多囊卵巢綜合征患者血清Omentin、CTRP9、Vaspin表達水平及臨床意義

王玉紅，張忠強，盧靜，張卉，王常燕

(1.邯鄲市中心醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)科，邯鄲 056000；2.邯鄲市第一醫(yī)院胸外科，邯鄲 056000)

多囊卵巢綜合征(PCOS)為育齡女性最常見的生殖內(nèi)分泌疾病，其在女性中的發(fā)病率較高，約為5%～10%[1]。其臨床特征主要表現(xiàn)為雄激素過高、持續(xù)無排卵或稀發(fā)排卵以及卵巢多囊樣改變等，并且PCOS一旦出現(xiàn)則終身存在，癥狀和體征可隨著治療逐漸減輕[2]。因此，尋找與PCOS發(fā)生發(fā)展相關(guān)的影響因子，分析其表達水平對PCOS的診斷以及臨床治療具有重要意義。網(wǎng)膜素(Omentin)是一種由313個氨基酸組成的新型脂肪細胞因子，在內(nèi)臟脂肪、間皮細胞、血管細胞、結(jié)腸、卵巢和血漿中均有表達，在維持機體代謝和胰島素敏感性方面發(fā)揮著重要作用[3]。腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白9(CTRP9)作為一種新型脂肪因子，具有促進脂質(zhì)代謝、提高胰島素敏感性、抗心血管疾病的作用，對于體內(nèi)糖代謝也有影響[4]。絲氨酸蛋白酶抑制劑(Vaspin)也是由脂肪組織合成的脂肪細胞因子，在動脈粥樣硬化的形成中具有調(diào)節(jié)內(nèi)分泌的作用[5]。上述研究表明這3種血清指標(biāo)與機體糖脂代謝及胰島素等激素水平相關(guān)。PCOS患者通常也會出現(xiàn)激素水平異常，導(dǎo)致內(nèi)分泌紊亂，進而出現(xiàn)高血脂、高血糖及胰島素抵抗等并發(fā)癥[6]。因此，本研究通過檢測PCOS患者血清中Omentin、CTRP9、Vaspin水平變化及臨床代謝指標(biāo)，并分析它們之間的相關(guān)性及診斷價值來探討其臨床意義，以期為PCOS患者的診斷和預(yù)后提供實驗依據(jù)。

材料及方法

一、研究對象

選取2020年1～12月于邯鄲市中心醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)科就診的62例PCOS患者(PCOS組)，另選擇同期在本院進行常規(guī)體檢的65例正常育齡女性作為對照組。

納入標(biāo)準(zhǔn)：依據(jù)中華醫(yī)學(xué)會發(fā)布的PCOS中國診療指南標(biāo)準(zhǔn)[7]確診為PCOS的患者；患者檢測前3個月內(nèi)未服用任何降脂、降糖及激素類藥物；無遲發(fā)型先天性腎上腺皮質(zhì)增生、柯興氏綜合征、低促性腺激素、卵巢或腎上腺分泌雄激素腫瘤、甲狀腺功能異常及高催乳素血癥等疾病。

排除標(biāo)準(zhǔn)：患有自身免疫及內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病者；合并有心、腎、肝等嚴(yán)重功能器官損傷者；因其它原因引起的月經(jīng)不規(guī)則及排卵異常者。

本研究經(jīng)本院倫理委員會審核批準(zhǔn)后進行，所有研究對象均知情并簽署同意書。

二、研究方法

1.主要試劑和儀器：Omentin、CTRP9和Vaspin酶聯(lián)免疫試劑盒(浙江藍森生物科)；雌二醇(E2)和睪酮(T)化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒(武漢默沙克生物)；AU2700 全自動生化分析儀(奧林巴斯，日本)；MK3酶標(biāo)儀(賽默飛世爾科技)；胰島素釋放檢測儀(深圳市威斯比生物)。

2.血液樣本收集及保存：于月經(jīng)周期的第2～5天清晨采所有研究對象的空腹外周靜脈血加入裝有 EDTA-Na2的抗凝管，在4℃、12 000 r/min條件下離心后取上清，置于-80℃保存?zhèn)溆谩?/p>

3.檢測/分析指標(biāo)：收集所有研究對象的年齡、身高、體重等一般資料；采用化學(xué)發(fā)光免疫分析法測定激素E2和T水平；采用全自動生化儀測定脂代謝相關(guān)指標(biāo)，包括總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)及低密度脂蛋白(LDL)水平；采用酶聯(lián)比色法測空腹血糖(FPG)水平；采用胰島素釋放實驗測定空腹胰島素(FINS)水平，并根據(jù)FPG和FINS計算胰島素抵抗指數(shù)HOMA-IR；采用酶聯(lián)免疫分析法(ELISA)測定血清Omentin、CTRP9、Vaspin水平，所有操作嚴(yán)格按照試劑盒步驟進行。

