慢性丙型肝炎患者外周血白細(xì)胞介素-21水平與干擾素治療效果的關(guān)系

黃彬彬，石 毅

（1.欽州市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科；2.欽州市第一人民醫(yī)院消化科一區(qū)，廣西欽州 535000）

慢性丙型肝炎是一種丙型肝炎病毒（HCV）感染所引起的慢性肝臟疾病。感染HCV后大部分患者不會表現(xiàn)出臨床癥狀，只有通過驗(yàn)室指標(biāo)或后期表現(xiàn)出相應(yīng)癥狀才能確診[1]。慢性丙型肝炎的常見臨床表現(xiàn)為四肢無力、發(fā)熱等，后期可能出現(xiàn)黃疸等癥狀[2]。慢性丙型肝炎需及時治療，否則將會發(fā)展為肝硬化甚至肝癌。現(xiàn)階段，臨床對于慢性丙型肝炎患者主要采取干擾素抗病毒治療及對癥支持治療。白細(xì)胞介素-21（IL-21）主要由活化的CD4+T淋巴細(xì)胞分泌，與相關(guān)免疫細(xì)胞的增殖有密切關(guān)系，由此推測IL-21水平與慢性丙型肝炎存在一定聯(lián)系[3]。因此，本研究對慢性丙型肝炎患者外周血IL-21水平與干擾素治療效果的相關(guān)性進(jìn)行分析，探索IL-21作為療效檢測指標(biāo)的可能性，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年1月至2021年10月欽州市第一人民醫(yī)院收治的72例慢性丙型肝炎患者為研究對象，按照隨機(jī)數(shù)字表法分為觀察組和對照組，各36例。觀察組患者中男性23例，女性13例；年齡20～72歲，平均年齡（46.59±9.32）歲；體質(zhì)量 45～70 kg，平均體質(zhì)量（58.62±10.79）kg；丙型肝炎病毒核糖核酸（HCV RNA）4～9 log10 copies/mL， 平 均HCV RNA（6.48±1.69）log10 copies/mL； 病程4～6年，平均病程（5.21±0.46）年。對照組患者中男性22例，女性14例；年齡21～72歲，平均年齡（47.18±9.41）歲；體質(zhì)量46～73 kg，平 均 體 質(zhì) 量（59.34±10.81）kg；HCV RNA 4～10 log10 copies/mL，平均 HCV RNA（6.45±1.72）log10 copies/mL；病程4～7年，平均病程（5.42±0.53）年。兩組患者一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），組間具有可比性。本研究經(jīng)欽州市第一人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)，患者及其家屬均對研究知情并簽署知情同意書。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《丙型肝炎防治指南（2015更新版）》[4]中慢性丙型肝炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)；②年齡19～72歲。排除標(biāo)準(zhǔn)：①2個月內(nèi)接受過干擾素治療；②合并有其他炎癥性疾病的患者；③合并有其他肝臟疾病的患者；④患有免疫性疾病的患者；⑤妊娠或哺乳期婦女；⑥對本研究藥物過敏者。

1.2 治療方法 兩組患者均給予護(hù)肝等常規(guī)基礎(chǔ)治療。對照組患者予普通重組人干擾素α-2b（北京凱因科技股份有限公司，國藥準(zhǔn)字S20030030，規(guī)格：3 mL∶300萬IU），500萬IU/次，2天1次；口服利巴韋林[世貿(mào)天階制藥（江蘇）有限責(zé)任公司，國藥準(zhǔn)字H19993856，規(guī)格：0.1 g/片]0.1 g/次，3次/d。觀察組患者給予聚乙二醇α-2a干擾素（廈門特寶生物工程股份有限公司，國藥準(zhǔn)字S20174005，規(guī)格：90 μg/支）180 μg/次，1次/周；口服利巴韋林0.1 g/次，3次/d。兩組患者均治療6個月。

