吉色曲伍,李英林,李 維,惹及拉呷,沙馬子哈,周可磊,徐文福,杜 寧
(1.四川省涼山州動物疫病預防控制中心,四川 西昌 615000;2.四川省美姑縣農業農村局,四川 美姑616450)
縣級獸醫實驗室承擔著轄區內動物疫病診斷、監測和動物流行病學調查工作,為動物疫情風險預警評估提供有力的科學依據和決策依據,所以實驗室檢測數據的準確性至關重要[1]。為準確評估涼山州縣級獸醫實驗室的檢測能力和水平,科學指導各縣(市)提升實驗室能力建設,涼山州動物疫病預防控制中心組織開展了縣級獸醫實驗室檢測能力比對工作。全州17 縣(市)參加了此次比對,采用RT-PCR、ELISA、虎紅平板凝集試驗等3 種方法對255 份盲樣進行非洲豬瘟、豬瘟和布魯氏菌病檢測。
1.1 比對項目 比對項目設置為3 個,1 個病原學檢測項目和2個血清學檢測項目。非洲豬瘟病毒核酸檢測采用熒光RT-PCR 方法,豬瘟病毒抗體檢測采用ELISA 方法,布魯氏菌病抗體檢測采用虎紅平板凝集試驗方法。
1.2 比對方法、標準等 2021 年涼山州縣級獸醫實驗室比對方法、標準及結果判定見表1。

表1 比對項目、方法、標準及結果判定
1.3 比對樣品 每個比對項目設5 份盲樣,由3份陰性、2 份陽性組成。樣品由相應的試劑公司提供,經涼山州動物疫病預防控制中心驗證、編號和封裝后,由參與比對的17個縣(市)獸醫實驗室派專人在指定時間統一領取,并要求在24 h內送達參與比對的實驗室。
1.4 比對試劑 參與比對的17 個縣(市)獸醫實驗室采用的試劑均來自同一廠家、同一批次,由涼山州動物疫病預防控制中心統一發放(見表2)。

表2 比對試劑名稱、廠家及批號
2.1 整體情況 全州17縣(市)均在規定時間內上報了檢測結果。對本次比對試驗結果進行統計,結果顯示:共檢測盲樣255 份,結果準確的有246份,平均準確率為96.47%。其中,非洲豬瘟病毒核酸檢測試驗共檢測85 份,結果準確的有80份,準確率為94.12%,13 個縣(市)檢測結果完全準確,占比76.47%;豬瘟抗體檢測試驗共檢測85份,結果準確的有81 份,準確率為95.29%,13 個縣(市)檢測結果完全準確,占比76.47%;布病抗體檢測試驗共計檢測85份,結果準確的有85份,準確率為100.00%,17 個縣(市)檢測結果完全準確(見表3)。

表3 2021年涼山州縣級獸醫實驗室檢測能力比對結果
2.2 不同縣(市)檢測能力比對結果 3 種比對試驗完全準確的縣(市)有12個,占70.59%,出現1種比對試驗不準確的縣(市)有2個,出現2種比對試驗不準確的縣(市)有3個(見表4)。

表4 2021年涼山州不同縣(市)獸醫實驗室檢測能力比對結果
3.1 結果分析 2021 年涼山州比對結果整體準確率達到95%以上,說明獸醫實驗室檢測能力整體處于較高的水平,能滿足非洲豬瘟、豬瘟等重大動物疫病及布魯氏菌病等人畜共患病檢測的需要。本次比對試驗采用的3種方法都是獸醫實驗室常見的病原學和血清學檢測方法。虎紅平板凝集試驗方法的準確率(布魯氏菌病抗體檢測100%)明顯高于熒光RT-PCR 方法和ELISA方法的準確率(非洲豬瘟病毒核酸檢測94.12%、豬瘟病毒抗體檢測95.29%),這是因為虎紅平板凝集試驗的操作方法簡單,且2021 年涼山州動物疫病預防控制中心組織了數次布魯氏菌病專項檢測技術培訓。
3.2 存在的問題
3.2.1 實驗室閑置 個別縣(市)對獸醫實驗室重視不夠,動物疫病監測經費無法落實,造成實驗室閑置,沒有發揮應有的作用。
3.2.2 實驗室無專職技術人員 大部分縣(市)實驗室由于編制問題,無專職技術人員,且存在一人多崗、調動和借用頻繁等情況,造成檢測技術參差不齊,檢測結果不準確等。
3.2.3 實驗室人員的操作不熟練 熒光RT-PCR方法和ELISA 方法是獸醫實驗室常用的病原學和血清學檢測方法,但由于個別縣(市)部分實驗室檢測技術人員對實驗儀器設備及操作步驟不熟練,尤其是對移液器使用不規范等,會導致檢測結果不準確[2]。
3.2.4 實驗室儀器設備準確性差 熒光定量RT-PCR 儀和酶標儀是獸醫實驗室常用設備,個別縣(市)實驗室由于長時間沒有啟用儀器設備,也沒有按期進行校正,也會造成檢測結果不準確。
3.2.5 實驗室管理不規范 個別縣(市)由于事業單位機構改革、人員變動、實驗室整體裝修升級改造等因素,造成實驗室管理不規范,從而影響檢測結果的準確性。