三、統(tǒng)計學(xué)分析

結(jié) 果

一、兩組研究對象臨床資料比較

本研究納入62例確診PCOS患者(PCOS組)，以及同期在本院進行常規(guī)體檢的65例正常育齡女性(對照組)。與對照組比較，PCOS患者BMI以及血清T、FPG、FINS水平、HOMA-IR、TC及TG水平等指標(biāo)值均顯著高于對照組(P<0.05)(表1)，說明PCOS患者可能會同時出現(xiàn)高雄激素、高血糖及高血脂等并發(fā)癥。

表1 兩組研究對象臨床相關(guān)資料比較(-±s)

二、兩組研究對象血清Omentin、CTRP9、Vaspin水平比較

ELISA試劑盒檢測血清中Omentin、CTRP9、Vaspin水平，結(jié)果顯示，與對照組比較，PCOS組Omentin、CTRP9水平顯著下降(P<0.05)，Vaspin水平顯著升高(P<0.05)(表2)。

三、血清Omentin、CTRP9、Vaspin表達水平與臨床指標(biāo)的相關(guān)性

采用Pearson法進行相關(guān)性分析，結(jié)果顯示，PCOS患者血清Omentin表達水平與BMI、T、FPG、HOMA-IR、TG呈負相關(guān)(P<0.05)；血清CTRP9表達水平與BMI、T、FPG、FINS、HOMA-IR、TC呈負相關(guān)(P<0.05)；血清Vaspin表達水平與BMI、T、FINS、HOMA-IR、TC及TG呈正相關(guān)(P<0.05)(表3)。

表2 兩組研究對象血清Omentin、CTRP9、Vaspin表達水平比較(-±s)

四、Omentin、CTRP9、Vaspin表達水平對PCOS診斷價值

ROC曲線結(jié)果顯示，單獨檢測時，血清Omentin水平對應(yīng)AUC為0.715，CTRP9水平對應(yīng)AUC為0.805，Vaspin水平對應(yīng)AUC為0.832，而三項聯(lián)合檢測時AUC為0.911，比單獨檢測具有更高的診斷價值，結(jié)果均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)(圖1，表4)。

表3 血清Omentin、CTRP9、Vaspin表達水平與臨床指標(biāo)的相關(guān)性分析

圖1 血清Omentin、CTRP9、Vaspin單獨檢測和聯(lián)合檢測診斷PCOS的ROC曲線

表4 血清Omentin、CTRP9、Vaspin單獨檢測和聯(lián)合檢測ROC曲線參數(shù)比較

討 論

隨著醫(yī)學(xué)科技的不斷進步，我們認識到PCOS并非一種特定的疾病，而是一類病因復(fù)雜、表現(xiàn)極不均一的臨床綜合征[8]。目前關(guān)于PCOS的發(fā)病機理仍未闡明，相關(guān)研究者指出PCOS的發(fā)生是由于某些遺傳因素與機體自身肥胖、體內(nèi)脂代謝、糖代謝水平異常以及胰島素抵抗等協(xié)同作用的結(jié)果[9]。PCOS的發(fā)生發(fā)展與脂肪因子的調(diào)控也密切相關(guān)，脂肪因子作為脂肪細胞分泌的主要活性因子，可以通過調(diào)節(jié)新陳代謝來維持機體內(nèi)環(huán)境的平衡，如果這種代謝紊亂則會導(dǎo)致內(nèi)分泌環(huán)境失調(diào)，進而對PCOS的發(fā)生起到催化作用[10]。因此，探究PCOS患者體內(nèi)脂肪因子與肥胖、脂代謝指標(biāo)、糖代謝指標(biāo)和胰島素抵抗之間的相關(guān)性，能對后期PCOS的預(yù)防和治療提供一定的科學(xué)依據(jù)。

