分布呈現(xiàn)“中間低，兩頭高”的V形規(guī)律相符[17]。然而國(guó)外研究的兩個(gè)高峰值分別在20～24歲以及40～49歲，本研究的感染高峰年齡段均較國(guó)外資料延遲5年左右，考慮原因可能為：①選擇人群偏差問題，來(lái)就診的部分女性可能已經(jīng)有相關(guān)癥狀或已經(jīng)發(fā)生病變，而年齡較小的女性就診多是為了健康篩查；②30歲左右女性性生活較為活躍，較易感染HPV；③55歲左右的女性，多數(shù)屬于圍絕經(jīng)期狀態(tài)，雌激素水平降低，生殖系統(tǒng)免疫功能降低，清除病毒的能力減弱，故容易造成HPV感染。目前我國(guó)HPV九價(jià)疫苗限定16～26歲，四價(jià)疫苗限定9～45歲接種，而我國(guó)不同地區(qū)HPV感染特征具有地區(qū)差異性[18～20]。根據(jù)本研究北京地區(qū)高危型HPV感染高峰在25～34歲及45～54歲，針對(duì)此年齡段女性應(yīng)加強(qiáng)HPV及TCT篩查，及時(shí)接種HPV疫苗。本研究還發(fā)現(xiàn)，HPV33、HPV6這2種亞型在不同年齡段中陽(yáng)性構(gòu)成比例有顯著差異，提示此2種亞型HPV易感染的年齡段不同，HPV33型應(yīng)在≥65歲人群中加大篩查力度，而HPV6亞型應(yīng)在<25歲人群中進(jìn)行重點(diǎn)篩查。

本研究發(fā)現(xiàn)，HPV陽(yáng)性病例中，感染單種HPV的女性最多，在多重感染中，二重感染者最多，且隨著感染亞型數(shù)目的增加，感染人數(shù)逐漸減少。多重感染的峰值集中在34歲以下，可能與年輕女性性生活活躍相關(guān)，故應(yīng)加強(qiáng)年輕女性預(yù)防HPV感染及宮頸癌相關(guān)知識(shí)宣傳教育，擴(kuò)大HPV疫苗接種范圍及宮頸癌篩查力度[21]。

本研究顯示，HPV16在LSIL及HSIL中均占據(jù)構(gòu)成比首位，HPV52在NILM的構(gòu)成比中所占比例最高，HPV58在ASC-US的構(gòu)成比中所占比例最高，這與HPV16、52、58為最常見的高危亞型相符，也提示HPV16和58亞型更容易導(dǎo)致宮頸上皮的病變，需要更加積極地進(jìn)行細(xì)胞學(xué)檢測(cè)。

綜上所述，本研究通過(guò)北京地區(qū)婦女HPV感染的不同基因亞型感染率分布、不同年齡段基因亞型特征、以及不同TCT表現(xiàn)與HPV亞型的特征，為該地區(qū)的HPV疫苗研發(fā)、宮頸疾病的篩查和防治提供數(shù)據(jù)支持。