廈門地區2 967例皮膚過敏性疾病患者變應原檢測結果分析

林玉蓉，于 宇，歐陽玲，張 玲，宋維芳△

中國人民解放軍陸軍第七十三集團軍醫院：1.皮膚病科；2.檢驗科，福建廈門 361000

超敏反應即為變態反應，是機體對某些抗原初次應答致敏后，當再次接觸相同抗原刺激時，所表現出的一種生理功能紊亂或組織細胞損傷為主的異常免疫應答。引起超敏反應的抗原物質為變應原，常見的變應原有吸入性、食物性、接觸性化學物質、接觸性化妝品等，能夠選擇性誘導機體產生特異性免疫球蛋白E(IgE)抗體，稱為Ⅰ型超敏反應[1-2]。皮膚科常見的過敏性疾病有蕁麻疹、過敏性皮炎、濕疹等，主要由Ⅰ型超敏反應引起[3-4]，變應原主要為吸入性和食物性。本研究通過對廈門地區皮膚過敏性疾病進行血清特異性IgE的檢測，明確變應原的種類，以期對廈門地區皮膚過敏性疾病的預防和診療提供依據。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2019年1月至2020年12月在本院皮膚病科就診的2 967例皮膚過敏性疾病患者為研究對象，其中女1 587例，男1 380例，年齡0～91歲。患者臨床診斷主要包括蕁麻疹、濕疹、過敏性皮炎，所有皮膚過敏性疾病患者的臨床診斷均由皮膚科醫師確診，均符合相關疾病診斷標準[4]。按照年齡將≥18歲的患者作為成年組(2 190例)，<18歲的患者作為未成年組(777例)；按廈門地區氣候特點劃分季節：3-4月為春雨季節，5-6月為梅雨季節，7-9月為夏季，10-11月為秋季，12月至次年2月為冬季。

1.2儀器與試劑 采用由德國Mediwiss Analytic GmbH敏篩定量過敏原檢測系統進行檢測，儀器包括免疫檢測儀(型號：C1)、孵育盒、混勻儀。試劑為過敏原特異性IgE抗體檢測試劑盒(免疫印跡法)，其中可檢測吸入性過敏原有9種，包括戶塵螨、屋塵、桑樹、貓毛皮屑、狗毛皮屑、蟑螂、霉菌組合(點青霉/分枝孢霉/煙曲霉/黑曲霉/交鏈霉)、草類組合(矮豚草/蒿草/葎草/藜草)、樹木組合(柏樹/榆樹/柳樹/櫟樹/樺樹/楓樹/胡桃樹/梧桐樹/楊樹花粉)，食物性過敏原有10種，包括莧、雞蛋白、牛奶、蝦、牛肉、貝、蟹、芒果、腰果、菠蘿。

1.3方法 免疫印跡法是一種將高分辨率凝膠電泳和免疫化學分析技術相結合的雜交技術。其試驗原理為將多種特異性過敏原提取物包被在特制的纖維膜條上，與待測標本進行反應[5]。隨機采集患者肘部靜脈血3～5 mL于含有分離膠的試管中，0～6歲嬰幼兒由兒科專業護士采集送檢，待自然析出血清后于當天或者隔天完成檢測。操作前檢查儀器和試劑的性能在說明書安全范圍之內，整個過程嚴格遵循操作說明書。第一步，用稀釋的洗脫液沖洗試劑條，用洗脫液填充試劑條，在反應槽中搖動洗脫液10 s，輕輕地在吸紙上把洗脫液拍干；第二步，用移液器把250 μL血清注入反應槽里，此過程血清需完全覆蓋試劑條，在混勻儀上孵育45 min；第三步，廢棄血清，注意廢棄血清的時候不要交叉污染試劑，用洗脫液沖洗反應槽，在反應槽中水平搖動洗脫液10 s，重復清洗步驟6～7次，空甩反應槽消除剩余的洗脫液；輕輕地在吸紙上把洗脫液拍干；加入檢測抗體250 μL，檢測抗體需完全覆蓋試劑條，在混勻儀上孵育45 min；第四步，廢棄檢測抗體，沖洗反應槽，拍干后加入結合物250 μL，在混勻儀上孵育20 min；第五步，廢棄結合物，沖洗反應槽，在反應槽中水平搖動洗脫液10 s，重復清洗步驟9～10次，加入底物250 μL，在混勻儀上孵育20 min；最后廢棄底物沖洗，用吹風機直接吹干，試劑條干燥的結果是紫色背景消失變為白色。干燥后立即用配套軟件進行讀板評估。判斷標準：通過免疫檢測儀軟件評估條帶顏色深淺，試劑條上顏色的深淺與血清中特異性IgE抗體水平成正比。變應原特異性IgE抗體水平分級、數字分級和IgE抗體水平(IU/mL)的換算關系見表1。把變應原特異性IgE水平>0.35 IU/mL視為變應原陽性[6]。

