新生兒ABO同型血交叉配血不合原因及安全輸血分析

黨創偉 李自鋒 劉釗鋒 丁帥 周峰 李紅娜 宋惠娜

禹州市人民醫院(許昌市感染性疾病病原體研究重點實驗室)，河南省禹州市 461670

輸血是臨床重要的治療方法，伴有貧血、先天性心臟病、血液病等新生兒通常需要接受輸血治療以維持身體健康、挽救生命[1]。隨著社會經濟快速發展、醫療水平的不斷提升，輸血安全受到更為廣泛的重視。交叉配血試驗的主要目的是檢查供血者、受血者紅細胞血型抗原與抗體成分能否相容，從而為受血者提供適宜血液，是保證輸血安全的根本前提與有效途徑[2-3]。但在交叉配血過程中常出現ABO同型血交叉配血不合現象，嚴重影響臨床用血[4]。因此，對交叉配血不合問題進行綜合分析，找出其中原因并采取合理輸血策略和措施，才能有效減少輸血不良反應。本研究選取我院收治的105例ABO同型血交叉配血不合新生兒為研究對象，對交叉配血不合的主要原因進行了分析并制訂了相應的輸血策略和措施，使患兒得到安全的輸血治療。現將結果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年6月至2020年4月我院收治的ABO同型血交叉配血不合新生兒105例為研究對象。納入標準：經Coomb′s試驗證實為ABO同型血交叉配血不合；家屬簽署干預研究知情同意書。排除標準：有出血傾向或血液處于高凝狀態；伴發感染性疾病；有嚴重并發癥；正在接受免疫抑制劑與激素治療。納入分析的105例新生兒中女48例、男57例；日齡1～28 d，平均(14.13±6.46)d；體質量2.9～4.3 kg，平均(3.48±0.22)kg；疾病類型：血液病21例、先天性心臟病45例、早產兒貧血23例、意外傷10例、其他6例。

1.2 方法

1.2.1 儀器及試劑 (1)儀器。血液學離心機(日本久保田公司，型號：KA-2200)、恒溫水浴箱(常州市國旺儀器制造有限公司，型號：HHW-420.600.)、全自動血型及配血分析系統(美國強生公司，型號：Ortho Autovue)。(2)試劑。抗Jk、抗Le定型試劑，購自BIOSCOT?公司；RhD、ABO、抗人球蛋白檢測卡，購自瑞士達亞美公司，抗N、抗C、抗E、抗A、抗AB、抗B、抗D、抗H、抗M、抗P1、抗e、抗c、ABO血型反定型細胞、抗體鑒定譜細胞、抗體篩選細胞、抗人球蛋白試劑，購自上海市血液生物醫藥有限責任公司。

1.2.2 方法 采集新生兒EDTA抗凝血2 mL、不抗凝血3 mL，2 000 r/min離心5 min分離紅細胞、血漿。以微柱凝膠法實施ABO血型正反定型，進行Rh血型檢測、自身抗體檢測、Coomb′s試驗、不規則抗體篩選及特異性鑒定、冷凝集素檢測：(1)自身抗體檢測。使用37 ℃的生理鹽水對新生兒紅細胞連續洗滌3次，實施ABO血型正向定型；用洗滌后的紅細胞吸收血清中自身抗體，再行ABO血型反向定型與同種抗體檢測。(2)不規則抗體篩選及特異性鑒定。對ABO血型正反定型不相符的血標本，以含有10個稀有血型系統抗原的1、2、3號抗體篩選細胞實施不規則抗體篩選；對結果陽性血標本，以10個譜細胞對抗體進行特異性鑒定；對有特異性抗體的血標本，以含有相應抗原紅細胞實施效價檢測。(3)冷凝集素檢測。將新生兒血清與自身紅細胞混合，4 ℃放置3 h，用于冷凝集素試驗。(4)Coomb′s試驗。使用37 ℃的生理鹽水對新生兒紅細胞連續洗滌3次，以氯化鈉溶液將紅細胞制備成20 mL/L懸液，行Coomb′s試驗。若結果呈陽性，將紅細胞置于56 ℃水浴箱中放散10 min，使用放散后Coomb′s試驗結果呈陰性的紅細胞開展ABO、RhD血型檢測，并行交叉配血試驗。采用凝聚胺法驗證交叉配血不合血標本，分析交叉配血不合的主要原因，并為患兒制訂相應的輸血策略。

2 結 果

2.1 交叉配血不合主要原因 105例新生兒ABO同型血交叉配血不合的主要原因有不規則抗體37例(35.24%)、冷凝集素24例(22.86%)、自身抗體陽性20例(19.05%)、溶血病13例(12.38%)、血漿蛋白異常7例(6.67%)、擴容與止血藥物4例(3.81%)。

2.2 配血方法對交叉配血結果的影響 對105例新生兒交叉配血不合的血標本，采用微柱凝膠法進行交叉配血的結果顯示，主側配血不合72例、次側配血不合19例、主次側配血均不合14例；采用凝聚胺法進行交叉配血的結果顯示，主側配血不合72例、次側配血不合19例、主次側配血均不合14例。

