慢性心功能不全病人PRA、CyP-A、sST2的表達及其相關性

楊 婷，趙茜茜，王 珅，崔曉博，李金嶺

慢性心功能不全是心血管疾病終末期病人的一種狀態，且病人5年內的病死率達50%，優化治療可促進病人臨床癥狀改善，減少病人死亡[1]?？扇苄陨L刺激表達因子-2(sST2)作為一種白細胞介素-1家族中重要成員，一旦心肌細胞發生機械性刺激，成纖維負荷發生變化，會促進大量的結合性生長刺激表達因子-2(ST2L)分泌，ST2L與白細胞介素-33(IL-33)特異性結合后，下游通路被激活，參與心肌重塑過程，對心肌起到一定的保護作用[2-3]。親環素(CyP)能抑制細胞免疫，在蛋白質運輸中發揮調節作用，對炎性細胞聚集有一定的誘導作用，在血管損傷中具有一定的作用，在動脈粥樣硬化中起到至關重要的作用，CyP-A屬于親環素中關鍵蛋白[4]。腎素活性(PRA)能有效反映機體腎交感神經活性狀況，研究指出，腎素-血管緊張素系統在心力衰竭發病中至關重要[5]。本研究探討血清PRA、CyP-A、sST2水平與慢性心功能不全發病的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2020年1月—2020年12月在我院就診的慢性心功能不全病人61例作為研究組，其中男31例，女30例；年齡50～84歲；體質指數(BMI)21～26 kg/m2。選取同時期我院年齡相匹配健康體檢者40名為正常組，其中男18名，女22名；年齡52～85歲；BMI 20～27 kg/m2。兩組研究對象一般資料比較差異均無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

研究組納入標準：符合《ACC/AHA成人慢性心功能不全診療指南》[6]中的診斷標準；初次在我院就診病人；經過心臟超聲、冠狀動脈造影、心電圖等確診；病人及其家屬均知情并簽署知情同意書。排除標準：心律失常、感染等病人；合并惡性腫瘤、自身免疫系統疾病、肝損傷病人；精神異常病人。本研究獲得我院倫理委員會批準。

1.2 方法

1.2.1 血脂指標檢測 采集兩組研究對象空腹肘部靜脈血3 mL，2 000 r/min離心處理5 min，獲取血清后-20 ℃保存。通過全自動生化分析儀檢測兩組總膽固醇(total cholesterol，TC)、載脂蛋白A(Apo A)、載脂蛋白B(Apo B)、高密度脂蛋白膽固醇(high desity cholesterol，HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(low desity cholesterol，LDL-C)、三酰甘油(total triglyceride，TG)水平。

1.2.2 心功能指標檢測 通過彩色多普勒超聲(ViViD3 型，GE公司提供)檢測兩組左室舒張末期內徑(left ventricular end diastolic diameter，LVEDD)、左室收縮末期內徑(left ventricular end systolic diameter，LVESD)、左房內徑(left atrial inner diameter，LAD)、室間隔厚度(interventricular septal thickness，IVST)及左室射血分數(left ventricular ejection fraction，LVEF)。

1.2.3 PRA、CyP-A、sST2水平檢測 采用酶聯免疫吸附法檢測PRA、CyP-A、sST2水平將提前稀釋好的血液標本100 μL加入相應的微孔板反應孔中，第1孔只加樣品稀釋液為零孔，混合均勻，在37 ℃下處理90 min，甩去孔內液體，吸干水分；將準備好的抗體加入到每孔中0.1 mL，在37 ℃下處理60 min，空白孔不加底物四甲基聯苯胺(TMS)；孔內液體甩出后，每孔中滴加0.01 mol/L磷酸緩沖鹽溶液(PBS)，浸泡2 min后，孔內液體甩出，水分吸干；每孔滴加90 μL 四甲基硅烷(TMS)，避光20 min；每孔中加入90 μL TMS終止液，即藍色變為黃色。

1.3 心功能分級標準 參考美國紐約心臟病協會(NYHA)分級標準[7]，將心功能分為Ⅰ級、Ⅱ級、Ⅲ級、Ⅳ級。

2 結 果

2.1 兩組臨床資料比較 兩組性別、年齡、BMI、血脂、血壓等指標比較，差異均無統計學意義(P>0.05)。研究組LVEDD、LVESD、LAD、IVST水平高于正常組(P<0.05)，LVEF水平低于正常組(P<0.05)。詳見表1。

表1 兩組臨床資料比較

2.2 兩組PRA、CyP-A、sST2水平比較 研究組PRA、CyP-A、sST2水平高于正常組(P<0.05)。詳見表2。

表2 兩組PRA、CyP-A、sST2水平比較(±s)

2.3 不同心功能分級慢性心功能不全病人PRA、CyP-A、sST2水平比較 Ⅱ級、Ⅲ級、Ⅳ級病人PRA、CyP-A、sST2水平均高于Ⅰ級病人(P<0.05)；Ⅲ級、Ⅳ級病人PRA、CyP-A、sST2水平高于Ⅱ級病人(P<0.05)；Ⅳ級病人PRA、CyP-A、sST2水平高于Ⅲ級病人(P<0.05)。詳見表3。