表1 變應原特異性IgE抗體水平分級、數字分級和IgE抗體水平的換算關系

1.4統計學處理 采用SPSS26.0統計軟件對數據進行分析。計數資料以例數、率表示，組間比較采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.119種變應原檢測結果 2 967例皮膚過敏性疾病患者中1 670例患者變應原陽性，陽性率為56.29%，其中吸入性變應原陽性1 115例(66.77%)，食物性變應原陽性555例(33.23%)，吸入性變應原的陽性占比高于食物性變應原(χ2=375.569，P<0.001)。吸入性變應原中占比排名前5位依次為戶塵螨(21.44%)、霉菌組合(9.64%)、樹木組合(7.31%)、蟑螂(6.29%)、屋塵(5.69%)；食物性變應原占比排名前5位依次為牛奶(8.14%)、腰果(6.95%)、蟹(4.07%)、莧(3.35%)、蝦(3.05%)。見表2。

表2 19種變應原陽性患者分布情況

續表2 19種變應原陽性患者分布情況

2.2不同性別患者的變應原陽性分布情況 男性患者變應原陽性率為53.77%(742/1 380)，低于女性患者的58.48%(428/1 587)，差異有統計學意義(χ2=6.457，P=0.011)。

2.3變應原在不同年齡患者中的陽性分布情況 成年組吸入性變應原陽性率最高的是戶塵螨(13.79%)，其次是霉菌組合(6.30%)、樹木組合(5.11%)、蟑螂(4.11%)，而食物性變應原陽性率最高的是腰果(4.93%)，其次是蟹(2.37%)和牛奶(2.28%)。未成年組中吸入性變應原陽性率最高的是戶塵螨(7.21%)，其次是霉菌組合(2.96%)、屋塵(2.32%)和蟑螂(1.93%)，而食物性變應原陽性率最高的是牛奶(11.07%)、其次是雞蛋白(2.70%)、蟹(2.06%)和蝦(1.54%)。成年組、未成年組以上排名靠前的變應原中除屋塵、蟹、蝦外，其他差異均有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 變應原在不同年齡患者中的陽性分布比較[n(%)]

2.4變應原在不同季節的陽性分布情況 變應原在不同季節的總陽性率差異有統計學意義(P<0.05)，夏季陽性率(83.16%)最高,其次是春雨季節(58.22%)、梅雨季節(46.77%)，其中戶塵螨、桑樹、蟑螂、霉菌組合、樹木類組合、牛奶、腰果的陽性率在不同季節差異均有統計學意義(P<0.05)。見表4。

表4 變應原在不同季節的陽性分布比較[n(%)]

續表4 變應原在不同季節的陽性分布比較[n(%)]

2.5變應原在不同類型皮膚過敏性疾病患者中的陽性分布情況 變應原在不同類型皮膚過敏性疾病患者中的總陽性率差異有統計學意義(P<0.05)，以蕁麻疹患者變應原總陽性率(62.73%)最高。其中戶塵螨、霉菌組合在不同類型皮膚過敏性疾病中的陽性率差異均有統計學意義(P<0.05)，而其他變應原在不同類型過敏性疾病患者中的陽性率差異均無統計學意義(P>0.05)。見表5。

表5 變應原在不同類型皮膚過敏性疾病患者中的陽性分布比較[n(%)]

3 討 論

隨著科技的進步，環境氣候的改變以及飲食結構的進化，過敏的人群呈逐年上升趨勢，而在皮膚科就診患者中皮膚過敏者最常見、復發率最高，給人們的日常生活、工作以及身心健康帶來很大影響。據世界變態反應組織白皮書報告，過敏已成為全球第六大疾病[7]。皮膚過敏性疾病往往病因復雜，且變應原種類繁多，明確變應原是避免皮膚過敏的最重要有效途徑，而目前常見檢測變應原的方法有：皮膚點刺實驗、鼻黏膜激發試驗、食物激發試驗、體外診斷血清學檢驗,前3種方法屬于體內實驗，因操作繁瑣且具有危險性和比較痛苦等缺點而不容易被患者所接受，體外診斷血清學檢驗變應原安全可靠，具有高靈敏度和特異度[8]，且有相關實驗研究表明體外檢測血清變應原特異性IgE抗體水平對過敏性疾病的治療和預防具有較大指導意義[9]。