Omentin是由脂肪組織分泌的一種主要的內(nèi)臟(網(wǎng)膜)脂肪因子，廣泛參與調(diào)節(jié)和維持各種生理病理過程，包括胰島素敏感性、能量消耗、葡萄糖穩(wěn)態(tài)、脂質(zhì)代謝、炎癥活性、體內(nèi)平衡、血管生成等，涉及到繁殖和骨代謝、內(nèi)分泌生殖系統(tǒng)軸的所有功能，已經(jīng)成為近年來研究的熱點[11-12]。Elsaid等[13]研究了2型糖尿病肥胖女性的血清Omentin-1水平，并評估其與血糖控制，胰島素抵抗和代謝參數(shù)的關(guān)系，結(jié)果表明，與健康受試者相比，肥胖2型糖尿病女性的血清Omentin-1水平明顯偏低，并且其水平與肥胖、胰島素抵抗和收縮壓呈明顯負相關(guān)，但與血糖控制和空腹血脂無顯著相關(guān)性。Zengi等[14]通過分析Omentin-1與葡萄糖、胰島素、脂質(zhì)分布、甲狀腺成分和代謝指標(biāo)之間的相關(guān)性，來評估Omentin-1水平對兒童肥胖的影響，結(jié)果顯示肥胖兒童Omentin-1水平明顯低于對照組，且Omentin-1水平與空腹血糖、甘油三酸酯、總膽固醇、無血清甲狀腺素、胰島素抵抗、體重、腰圍和BMI均呈負相關(guān)，可用作兒童和青少年的代謝生物標(biāo)志物。

CTRP9是脂聯(lián)素的旁系同源物，對脂質(zhì)和葡萄糖代謝具有已知的有利作用，在調(diào)節(jié)內(nèi)皮功能時發(fā)揮重要作用[15]。Moradi等[16]研究2型糖尿病和冠心病患者的血清CTRP9水平與粘附分子之間的關(guān)系，結(jié)果發(fā)現(xiàn)血清CTRP9水平升高可增加患糖尿病和冠心病的風(fēng)險，并且注意到糖尿病和冠心病患者血清CTRP9水平與黏附分子以及血清TNF-α水平相關(guān)，在糖尿病受試者中CTRP9循環(huán)水平還與HOMA-IR顯著相關(guān)，提示CTRP9循環(huán)水平對胰島素抵抗、炎性環(huán)境和內(nèi)皮功能障礙有代償性反應(yīng)。Jiang等[17]探討了CTRP9和正五聚蛋白-3(PTX-3)在急性冠狀動脈綜合征(ACS)中的診斷價值和預(yù)后意義，結(jié)果表明ACS患者血清中CTRP9低表達、PTX-3高表達，且CTRP9與心肌肌鈣蛋白Ⅰ、肌酸激酶-MB和高敏C反應(yīng)蛋白呈負相關(guān)，而PTX-3與它們呈正相關(guān)，兩者聯(lián)合檢測對ACS患者的診斷和預(yù)后具有重要價值。

Vaspin是一種新的與肥胖和胰島素敏感性受損相關(guān)的脂肪細胞因子。Yang等[18]為了評估了老年患者(>60歲)的血清Vaspin濃度與BMI的相關(guān)性，選取了227名老年患者分為正常組和肥胖組，另選150名糖尿病患者分為正常體重糖尿病組和肥胖糖尿病組，通過酶聯(lián)免疫吸附測定法測量所有研究者血清Vaspin濃度，結(jié)果表明，與健康人比較，糖尿病患者血清Vaspin濃度顯著升高，且糖尿病患者中肥胖組Vaspin濃度顯著高于正常體重組；此外，多元回歸分析顯示，Vaspin是影響所有參與者BMI的獨立因素，可能在老年人的肥胖和胰島素抵抗中起重要的補償作用。Tanriverdi等[19]研究發(fā)現(xiàn)由Vaspin引發(fā)的血管炎癥通過抑制巨噬細胞泡沫細胞形成以及血管平滑肌細胞遷移和增殖來抑制動脈粥樣硬化形成，并且Vaspin還通過增加膠原蛋白含量和降低斑塊內(nèi)巨噬細胞與血管平滑肌細胞的比例來促進斑塊穩(wěn)定，這說明Vaspin濃度與冠狀動脈疾病的嚴(yán)重程度相關(guān)。

基于上述文獻報道，本研究探討了PCOS患者血清Omentin、CTRP9、Vaspin水平與臨床指標(biāo)的相關(guān)性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)PCOS患者Omentin、CTRP9水平顯著下降，Vaspin水平顯著升高，并且與肥胖、激素水平、血糖血脂及胰島素抵抗等有關(guān)，提示PCOS患者可能會同時伴有高雄激素、高血糖、高血脂等并發(fā)癥，且這3種指標(biāo)有望成為診斷PCOS的生物標(biāo)志物；同時本研究還采用ROC曲線直觀、簡單地比較了Omentin、CTRP9、Vaspin水平單獨和聯(lián)合檢測對PCOS的診斷價值，發(fā)現(xiàn)聯(lián)合檢測比單獨檢測具有更高的準(zhǔn)確度。但本研究的樣本數(shù)量較少，后期可以通過納入更多樣本量來進一步驗證，為后期PCOS的診斷和預(yù)后提供更有力的參考依據(jù)。