C-C 基序趨化因子樣受體2、胰島素樣生長因子2在前列腺癌中的表達及與患者臨床特征和預后的關系

羅斌，王博，陳立華，周恒毅

洛陽市第一人民醫院泌尿外科，河南 洛陽 471000

前列腺癌是發生在前列腺的上皮性惡性腫瘤，臨床主要表現為腰痛、尿急、尿頻、尿痛、排尿困難等癥狀。據統計，前列腺癌已成為影響男性生命健康的惡性腫瘤之一，且該病的發病率隨著患者年齡增長而逐漸上升。近年來前列腺癌發病率和病死率均逐年上升[1]。臨床主要采用前列腺癌根治術或放療治療前列腺癌，療效較佳，早期前列腺癌可得到治愈，但晚期前列腺癌無法治愈，多以保守治療為主，以延長患者的生存期，改善生活質量[2]。早期前列腺癌進展緩慢，但早期不易發現導致無法及時治療，確診時多已進展至晚期，失去了最佳的治療時機。因此，臨床亟需找到一種有效的診斷前列腺癌的方法[3]。本研究探討C-C基序趨化因子樣受體2（C-C motif chemokine receptor like 2，CCRL2）、胰島素樣生長因子2（insulin like growth factor 2，IGF2）在前列腺癌中的表達及與患者臨床特征及預后的關系，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年3月至2020年6月洛陽市第一人民醫院收治的前列腺癌患者。納入標準：①符合《中國前列腺癌早期診斷專家共識》[4]中前列腺癌的診斷標準，經病理學檢查確診；②臨床資料完整；③既往均未接受過內分泌治療或放療。排除標準：①合并其他惡性腫瘤；②合并精神障礙，無法配合研究；③合并嚴重自身免疫性疾病及心功能不全。依據納入和排除標準，本研究共納入101例前列腺癌患者，年齡53～83歲，平均（67.51±8.41）；Gleason評分評估分化程度：中高分化43例，低分化58例；Whitmore-Jewett法進行臨床分期：A～B期66例，C～D期35例。本研究經醫院倫理委員會批準通過，所有患者均知情同意并簽署知情同意書。

1.2 免疫組化法檢測CCRL2、IGF2的表達情況

取101例前列腺癌患者的前列腺癌組織及距腫瘤組織3 cm處的癌旁組織，石蠟包埋和切片處理待檢，檢測前于65℃火中放置標本焙燒60 min，使用二甲苯、乙醇進行脫蠟、脫水處理后，將標本浸泡于3%過氧化氫中20 min，封閉其內源性過氧化物酶活性。高壓枸櫞酸鹽抗原修復，溫水清洗后使用磷酸鹽緩沖液（phosphate buffered saline，PBS）清洗3次，每次5 min，同時在其中滴加10%血清以阻斷非特異性結合，37℃孵育箱10 min。添加一抗羊抗人IGF2多克隆抗體、一抗兔抗人CCRL2多克隆抗體（稀釋濃度為1∶100），4℃孵育過夜，PBS再次清洗，滴加生物素二抗兔抗羊免疫球蛋白G及兔抗人CCRL2多克隆抗體，37℃孵育10 min，PBS清洗3次后，滴加過氧化物酶標記的鏈霉素卵白素工作液孵育10 min，使用二氨基聯苯胺進行熒光顯色，蘇木素復染，脫水、干燥后使用中性樹脂封片，用PBS代替一抗作為陰性對照。

結果判定：觀察細胞的染色情況，細胞質出現棕黃色或棕褐色，或其他染色明顯強于背景色為陽性細胞，選取5個不同視野進行全面觀察，每個視野中細胞應不低于200個，觀察完成后計算每個視野中陽性細胞所占比例。陽性細胞所占比例﹤5%為陰性，陽性細胞所占比例為5%～50%為弱陽性，陽性細胞所占比例﹥50%為強陽性，其中弱陽性、強陽性均判定為陽性。

1.3 隨訪

采用門診復查、微信或電話的方法對所有患者進行為期1年的隨訪，隨訪時間截至2021年6月，記錄患者的復發情況。

1.4 統計學方法

采用SPSS 22.0軟件對所有數據進行統計分析，計量資料以均數±標準差（±s）表示，組間比較采用t檢驗；計數資料以例數和率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗；前列腺癌患者預后復發的影響因素采用多元Logistic回歸分析；以P﹤0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 CCRL2、IGF2表達情況的比較

