78%乙·撲·滴辛酯乳油高效液相色譜分析方法研究

鄭 楊，李 巖

(黑龍江省植檢植保站，黑龍江 哈爾濱 150090)

1 前言

乙草胺、撲草凈是土壤封閉處理除草劑，可防除玉米、大豆等旱田一年生禾本科和闊葉雜草[1，2]。2，4-滴異辛酯是選擇性苗后莖葉處理觸殺型除草劑，可防治一年生或多年生闊葉雜草，是2，4-滴丁酯的替代產品[3]，與2，4-滴丁酯相比，具有揮發性小，不易漂移的優點，藥害發生率低，相對更安全，在生產上有更大的推廣價值[4]。

78%乙·撲·滴辛酯乳油是黑龍江梅亞種業有限公司的三元復配除草劑，封殺相結合，滅草率大大提高，速效性明顯加強，可防治玉米田中絕大部分的雜草，具有殺草譜更廣、用藥量低的優點。

目前國內對乙草胺、撲草凈和2，4-滴異辛酯的復配制劑分析方法尚未見報道。本文采用高效液相色譜法對乙草胺、撲草凈和2，4-滴異辛酯進行定性和定量分析。該方法操作快速、簡便、準確，分離效果好，準確度和精密度均能達到定量分析的要求，適用于農藥產品含量分析。

2 試驗部分

2.1 試劑和溶液 乙腈：色譜純；水：超純水(電阻率18.2 MΩ·cm，25℃)；冰乙酸：分析純；撲草凈：99.6%，乙草胺：99.1%，伯酰胺：99.0%；2，4-滴異辛酯：98.5%；試樣：78%乙·撲·滴辛酯乳油。

2.2 儀器 高效液相色譜儀：Agilent 1260，具有二級管陣列檢測器和自動進樣器，色譜工作站；色譜柱：250mm×4.6mm(i.d)不銹鋼柱，內裝Zorbax SB-C18、5μm填充物；過濾器：濾膜孔徑約0.45um。

2.3 液相色譜操作條件 流動相：乙腈：0.3%乙酸水溶液=70：30(V/V)(0～8min)，85：15(V/V)(8～23min)；流量：1.0mL/min；柱溫：30℃；檢測波長：236nm；進樣體積：5.0μL；保留時間：伯酰胺約3.6min，撲草凈約4.8min，乙草胺約6.7min，2，4-滴異辛酯約18.8min。

上述液相色譜操作條件，系典型操作參數，可根據不同儀器特點，對給定的操作參數作適當調整，以期獲得最佳效果。非分析物空白、標樣和樣品高效液相色譜圖(圖1、圖2、圖3)。

圖1 非分析物空白高效液相色譜圖

圖2 乙草胺·撲草凈·2，4-滴異辛酯標樣高效液相色譜圖

圖3 78%乙·撲·滴辛酯乳油高效液相色譜圖

2.4 測定步驟

2.4.1 標樣溶液的配制 準確稱取伯酰胺標樣10.5mg(精確至0.2mg)，撲草凈標樣21.4mg(精確至0.2mg)，分別置于100mL容量瓶中，加入乙腈溶解，超聲10min，恢復至室溫后用乙腈稀釋至刻度，搖勻備用。稱取乙草胺標樣60.7mg(精確至0.2mg)和2，4-滴異辛酯標樣24.9mg(精確至0.2mg)，置于100mL容量瓶中，用移液管分別加入上述伯酰胺、撲草凈標準溶液10mL，加入乙腈溶解，超聲10min，恢復至室溫后用乙腈稀釋至刻度，搖勻，過濾備用。

2.4.2 試樣溶液的配制 稱取試樣約104.4mg(精確至0.2mg)，置于100mL容量瓶中，加入乙腈溶解，超聲10min，恢復至室溫后用乙腈稀釋至刻度，搖勻，過濾備用。

2.4.3 測定 在上述操作條件下，待儀器基線穩定后，連續注入數針標樣溶液，待各針相對響應值變化≤1.5%時，按照標樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標樣溶液的順序進樣測定。

2.4.4 計算 將測得的2針試樣溶液及試樣溶液前后2針標樣溶液中(伯酰胺、撲草凈、乙草胺、2，4-滴異辛酯)的峰面積值分別進行平均，按下式計算其質量分數：

(1)