2.3 交叉配血不合輸血策略 (1)不規則抗體：鑒定抗體特異性，為患兒選取抗原為陰性的血液。(2)冷凝集素：4 ℃下吸收自身抗體，并在37 ℃下進行交叉配血。(3)自身抗體：行自身抗體吸收試驗。(4)血漿蛋白異常：洗滌紅細胞。(5)溶血病：行抗人球蛋白試驗、吸收放散試驗。(6)擴容與止血藥物：洗滌紅細胞。

3 討 論

輸血在臨床治療中發揮著重要作用，尤其是在急診搶救患者中具有不可替代的地位[5]。輸血前行交叉配血試驗是保證輸血有效性與安全性的重要舉措，若出現ABO同型血交叉配血不合現象，應立即找出原因并制訂出相應的策略和措施，為患者安全輸血提供保障[6]。

本研究結果顯示，由不規則抗體引發的新生兒ABO同型血交叉配血不合占35.24%。不規則抗體多為輸血或妊娠時Rh血型不合形成的IgG型抗體，是引發新生兒溶血病、溶血性輸血反應、ABO血型正反定型不符與交叉配血不合主要因素[7-8]。針對這種情況，可在了解新生兒臨床診斷、輸血史、母親妊娠史等情況的前提下，以譜細胞、抗體篩選細胞實施不規則抗體篩選及特異性鑒定，選取無相應抗原供血標本對患兒進行交叉配血。

本研究結果顯示，由冷凝集素引發的新生兒ABO同型血交叉配血不合占22.86%。當新生兒患有某種疾病時，其血清中含有高效價冷凝集素，溫度較低時具備活性，會干擾血型鑒定與交叉配血試驗結果[9-10]。針對這種情況，可使用37 ℃的生理鹽水對新生兒紅細胞進行連續洗滌，置于4 ℃下，在吸收血清中冷凝集素后再進行血型鑒定及交叉配血試驗可有效消除冷凝集素干擾。

本研究結果顯示，由自身抗體陽性所引發的新生兒ABO同型血交叉配血不合占19.05%。早產兒胎內骨髓外造血過早停止，胎兒出生后機體快速生長發育，易引起新生兒貧血；貧血新生兒紅細胞被自身抗體致敏后會引發Coomb′s試驗結果陽性，與所有供血者紅細胞進行交叉配血試驗均不合[11-12]。針對這種情況，可使用紅細胞吸收自身抗體后的血清及特異性抗體對抗原呈陰性的紅細胞進行間接Coomb′s試驗主側配血；對抗體特異性不能確定的新生兒，在病情危重必須及時輸血時，可少量緩慢輸注主側配血凝集最弱的Rh、ABO血型或與新生兒同型的洗滌紅細胞。

本研究結果顯示，由溶血病所引發的新生兒ABO同型血交叉配血不合占12.38%。患有溶血病的新生兒，其紅細胞可與不規則抗體、IgG型抗A(B)結合，或因其血清中含有不規則抗體、IgG型抗A(B)，在交叉配血時會引發主側與次側不合[13]。在這種情況下，溶血病新生兒的紅細胞直接Coomb′s試驗結果呈陽性，次側配血多不合，因此可只行主側配血，不行次側配血；對ABO新生兒溶血病患兒可選擇O型紅細胞與新生兒血清行主側配血，對非ABO新生兒溶血病患兒可選擇不含相應抗原紅細胞與新生兒血清進行主側配血，從而成功配血為患兒進行輸血治療。

本研究結果顯示，由血漿蛋白異常所引發的新生兒ABO同型血交叉配血不合占6.67%。這是由于供血者血標本在未充分抗凝或新生兒血漿內含有大量纖維蛋白原，在行交叉配血試驗時纖維蛋白原被激活，凝集時形成凝塊；或新生兒血清球蛋白大量增加導致紅細胞間Zeta電位降低而形成假凝集，會對交叉配血結果造成嚴重影響[14]。針對這種情況，可在配血試管中添加少許生理鹽水消除凝集，若凝集仍難以消除，可將血標本放置于37～43 ℃下孵育10 min，離心處理，并連續洗滌紅細胞3次，然后再行交叉配血試驗；也可使用血清標本行交叉配血，這樣可有效消除纖維蛋白原的干擾，從而成功配血為患兒進行輸血治療。

本研究結果顯示，由擴容與止血藥物所引發的新生兒ABO同型血交叉配血不合占3.81%。擴容藥物能吸附于紅細胞表面，形成假凝集，而止血藥物能使得血小板聚集，兩種藥物均會對交叉配血試驗結果造成干擾[15]。針對這種情況，可在配血試管中添加少許生理鹽水消除凝集，或連續洗滌紅細胞3次再行試驗，也可在輸注擴容與止血藥物前采集血標本，可有效排除藥物對血型鑒定、交叉配血的影響，從而成功配血為患兒進行輸血治療。

本研究結果顯示，采用微柱凝膠法進行交叉配血，105例患兒的血標本中主側配血不合、次側配血不合、主次側配血均不合分別有72、19、14例。微柱凝膠法雖然具有操作簡單、靈敏度高等優勢，但也易引發假陽性，造成交叉配血不合，當出現ABO同型血交叉配血不合時需對血標本適當處理，同時采用凝聚胺法進行驗證試驗。新生兒ABO同型血交叉配血不合主要由冷凝集素、自身抗體、不規則抗體、血漿蛋白異常、溶血病、擴容與止血藥物等因素引發，采取相關策略和措施，開展相關試驗，可為患兒選擇合適血液進行安全輸血治療。