前列腺癌組織中CCRL2、IGF2的陽性表達率均明顯高于癌旁組織，差異均有統計學意義（P﹤0.01）。（表1）

表1 前列腺癌組織和癌旁組織中CCRL2、IGF2表達情況的比較[n（%）]

2.2 不同臨床特征前列腺癌患者前列腺癌組織中CCRL2、IGF2表達情況的比較

不同年齡前列腺癌患者前列腺癌組織中CCRL2、IGF2陽性表達率比較，差異均無統計學意義（P﹥0.05）；分化程度為低分化、臨床分期為C～D期、遠處轉移前列腺癌患者前列腺癌組織中CCRL2、IGF2陽性表達率分別高于分化程度為中高分化、臨床分期為A～B期、無遠處轉移患者，差異均有統計學意義（P﹤0.05）。（表2）

表2 不同臨床特征前列腺癌患者前列腺癌組織中CCRL2、IGF2表達情況的比較（n=101）

2.3 前列腺癌患者預后復發的影響因素分析

單因素分析結果顯示，年齡可能與前列腺癌患者的復發情況無關（P﹥0.05）；分化程度、臨床分期、遠處轉移情況、CCRL2表達情況和IGF2表達情況均可能與前列腺癌患者的復發情況有關（P﹤0.05）。多因素Logistic回歸模型分析結果顯示，分化程度為低分化、臨床分期為C～D期、遠處轉移、CCRL2陽性表達和IGF2陽性表達均為前列腺癌患者預后復發的獨立危險因素（P﹤0.01）。（表3）

表3 前列腺癌患者預后復發影響因素的單因素和多因素分析

3 討論

前列腺癌患者早期無明顯癥狀，確診時多已進展至晚期且發生了遠處轉移，臨床治療難度較大，患者預后不良[5-8]。因此，尋找與前列腺癌發生發展有關的治療靶點對早期前列腺癌的治療有積極意義[9-11]。

本研究結果顯示，前列腺癌組織中CCRL2、IGF2的陽性表達率均明顯高于癌旁組織，分化程度為低分化、臨床分期為C～D期、遠處轉移前列腺癌患者前列腺癌組織中CCRL2、IGF2的陽性表達率分別高于分化程度為中高分化、臨床分期為A～B期、無遠處轉移患者，與既往研究結果相似[12-13]。表明CCRL2和IGF2參與了前列腺癌的發生發展及侵襲過程，表明CCRL2和IGF2的表達與患者臨床特征有關。這是因為IGF是一種多肽類蛋白質，具有胰島素樣作用和促進生長等重要的生理作用，由肝臟、腎等器官或組織合成，存在于激素依賴的器官中。IGF2屬于IGF家族成員，同樣具有促胚胎細胞生長的作用，可促進細胞分裂形成胚胎，在生理條件下對胚胎的正常生長發育有重要作用。同時，IGF2作為自分泌生長因子，在病理條件下的過表達可促進細胞惡性增殖和轉化。有研究表明，IGF2在前列腺癌細胞中過表達[14]。有研究顯示，多種趨化因子誘餌受體[如Duffy抗原趨化因子受體（Dufffy antigen receptor for chemokine，DARC）、D6和ChemoCentryx趨化因子受體（ChemoCentryx chemokine receptor，CCX-CKR）]均可在前列腺癌細胞中表達，并在腫瘤細胞生長和轉移中發揮重要作用[15]。CCRL2的結構與其他誘餌受體相似，因此其具有中斷配體受體結合后信號轉導的作用。CCRL2的配體包括CCL2（MCP-1）和CCL5（RANTES）等，在腫瘤新生血管生成、腫瘤細胞遠處轉移方面發揮重要作用。CCRL2是一種跨膜G蛋白偶聯受體，具有將樹突狀細胞運輸到外周淋巴結的關鍵作用，并廣泛分布于許多組織和器官中，在腫瘤發生發展中發揮重要作用。研究表明，CCRL2陽性表達明顯促進了腫瘤的復發和侵襲，同時，分化程度為低分化、臨床分期為C～D期、遠處轉移、CCRL2陽性表達和IGF2陽性表達均為前列腺癌患者預后復發的獨立危險因素。

綜上所述，CCRL2、IGF2在前列腺癌組織中陽性表達率較高，且分化程度為低分化、臨床分期為C～D期、遠處轉移、CCRL2陽性表達和IGF2陽性表達均為前列腺癌患者預后復發的獨立危險因素。