表3 不同心功能分級慢性心功能不全病人PRA、CyP-A、sST2水平比較(±s)

2.4 PRA、CyP-A、sST2對慢性心功能不全的診斷價值 ROC分析顯示，CyP-A、sST2、PRA預測慢性心功能不全的曲線下面積(AUC)分別為0.790[95%CI(0.678，0.902)]、0.788[95%CI(0.675，0.902)]、0.768[95%CI(0.648，0.888)]。CyP-A、sST2、PRA預測慢性心功能不全的靈敏度、特異度、陽性預測值、陰性預測值詳見表4、圖1。

表4 PRA、CyP-A、sST2對慢性心功能不全的診斷效能分析 單位：%

圖1 PRA、CyP-A、sST2診斷慢性心功能不全的ROC曲線

2.5 PRA、CyP-A、sST2的相關性分析 PRA與CyP-A呈正相關(r=0.493，P<0.001)，Cy-A與sST2呈正相關(r=0.373，P=0.003)，PRA與sST2呈正相關(r=0.498，P<0.001)。詳見圖2～圖4。

圖2 PRA與CyP-A的相關性分析

圖3 CyP-A與sST2的相關性分析

圖4 PRA與sST2的相關性分析

3 討 論

本研究通過多因素Logistic回歸分析發現，血清PRA、CyP-A、sST2水平增高均為慢性心功能不全的獨立危險因素，提示血清PRA、CyP-A、sST2水平可以作為臨床預測慢性心功能不全的指標。

CyP-A是親環素家族中主要成員，其表達水平的高低與機體中細胞炎性因子、血管細胞因子濃度有緊密的聯系[8-9]。一旦機體發生氧化應激反應，或者是血管發生損傷，會有大量的CyP-A產生，血液中CyP-A濃度增加，促進大量的促炎因子在病人發病部位聚集，引發機體抗氧化能力下降，大量的內皮細胞增殖，腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細胞介素-6(IL-6)、白細胞介素-1β(IL-1β)水平異常表達[10-11]。本研究表明，慢性心功能不全病人血清CyP-A水平升高，且CyP-A水平與慢性心功能不全存在密切關系，提示血清CyP-A水平升高是導致慢性心功能不全發病的危險因素。王群立等[12]研究也顯示，心功能不全病人CyP-A水平高于正常水平，提示CyP-A水平與心力衰竭病人機體異常炎癥反應有關，CyP-A可能作為心功能不全的獨立高危因素，與本研究結果一致。本研究中ROC分析顯示，CyP-A預測慢性心功能不全的AUC達0.790，提示CyP-A是慢性心功能不全的有效預測指標。

交感神經興奮導致大量的去甲腎上腺素被釋放，進入到血液，尤其是針對心力衰竭病人，去甲腎上腺素濃度受心功能不全病人病情嚴重程度、心功能分級的影響，從而對心力衰竭病人預后具有一定的預測價值[13-14]。PRA大量釋放會導致病人交感神經興奮。本研究顯示，慢性心功能不全病人血清PRA水平較高，血清PRA水平升高與慢性心功能不全密切相關，說明PRA參與慢性心功能不全的發病過程。PRA參與慢性心功能不全發病機制：PRA會促進病人心肌肥大，心間質纖維發生纖維化，引發信使重構，造成大量的心肌細胞凋亡，引起腎上腺皮質球帶發生水鈉潴留，心肌細胞肥大，增加心臟負荷，加快心肌纖維化發展的速度。本研究同樣顯示血清PRA是慢性心功能不全發病的高能預警指標[15-16]。

有研究認為，心功能不全容易引起機體中成纖維細胞、心肌細胞產生大量的白細胞介素-33(IL-33)和ST2，進入血液，一旦ST2與IL-33競爭結合，阻斷信號通路，導致心臟保護能力降低，誘導心肌纖維化發生，心肌細胞出現凋亡，心室重構[17-18]。Pascual-Figal等[19]研究指出，sST2、IL-33在心力衰竭臨床診斷中具有較高的診斷價值，本研究中慢性心功能不全病人血清sST2水平均高于正常人，提示sST2是慢性心功能不全發病的危險因素。ROC分析顯示，sST2預測慢性心功能不全發病的AUC達0.788，靈敏度和特異度分別為79.95%、76.60%，提示血清sST2可用于評估慢性心功能不全發病風險。湯豐寧等[20]研究也指出，sST2能有效反映病人心肌損傷、炎癥反應狀況，受腎功能等影響較小。本研究表明，PRA、CyP-A、sST2三者之間呈正相關，隨著慢性心功能不全病人病情不斷發展，PRA、CyP-A、sST2水平不斷升高，參與病人病情發展過程。

綜上所述，慢性心功能不全病人血清PRA、CyP-A、sST2水平升高，高水平的PRA、CyP-A、sST2可能是慢性心功能不全的獨立危險因素，可為慢性心功能不全早期診斷提供參考。