1.3 觀察指標(biāo) ①兩組患者療效比較。持續(xù)應(yīng)答：治療結(jié)束后，患者外周血IL-21及肝功能指標(biāo)恢復(fù)到正常水平，HCV RNA呈陰性；無應(yīng)答：治療結(jié)束后，患者外周血IL-21、肝功能指標(biāo)及HCV RNA水平均未恢復(fù)到正常水平[5]。②比較治療前后兩組患者IL-21及肝功能指標(biāo)水平。采集患者空腹外周血3 mL，離心半徑13 cm，以5 000 r/min轉(zhuǎn)速離心10 min，取上清液，置于-70 ℃環(huán)境下保存。采用酶標(biāo)儀（上海科華實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)有限公司，型號：ST-960）以酶聯(lián)免疫吸附法檢測IL-21水平，試劑盒購自上海康朗生物科技有限公司。同法取上清液，采用全自動生化分析儀（迪瑞醫(yī)療科技股份有限公司，型號：CS-1200）檢測谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、總膽紅素（TBIL）、直接膽紅素（DBIL）及間接膽紅素（IBIL）水平；采用速率法檢測ALT、AST，采用釩酸鹽氧化法檢測TBIL、DBIL及IBIL，試劑盒購自上海科華生物工程股份有限公司。③比較觀察組患者治療后持續(xù)應(yīng)答及無應(yīng)答患者IL-21及肝功能指標(biāo)水平。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS 22.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。計量資料以（）表示，組間比較行獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，組內(nèi)比較行配對樣本t檢驗(yàn)；計數(shù)資料以[例(%)]表示，組間比較行χ2檢驗(yàn)，等級資料比較采用秩和檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者療效比較 治療后，觀察組患者療效顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 兩組患者療效比較 [例(%)]

2.2 治療前后兩組患者IL-21及肝功能指標(biāo)水平比較 治療后，兩組患者IL-21及肝功能指標(biāo)水平低于治療前，且觀察組低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表2 治療前后兩組患者IL-21及肝功能指標(biāo)水平比較（）

表2 治療前后兩組患者IL-21及肝功能指標(biāo)水平比較（）

注：與同組治療前比較，*P＜0.05；IL-21：白細(xì)胞介素-21；ALT：谷丙轉(zhuǎn)氨酶；AST：谷草轉(zhuǎn)氨酶；TBIL：總膽紅素；DBIL：直接膽紅素；IBIL：間接膽紅素。

組別 例數(shù) IL-21(μg/L) ALT(U/L) AST(U/L)治療前 治療后 治療前 治療后 治療前 治療后觀察組 36 36.45±10.24 25.67±7.31* 162.24±40.36 43.29±12.36* 118.34±21.68 38.95±9.82*對照組 36 36.17±10.63 32.72±8.29* 162.65±39.85 79.67±20.39* 119.16±21.51 59.47±12.59*t值 0.114 3.827 0.043 9.155 0.161 7.711 P值 0.910 0.015 0.966 0.008 0.873 0.007組別 例數(shù) TBIL(μmol/L) DBIL(μmol/L) IBIL(μmol/L)治療前 治療后 治療前 治療后 治療前 治療后觀察組 36 54.36±12.94 18.91±6.12* 21.37±6.29 8.64±2.51* 34.68±9.32 18.72±5.36*對照組 36 55.27±12.84 33.92±8.63* 21.72±6.32 12.57±3.62* 34.92±9.24 27.54±7.82*t值 0.300 8.512 0.236 5.353 0.110 5.582 P值 0.765 0.022 0.815 0.027 0.913 0.005

2.3 觀察組患者治療后持續(xù)應(yīng)答及無應(yīng)答患者IL-21及肝功能指標(biāo)水平比較 治療后，觀察組持續(xù)應(yīng)答患者IL-21及肝功能指標(biāo)水平顯著低于無應(yīng)答患者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表3。

表3 觀察組治療后持續(xù)應(yīng)答及無應(yīng)答患者IL-21及肝功能指標(biāo)水平比較（）

表3 觀察組治療后持續(xù)應(yīng)答及無應(yīng)答患者IL-21及肝功能指標(biāo)水平比較（）

注：IL-21：白細(xì)胞介素-21；ALT：谷丙轉(zhuǎn)氨酶；AST：谷草轉(zhuǎn)氨酶；TBIL：總膽紅素；DBIL：直接膽紅素；IBIL：間接膽紅素。

組別 例數(shù) IL-21(μg/L) ALT(U/L) AST(U/L) TBIL(μmol/L) DBIL(μmol/L) IBIL(μmol/L)持續(xù)應(yīng)答 31 22.47±6.52 37.92±10.65 28.68±8.29 16.84±5.19 6.68±1.51 16.32±4.36無應(yīng)答 5 34.84±7.35 85.37±13.46 68.32±15.38 37.59±9.34 15.36±4.72 35.65±6.39 t值 3.875 8.936 8.745 7.381 8.368 8.635 P值 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05