本研究結果顯示，吸入性變應原的陽性占比高于食物性變應原(χ2=375.569，P<0.001)，說明該地區皮膚過敏性疾病的變應原以吸入性變應原為主，排名前5位依次為戶塵螨、霉菌組合、樹木組合、蟑螂、屋塵，以戶塵螨占比最高，這與國內大部分的研究結果一致[10-11]，而屋塵在本次研究中僅排名第五，這與萬極碩等[12]報道屋塵排名第一的結果不一致，可能原因：北京地區受霧霾天氣影響較大，而廈門是全國有名的空氣優良城市，隨著當地人民生活水平的提高，對居住環境要求也普遍提高，越來越注重生活衛生條件，家里常備空氣凈化器、除螨儀等。樹木組合在本研究中排名第3，排名稍靠前，這與廈門是一座花園城市，綠色指數得分(94.8)排全國第一[13]，終年樹木常青，鮮花盛開有關。廈門地區居民休閑活動以戶外為主，如爬山、踏青、公園野餐等，增加了對樹木花粉過敏的概率。本研究結果顯示，在春、夏季節，樹木組合的陽性率明顯高于其他季節，因此春、夏季節到戶外游玩時，要特別做好防護措施，最好備長袖衣物，戴口罩外，要遠離花草密集的地方，盡量避免與花粉直接接觸；中午陽光強烈，花粉的釋放量最多，對花粉過敏者此時最好不要外出，在大風天氣時也應避免出游。

本研究結果顯示，未成年組和成年組總陽性率差異有統計學意義(P<0.05)，其中未成年組主要對牛奶、戶塵螨、霉菌組合、雞蛋白、屋塵過敏，成年組主要對戶塵螨、霉菌組合、樹木組合、腰果、蟑螂過敏。其中牛奶為未成年患者最重要的食物變應原在國內外的研究中已成為共識[14-15]。而作為南方沿海城市，飲食結構主要以海產品為主，蝦、蟹在未成年組和未成年組中均未進入前5，兩組的陽性率差異也無統計學意義(P>0.05)，這與相關文獻報道不一致[16]。分析原因可能是近年來當地居民均衡飲食的意識逐漸提升，飲食趨向多樣化，而來皮膚科就診的過敏患者大部分都是有明顯癥狀，已經影響到正常生活，所以飲食上都會有意識地避免海產品的攝入，干擾了研究結果。當體內抗原達不到可以檢測的水平，會造成假陰性結果，但即使某種食入性變應原檢測結果是陰性，在生活中當處于過敏狀態時也應避免攝入容易引起過敏的食物。

本研究結果還顯示，在不同類型皮膚過敏性疾病中，蕁麻疹的變應原總陽性率(62.73%)最高，其次是過敏性皮炎(54.70%)，最后是濕疹(48.20%)，差異均有統計學意義(P<0.05)。其中蕁麻疹患者主要對戶塵螨、牛奶、樹木組合、霉菌組合、腰果過敏，過敏性皮炎患者主要對戶塵螨、霉菌組合、牛奶、樹木組合、蟑螂過敏，濕疹患者主要對戶塵螨、霉菌組合、腰果、蟑螂、牛奶過敏，除了戶塵螨、霉菌組合差異具有統計學意義(P<0.05)外，其他變應原在不同類型皮膚過敏性疾病中差異均無統計學意義(P>0.05)。在本研究中，不同類型皮膚過敏性疾病霉菌組合的陽性率均較高，可能與當地的氣候常年溫暖潮濕，容易滋長霉菌有關，這與相關報道一致[16-17]。同時腰果在本研究中排名也比較靠前，國內外研究發現腰果中含有多種變應原，其中腰果中Ana o 3基因是腰果的主要變應原，在美國，不管是兒童還是成人，腰果過敏已成為一個嚴峻的臨床問題，是食物過敏的主要因素之一，會引起嚴重的皮膚過敏[18-19]。腰果引起的過敏常見有蕁麻疹、過敏性皮炎、過敏性休克等，所以在皮膚科就診的過敏患者中腰果檢出率相對較高。腰果是世界四大干果之一，以美味、營養價值高廣受人們歡迎，同時相比花生、蠶豆，其致敏率更高。近年國內經濟水平快速提高，食用腰果人群增加，腰果的檢出率也隨之增加，過敏患者應更加慎重食用腰果。

綜上所述，廈門地區皮膚過敏性疾病的主要變應原為戶塵螨、霉菌組合、牛奶、樹木組合、腰果。特異性IgE抗體的陽性分布受性別、年齡、季節、地域、環境及皮膚過敏性疾病等因素影響而呈現一定的分布特點及規律，為該地區皮膚過敏性疾病的預防和治療提供參考依據。