式中：

A1—標樣溶液中(伯酰胺、撲草凈、乙草胺、2，4-滴異辛酯)峰面積的平均值；

A2—試樣溶液中(伯酰胺、撲草凈、乙草胺、2，4-滴異辛酯)峰面積的平均值；

m1—標樣的質量，g；

m2—試樣的質量，g；

P —標樣中(伯酰胺、撲草凈、乙草胺、2，4-滴異辛酯)的質量分數，%；

X—標樣的稀釋倍數(乙草胺和2，4-滴異辛酯為1，撲草凈和伯酰胺為10)。

3 結果分析

3.1 色譜條件的選擇 通過Agilent 1260高效液相色譜儀的光譜數據采集功能，獲得撲草凈、乙草胺、2，4-滴異辛酯的紫外吸收圖(圖4)。從圖中看到乙草胺、撲草凈、2，4-滴異辛酯的最大吸收分別在220nm、225nm和236nm附近，根據樣品中各成分含量及出峰時間，為減少溶劑的干擾，兼顧較大吸收波長，將檢測波長定為236nm。

圖4 乙草胺、撲草凈、2，4-滴異辛酯紫外吸收譜圖

色譜柱選擇常用的反相填料ZORBAX SB-C18柱。依據乙草胺、撲草凈和2，4-滴異辛酯理化性質，選擇乙腈為溶劑溶解樣品，三混制劑成分復雜，選擇乙腈和酸水為流動相，按不同比例在色譜柱上進行選擇比較。經測定，當流速為1.0mL/min時，在乙腈：乙酸水溶液=70：30(V/V)條件下，伯酰胺、撲草凈、乙草胺能有效分離，出峰時間較為合適；2，4-滴異辛酯在乙腈：乙酸水溶液=85：15(V/V)條件下，峰形對稱，基線平穩，分析時間較短。

3.2 分析方法的線性相關性試驗 稱取撲草凈標樣22.8mg(精確至0.2mg)于100mL容量瓶中，用乙腈超聲溶解并稀釋至刻度，靜止備用。稱取乙草胺標樣58.6mg(精確至0.2mg)、2，4-滴異辛酯標樣26.4mg(精確至0.2mg)置于同一50mL容量瓶中，用移液管加入撲草凈標準溶液10mL，用乙腈超聲溶解并稀釋至刻度，靜止備用。用移液管分別移取上述標準溶液2.0、4.0、6.0、8.0、10.0mL于10mL容量瓶中，用乙腈定容至刻度搖勻后備用。按上述條件進行測定，以進樣濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，繪制標準曲線，得線性方程為y撲草凈=66 732.81x+3.44，相關系數為0.999 92；y乙草胺=2 279.52x+5.24，相關系數為0.999 97；y2，4-滴異辛酯=6 401.99x-3.93，相關系數為0.999 94。撲草凈、乙草胺、2，4-滴異辛酯的線性相關性試驗結果(表1)，線性關系(圖5、圖6、圖7)。

表1 分析方法的線性相關性試驗結果

圖7 2，4-滴異辛酯線性關系圖

3.3 方法精密度的測定 在上述色譜操作條件下對同一樣品平行測定5次，撲草凈、乙草胺、2，4-滴異辛酯的標準偏差分別為0.02、0.09、0.11；變異系數分別為0.93%、0.17%、0.54%(表2)。

表2 分析方法的精密度試驗結果

3.4 方法準確度的測定 按照配方比例要求，將除原藥以外的所有填料助劑混勻，做制劑空白，按照制劑標稱值在制劑空白中添加有效成分，合成5個制劑樣品，在上述色譜操作條件下進行分析，測得撲草凈、乙草胺、2，4-滴異辛酯的平均加標回收率分別為為99.56%、99.91%、99.83%(表3)。

表3 分析方法的準確度試驗結果

3.5 方法特異性 對樣品組分色譜峰進行峰純度試驗，通過工作站軟件計算匹配度，撲草凈、乙草胺、2，4-滴異辛酯的峰純度因子分別為999.68、999.41、999.84，特異性符合要求。

4 結論

試驗建立了高效液相色譜法檢測78%乙·撲·滴辛酯乳油中有效成分的分析方法。上述試驗結果表明，乙草胺、撲草凈和2，4-滴異辛酯在測試濃度范圍內線性關系良好，方法準確度和精密度較高，具有簡便、快速的優點，是產品質量控制的有效可行的分析方法。