3 討論

慢性丙型肝炎是一種患病率較高的疾病，主要傳播途徑有血液傳播及母嬰傳播等[6]。多數(shù)患者在感染HCV后不會表現(xiàn)出明顯癥狀，故慢性丙型肝炎只能通過抗-HCV及HCV RNA兩種指標(biāo)檢測進(jìn)行早期確診并在治療過程中觀察療效。這兩種檢測方法雖然檢測結(jié)果較為準(zhǔn)確，但仍存不足，如抗-HCV檢測不能直接檢測HCV抗原水平，且抗-HCV在患者體內(nèi)出現(xiàn)較晚，不能及時檢測出其在體內(nèi)的水平，有可能耽誤患者病情，同時HCV RNA檢測也存在步驟較為復(fù)雜的缺點(diǎn)。因此，探索能夠更方便評估干擾素治療效果的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)具有重要價值。IL-21是主要的免疫調(diào)節(jié)劑之一，參與調(diào)節(jié)B細(xì)胞增殖，促進(jìn)骨髓前體細(xì)胞增殖、分化，增強(qiáng)免疫細(xì)胞的抗原特異性反應(yīng)，能夠通過影響多種免疫細(xì)胞來調(diào)節(jié)各種免疫應(yīng)答。而患者感染HCV后，機(jī)體內(nèi)會產(chǎn)生一系列免疫反應(yīng)以保護(hù)機(jī)體。由此推測體內(nèi)IL-21可能與體內(nèi)HCV水平有關(guān)，或可作為評估干擾素療效的指標(biāo)。

本研究結(jié)果顯示，經(jīng)6個月治療后，觀察組患者療效顯著高于對照組，且觀察組患者IL-21及肝功能指標(biāo)水平顯著低于對照組，提示IL-21及肝功能指標(biāo)水平會隨著治療降低。IL-21是一種主要由活化的CD4+T淋巴細(xì)胞、自然殺傷（NK）細(xì)胞等細(xì)胞分泌的多效細(xì)胞因子[7]，有研究表明，其在各種免疫反應(yīng)中起著重要調(diào)節(jié)作用，能夠增強(qiáng)免疫細(xì)胞的抗原特異性，在抗腫瘤及抗病毒治療方面有重要作用，還可以介導(dǎo)炎癥反應(yīng)[8-9]。IL-21在抗病毒治療中的主要作用機(jī)制是調(diào)節(jié)CD8+T淋巴細(xì)胞功能，從而減慢病毒感染速度[3]。同時，IL-21可顯著提高B淋巴細(xì)胞的增殖、分化和免疫球蛋白水平。另外，IL-21還可以刺激抗體生成，以達(dá)到抵抗病毒的目的。在接受干擾素治療后，干擾素刺激體內(nèi)細(xì)胞生成抗病毒蛋白，抑制HCV RNA表達(dá)水平，使體內(nèi)病毒數(shù)量降低，IL-21及肝功能指標(biāo)水平也隨之降低[10]。

本研究結(jié)果還顯示，經(jīng)6個月治療后，觀察組持續(xù)應(yīng)答患者IL-21及肝功能指標(biāo)水平顯著低于無應(yīng)答患者，提示IL-21及肝功能指標(biāo)可以作為慢性丙型肝炎療效的評估指標(biāo)。有研究表明，IL-21可以刺激NK細(xì)胞分泌促炎癥因子[11]。接受干擾素治療后，人體內(nèi)淋巴細(xì)胞等的細(xì)胞毒作用增強(qiáng)，能夠?qū)Σ《靖腥炯?xì)胞進(jìn)行清除，從而降低IL-21表達(dá)水平，減輕炎癥反應(yīng)。而ALT、AST、TBIL、DBIL及IBIL大量存在于肝臟中，當(dāng)肝臟細(xì)胞出現(xiàn)感染或壞死時，會刺激其大量釋放[12]。因此，接受干擾素治療后，療效顯著，肝細(xì)胞壞死數(shù)量大幅減少，ALT、AST、TBIL、DBIL及IBIL水平也顯著降低[13]。

綜上所述，慢性丙型肝炎患者經(jīng)干擾素治療后IL-21及肝功能指標(biāo)明顯降低，且持續(xù)應(yīng)答患者低于無應(yīng)答患者，因此，IL-21及肝功能指標(biāo)對慢性丙型肝炎患者臨床療效的評估具有重要意義，值得在臨床應(yīng)用。