HE 染色在臨床病理診斷中的應用價值研究

劉微

病理診斷是對疾病確診的主要方式之一,其具有準確、客觀、權威等特點,但是此種方法檢查結果準確性會受到操作人員具體操作水平的影響,且會受到切片質量、染色效果的影響［1］。同時臨床進行病理檢查時尚無具體標本檢驗的時間規范,這樣則可能導致病理組織受到脫水不完全等的影響而出現試劑濃度變化,以此對病理制片的質量造成影響,導致患者疾病診斷的難度提高,影響診斷結果的準確性［2,3］。因此,應合理改進HE 染色技術,以此促進病理診斷準確性的提高。本研究主要對HE 染色在臨床病理診斷中的應用價值進行分析,報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 以2018 年1 月～2020 年12 月本院72 張病理組織石蠟切片為研究對象,隨機分為實驗組和對照組,各36 張。實驗組中,胃腸肝膽制片12 張,脂肪組織制片9 張,子宮內膜制片8 張,骨制片7 張。對照組中,胃腸肝膽制片11 張,脂肪組織制片8 張,子宮內膜制片9 張,骨制片8 張。兩組的一般資料比較,差異無統計學意義(P>0.05),具有可比性。見表1。

表1 兩組的一般資料比較(張)

1.2 方法 對照組病理診斷中實施常規HE 染色,將病理組織放置于固定液中,以此促進蛋白質更好的凝固,最大程度保持細胞組織結構,以酒精作為脫水劑實施脫水干預,將脫水后的相關組織在二甲苯中存放,其中的酒精被全部置換后進行浸蠟包埋處理,通過切片機實施標本的切片,厚度為5～6 mm,薄片水浴燙平烘干處理,之后粘貼標簽。采用二甲苯脫去石蠟,以70%、80%、95%濃度的酒精加蒸餾水,蠟脫水洗后進行相應的染色處理,其中加入蘇木精時會出現細胞核以及核糖體變藍的情況,之后繼續將伊紅染料置入,可見細胞質變為紅色或淡紅色,分析操作中存在的缺陷,并制定相應的改進措施,在實驗組中應用。

實驗組病理診斷中實施改進HE 染色,結合病理組織存在的特點,確定具體染色的方法,并合理控制固定和脫水所需時間。將病理組織置于固定液中,可促使蛋白質的凝固,以此保持細胞組織結構,以酒精作為脫水劑,實施脫水干預,脫水后的組織在二甲苯中放置,在組織被酒精所置換后實施浸蠟包埋干預,采用切片機對標本進行切片處理,控制厚度范圍為5～6 mm,水浴對薄片燙平處理,并進行烘干,粘貼標簽。若標本的體量較小,則適當縮短縮水時間和固定時間,對于大體量的脂肪組織標本,則相對延長固定時間和脫水時間。染色的過程中,密切關注制品的厚度和溫度,并以制品的厚度和溫度為參考,合理調整操作的時間。新產品使用前,應首先實施試染操作,采用有色瓶保存染色中需要的試劑,在染色瓶上粘貼標簽,包括名稱、含量、時間等,分析具體的情況,確定是否需要進行冷藏。染色產生化學反應后,進一步進行研究,并與二次檢測的結果進行比較,若為試劑或染色液原因所致,則及時更換。在檢查的過程中,確保制品均處于干燥狀態,避免對檢查的結果產生不良影響。染色完成后,對制片情況觀察,采用顯微鏡查驗結果。

1.3 觀察指標 比較兩組的病理診斷符合率,即胃腸肝膽制片、脂肪組織制片、子宮內膜制片、骨制片診斷符合率。

1.4 統計學方法 采用SPSS18.0 統計學軟件進行統計分析。計數資料以率(%)表示,采用χ2檢驗。P<0.05 表示差異具有統計學意義。

2 結果

實驗組骨制片、子宮內膜制片、脂肪組織制片、胃腸肝膽制片診斷符合率分別為85.71%、87.50%、77.78%、91.67%,對照組骨制片、子宮內膜制片、脂肪組織制片、胃腸肝膽制片診斷符合率分別為50.00%、55.56%、50.00%、63.64%。實驗組病理診斷總符合率為86.11%,高于對照組的55.56%,差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 兩組的病理診斷符合率比較(%)

3 討論

實施病理檢查的過程中,病理組織染色的質量會直接影響疾病診斷的結果,從而影響疾病治療方案的制定,最終影響患者疾病治療的效果以及預后情況［4,5］。實施病理檢查的過程中,染色的質量主要取決于細胞核染色的質量,染色是在物理作用與化學作用下所完成的檢驗操作,因此應客觀分析影響診斷結果的因素,并積極防控,以此促進診斷技術的提高,保證診斷結果的準確性［6,7］。

HE 染色法是石蠟切片染色方法的一種,其主要是采用蘇木精堿性染液實施細胞核內核酸、染色質的著色,并實施伊紅酸性染料染色處理細胞外基質以及細胞質,應用較為廣泛［8］。實施HE 染色中,細胞核染色質量會影響具體的染色質量,在組織中存在大量微小空洞,采用染色劑浸透后與組織結合會出現溶解、擴散的情況,且組織細胞中存在不同水平的堿性物質或酸性物質,與染液中陰離子、陽離子相結合可增強固定的效果［9,10］。送檢組織需要實施固定處理,保留組織活性在合理的范圍內,以此確保組織形態結構不會發生改變,保證組織與活體時的形態、成分基本一致,防止在后期處理中發生組織自溶的情況［11,12］。組織在原有結構消失或破壞后,會影響制片的質量,從而對診斷的結果造成影響［13,14］。HE 染色法中細胞、組織染色質量比較容易受到脫水、固定、取材等的影響,實施組織染色中需要結合不同的標本,合理選擇取材的范圍和工具,以此降低對組織結構的影響程度,保持其完整性［15,16］。

HE 染色法具體操作可能會對HE 染色結果造成影響,為了保證染色的質量,在實施染色的過程中應分析其中存在的缺陷,并進行經驗的總結,針對性的制定完善方案和改進方案,重點強調取材的方法以及操作的時間,選擇操作工具時應最大限度對病理組織結果保留,若使用鉗子難以順利夾取組織,或會對組織造成破壞,則需要更換為針管等操作,保持謹慎吸出組織,最大程度防止標本、組織受到損傷,常規情況下在癌細胞、腫物等壞死組織中較為適用［17,18］。同時,實施病理組織檢查時較易出現脫鈣的情況,其主要發生于骨組織中,實施操作的過程中需要明確實施脫鈣操作,在脫鈣操作完成后實施制片干預,盡量保證結構的完整性,確保染色的效果［19,20］。實施組織檢查時首先應實施固定處理,盡快送檢標本,若不能及時送檢或固定處理,則可將標本冷藏,并延長固定處理的時間［21,22］。

本研究中,實驗組病理診斷符合率為86.11%,高于對照組的55.56%,差異有統計學意義(P<0.05)。表明改進HE 染色能夠促進病理診斷符合率的提高,更好保證診斷結果的準確性。實際實施病理診斷的過程中需要與切片的特點相結合,差別化應用染色技術,合理調整,以此促進切片質量的提高,保證診斷結果的準確性。

綜上所述,改進HE 染色在病理診斷中應用有著較高的價值,可更好指導臨床疾病的診治,意義重大。