血小板/淋巴細胞比值聯合血清降鈣素原及淀粉樣蛋白A檢測在新生兒壞死性小腸結腸炎中的診斷價值

錢玉萍，劉光輝，趙鈺瑋，張 健

安徽省兒童醫院新生兒科，安徽合肥 230022

新生兒壞死性小腸結腸炎(NEC)是新生兒常發的一種胃腸道急癥。目前，對于該病的發病機制尚不清楚，有研究指出該病可能與缺氧、腸內菌群失調等有一定的關系，常發病于出生兩周內的新生兒[1]。其臨床表現主要為拒食、腹瀉、血便、嘔吐等，近年來NEC的發病率逐年上升，病死率高達50%，嚴重威脅新生兒的健康及生命，早期診斷及制訂治療方案顯得尤為重要[2]。目前，臨床診斷NEC常用的實驗室指標包括血常規、C反應蛋白等，但是這些指標缺乏特異性，而病原學檢查又由于陽性率低、耗時長等缺點，早期診斷價值不高。因此，有學者提出采用炎癥標志物聯合檢測的方法以提高臨床診斷價值[3]。血小板/淋巴細胞比值(PLR)是近幾年提出的能夠反映體內炎癥狀況的敏感指標，有研究稱PLR與感染、腫瘤等疾病有密切的關系[4]。降鈣素原(PCT)是反映機體炎癥狀況的降鈣素前肽物質，機體感染細菌2～3 h異常上升，是臨床應用較為方便的敏感指標[5]。血清淀粉樣蛋白A(SAA)作為一種急性時相反應蛋白，在身體發生炎癥或者處于感染急性期時會急速升高，恢復期時又會迅速下降，在兒童感染性疾病中有較高的診斷價值，但對NEC是否有預測價值尚不清楚?；诖?，本研究選取2018年6月至2020年12月在本院新生兒科出生的90例NEC患兒為研究對象，探討PLR聯合PCT、SAA檢測在NEC診斷中的應用價值。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年6月至2020年12月在本院新生兒科就診的90例NEC患兒為觀察組，其中男49例，女41例；日齡1～20 d，平均(6.56±3.48)d。按照Bell分期標準[6]進行分期：Ⅰ期患兒25例，Ⅱ期患兒48例，Ⅲ期患兒17例。(1)納入標準：①住院時間大于24 h；②納入前未接受過任何形式的治療；③積極配合治療且資料完整；④所有患兒符合《實用新生兒學》[7]中的NEC診斷標準。(2)排除標準：①存在消化道畸形等先天性畸形；②合并臟器衰竭；③中途放棄治療。同期選擇健康新生兒80例為對照組，其中男49例，女31例，日齡1～21 d，平均(6.73±3.52)d。本研究所有新生兒家長了解本研究并簽署知情同意書，本研究經本院醫學倫理委員會批準。

1.2儀器與試劑 M16RS低溫高速離心機購自上海邁皋科學儀器有限公司；—80 ℃立式超低溫冰箱購自賽默飛世爾科技(中國)有限公司；PCT酶聯免疫吸附試驗(ELISA)試劑盒、SAA ELISA試劑盒均購自上海酶聯生物科技有限公司；酶標儀購自上海眾磊生物技術有限公司；DxH800血細胞分析儀購自貝克曼庫爾特商貿(中國)有限公司。

1.3方法

1.3.1標本采集 兩組新生兒均于入組后空腹采集靜脈血標本3 mL，3 000 r/min高速離心10 min，分離血清于EP管中，并記錄編號和日期，于—80 ℃冰箱中保存備用。

1.3.2臨床資料收集 收集所有研究對象臨床資料，包括：(1)產前母親是否使用過糖皮質激素、感染肺炎、存在感染性休克；生產方式、產時有無窒息；新生兒的性別、體質量；出生后是否患有敗血癥、服用益生菌。(2)采用ELISA檢測新生兒血清PCT、SAA水平，其試驗步驟嚴格遵循試劑盒說明書。使用DxH800血細胞分析儀進行血常規分析，包括血小板計數(PLT)、淋巴細胞計數(L)，計算PLR。

2 結 果

2.1兩組新生兒基線資料比較 兩組新生兒體質量、產時窒息發生情況、產前使用糖皮質激素比例、敗血癥發生情況、服用益生菌比例、感染性休克發生情況等基線資料比較，差異有統計學意義(P<0.05)，而兩組新生兒性別、日齡、分娩方式、感染肺炎發生情況等資料比較，差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

2.2兩組新生兒PLR、PCT及SAA水平比較 觀察組PLR、PCT、SAA水平較對照組明顯升高，差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表1 兩組新生兒基線資料比較[n(%)]

組別n產前使用糖皮質激素是否敗血癥有無分娩方式自然分娩剖宮產觀察組9031(34.44)59(65.56)49(54.44)41(45.56)49(54.44)41(45.56)對照組8060(75.00)20(25.00)14(17.50)66(82.50)39(48.75)41(51.25)χ226.39723.2250.346P<0.001<0.0010.557

組別n服用益生菌是否感染性休克是否感染肺炎有無觀察組9040(44.44)50(55.56)50(55.56)40(44.44)35(38.89)55(61.11)對照組8056(70.00)24(30.00)6(7.50)74(92.50)40(50.00)40(50.00)χ210.23742.1281.694P0.001<0.0010.193

表2 兩組新生兒PLR、PCT及SAA水平比較

2.3不同分期NEC患兒PLR、PCT及SAA水平比較 不同分期NEC患兒PLR、PCT、SAA水平比較，差異有統計學意義(P<0.05)。Ⅲ期患兒PLR高于Ⅱ期患兒，差異有統計學意義(q=5.697，P<0.05)；Ⅱ期患兒PLR、PCT、SAA水平均高于Ⅰ期患兒，差異有統計學意義(q=11.292、0.029、0.025，P<0.05)；Ⅲ期患兒PLR、PCT、SAA水平均高于Ⅰ期患兒，差異有統計學意義(q=10.741、5.022、3.597，P<0.05)。見表3。

2.4ROC曲線分析PLR、PCT、SAA及3項指標聯合檢測對NEC的診斷價值 ROC曲線分析結果顯示，PLR、PCT、SAA 3項指標聯合檢測診斷NEC的曲線下面積(AUC)為0.856，靈敏度為84.3%，特異度為87.5%，其AUC明顯大于3項指標單獨檢測的AUC(P<0.05)。見表4。

表3 不同分期NEC患兒PLR、PCT及SAA水平比較

表4 ROC曲線分析PLR、PCT、SAA及3項指標聯合檢測對NEC的診斷價值

2.5多因素Logistic回歸分析影響NEC的危險因素 將2.1基線資料中體質量、產時窒息、產前使用糖皮質激素、敗血癥、服用益生菌、感染性休克、PLR、PCT、SAA作為因變量進行多因素Logistic回歸分析，結果顯示敗血癥及PLR、PCT、SAA水平升高是新生兒發生NEC的獨立危險因素(P<0.05)，服用益生菌是保護因素(P<0.05)。見表5。

表5 多因素Logistic回歸分析NEC的危險因素

3 討 論

NEC是常發于早產兒且病死率較高的消化道疾病，該疾病的發生是由多方面的因素共同造成的。嚴重的NEC可引發一系列的并發癥，如腸穿孔、器官衰竭等，嚴重者甚至可導致患兒死亡[8]。但該病的早期癥狀并不典型，常與急性腸炎等腸道疾病混淆。因此，研究能早期準確診斷NEC的敏感標志物對該病的預防和治療有十分重要的意義。

PLR是一種反映機體炎癥的指標，當體內PLR升高，預示著身體免疫功能遭到破壞，進而引起炎癥反應，促進腸道疾病的發生[9]。勾熙等[10]研究發現，潰瘍性結腸炎臨床活動組PLR明顯高于潰瘍性結腸炎臨床緩解組，且PLR與患者病情嚴重程度呈正相關。程迎迎等[11]指出，PLR在潰瘍性結腸炎患者外周血中明顯升高，PLR診斷潰瘍性結腸炎的效能優于常用指標PLT。PCT是無活性降鈣素前肽物質，在體內可以預測細菌感染狀況，其水平與感染程度呈正相關，對炎癥性疾病的判斷和預防有十分重要的作用[12]。尹琳琳等[13]的研究發現，NEC早產兒血清中PCT水平明顯高于健康早產兒，且提示血清中PCT水平預測NEC有一定的參考價值。李菲等[14]研究表明，NEC新生兒血清PCT水平明顯高于健康新生兒，且Ⅲ期患兒明顯高于Ⅱ期患兒，Ⅱ期患兒明顯高于Ⅰ期患兒。SAA是多基因編碼的多形態蛋白家族成員，在早期肝臟損傷或者感染時，由肝細胞分泌，屬于急性時相反應蛋白，在感染性疾病中有一定的診斷價值。顏靈靜等[15]研究發現，NEC患兒血清SAA水平明顯高于健康對照者，且與患兒嚴重程度有關，劉欣等[16]研究結果也符合這一規律。

本研究中，觀察組PLR、PCT、SAA水平較對照組均明顯升高，且Ⅲ期患兒PLR高于Ⅱ期患兒，Ⅱ、Ⅲ期患兒PLR、PCT、SAA水平高于Ⅰ期患兒，提示PLR、PCT、SAA參與了該病的發生、發展，3項指標可反映該病的嚴重程度。NEC的發病是由多種因素引起的，BORTOLIN等[17]研究表明，產前使用糖皮質激素可以促進腸黏膜發育成熟，從而減輕腸壞死程度。鄒耀明等[18]研究表明，產時窒息、敗血癥是NEC發生的危險因素，而發病前口服益生菌是其保護因素，可減少NEC的發病風險。而本研究多因素Logistic回歸分析結果顯示，敗血癥及PLR、PCT、SAA水平升高是新生兒發生NEC的獨立危險因素(P<0.05)，服用益生菌是保護因素(P<0.05)。這提示新生兒服用益生菌可減少NEC的發病率，且應嚴格監測有以上危險因素新生兒的相關指標，并采取一定干預措施。敗血癥是病原菌進入血液而引起的全身性感染疾病，而新生兒腸道功能較弱，很容易發生腸道感染，從而造成腸道壞死。益生菌可以改善腸道正常菌群，增強殺菌力，改善腸道黏膜功能。ROC曲線分析結果顯示，PLR、PCT、SAA 3項指標聯合檢測診斷NEC的AUC為0.856，靈敏度為84.3%，特異度為87.5%，其AUC明顯大于3項指標單獨檢測的AUC，提示3項指標聯合檢測對早期NEC具有更高的診斷價值，有被廣泛應用于臨床的前景。

綜上所述，NEC患兒血清PLR、PCT及SAA水平上升，3項指標聯合檢測對NEC的診斷效能優于單獨檢測。