不同碳氮源對黃裙竹蓀菌絲生長的影響

劉傾城,黃萬兵,黃曉潤,桂陽,劉宏宇,朱國勝*

（1.貴州省農作物品種資源研究所，貴州 貴陽 550006；2.貴州省食用菌育種重點實驗室，貴州 貴陽 550006；3.貴州省食用菌現代農業產業技術體系資源育種功能實驗室，貴州 貴陽 550006）

黃裙竹蓀（Dictyophora muhicolor）是擔子菌 亞門（Basidiomy cotina）、腹 菌綱（Gasteromycetes）、鬼筆目（Phallales）、鬼筆科（Phallaceae）、竹蓀屬（Dictyophora）的藥食兩用珍稀食用菌［1］。黃裙竹蓀竹蛋一般呈卵狀或球形，棕色或紫紅色；菌柄為高8～12 cm的圓柱形且呈淡黃色，中空，海綿質；菌幕由菌蓋下方展開，完全展裙后達6.5～8.0 cm，呈淡黃色鐘型，且菌幕上分布有規則的3～4 cm網眼；菌蓋高3～4 cm，鐘形，表面覆有微臭粘性的棕褐色孢體［2-3］。黃裙竹蓀多生長于竹林下的腐殖土、腐竹根或枯竹枝上，多分布于廣西、貴州、云南等地區［4］。黃裙竹蓀具有良好的防腐作用，同時作為藥食兩用的真菌，在治療細菌性腸炎、腳氣病等方面具有很好療效［5］。長期以來，對黃裙竹蓀的研究主要圍繞其形態學、生物學特性、人工馴化栽培等方面，在藥用價值上有少量研究報道［6］，但鮮見對黃裙竹蓀營養生理特性的研究報道。為黃裙竹蓀營養生理學特性研究和菌種選育提供理論依據，探索不同碳氮源對黃裙竹蓀菌絲生長的影響，篩選出黃裙竹蓀母種生長最適宜的碳源和氮源。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 菌株 黃裙竹蓀Dm-L1，由貴州省食用菌育種重點實驗室提供。

1.1.2 培養基 基礎培養基：葡萄糖10 g、蛋白胨2.5 g、酵母浸粉0.5 g、磷酸二氫鉀0.9 g、硫酸鎂1.8 g、全粉31 g、瓊脂10 g、蒸餾水1 000 mL。

碳源培養基：分別用果糖10 g、甘露糖10.1 g、乳 糖9.5 g、蔗 糖9.5 g、麥 芽 糖9.5 g、可溶性淀粉9.1 g、紅糖9.5 g代替基礎培養基中的葡萄糖。

氮源培養基：分別用草酸銨4.52 g、尿素0.96 g、硫酸銨2.11 g、酵母浸粉4.7g、蛋白胨2.8 g代替基礎培養基中的酵母浸粉和蛋白胨的總量。

1.2 方法

試驗設置8種碳源培養基和5種氮源培養基，每種培養基重復5次。將各碳源培養基和氮源培養基經高溫滅菌后倒入90 mm一次性培養皿中，待冷卻凝固后，用直徑10 mm打孔器取黃裙竹蓀接種塊種于培養皿中央，放置于25℃恒溫培養箱中進行避光培養，采用十字劃線法標記剛萌發時的菌落直徑，培養21 d后記錄菌絲直徑并停止劃線，計算菌絲生長速度并觀察菌絲生長勢。

菌絲生長速度=（最后一次所測菌落直徑—接種塊直徑）/培養天數×2。

2 結果與分析

2.1 不同碳源培養基黃裙竹蓀的菌絲生長速度和生長勢

從表1可知，不同碳源培養基的黃裙竹蓀菌絲生長速度存在差異，表現為可溶性淀粉＞果糖＞葡萄糖＞蔗糖＞乳糖＞甘露糖＞紅糖＞麥芽糖。可溶性淀粉作為碳源時，菌絲生長速度最快，為0.898 mm/d，與果糖、葡萄糖培養基無顯著差異，但極顯著高于以甘露糖、麥芽糖、蔗糖、乳糖和紅糖為碳源的培養基；果糖和葡萄糖作為碳源培養基時，菌絲生長速度與麥芽糖培養基存在顯著差異，但與其他碳源培養基無顯著差異；其余5種碳源培養基之間均無顯著差異。從生長勢看，除乳糖外的其他碳源培養基的黃裙竹蓀菌絲生長勢無明顯差異，均表現為氣生菌絲較為豐富、健壯、潔白、菌落完整且邊緣整齊，而乳糖作為碳源時黃裙竹蓀菌絲的生長勢較差（圖1）。結合黃裙竹蓀在不同碳源培養基的菌絲生長速度和生長勢看，黃裙竹蓀較為適宜的碳源培養基為可溶性淀粉，其次是果糖和葡萄糖，而乳糖作為碳源培養基時，其生長速度和生長勢表現均較差。

表1 不同碳源培養基黃裙竹蓀菌的絲生長速度和生長勢

圖1 不同碳源培養基的黃裙竹蓀菌絲生長勢

2.2 不同氮源培養基黃裙竹蓀的菌絲生長速度和生長勢

從表2可知，不同氮源培養基的黃裙竹蓀菌絲生長速度存在差異，表現為尿素＞硫酸銨＞蛋白胨＞酵母提取物＞草酸銨。尿素作為氮源培養基時的菌絲生長速度最快，為2.540 mm/d，極顯著高于其他氮源培養基；草酸銨、蛋白胨、酵母提取物作為氮源培養基時，黃裙竹蓀的菌絲生長速度無顯著差異，但均顯著低于以硫酸銨為氮源的培養基。從生長勢看，尿素和硫酸銨作為氮源培養基時，黃裙竹蓀菌絲生長勢最好，表現為氣生菌絲豐富、健壯、潔白、菌落完整且邊緣整齊；蛋白胨和酵母提取物次之，均能形成完整的菌落；草酸銨為氮源時黃裙竹蓀菌絲生長勢最差，氣生菌絲稀疏且幾乎不可見，無法形成完整菌落（圖2）。結合黃裙竹蓀菌絲在不同氮源培養基上的生長速度和生長勢看，黃裙竹蓀較為適宜的氮源培養基為尿素，其次是硫酸銨，而以草酸銨為氮源時，其菌絲生長速度和生長勢菌表現均較差。

表2 不同氮源培養基黃裙竹蓀的菌絲生長速度和生長勢

圖2 不同氮源培養基的黃裙竹蓀菌絲生長勢

3 結論與討論

黃裙竹蓀在供試的8種碳源培養基上均能生長，表明其生長可利用的碳源類型廣泛，對不同碳源的同化吸收主要體現在菌絲生長速度上，表現為可溶性淀粉＞果糖＞葡萄糖＞蔗糖＞乳糖＞甘露糖＞紅糖＞麥芽糖，而在生長勢上無明顯差異。結合菌絲生長速度和生長勢表現認為，可溶性淀粉是8種碳源培養基中最適宜黃裙竹蓀菌絲生長的碳源，這與前人對食用菌碳源的研究結果一致［7-8］，從側面反映出黃裙竹蓀中淀粉酶的活性較高，在培養基中添加可溶性淀粉能有效促進黃裙竹蓀菌絲生長。試驗結果還表明，黃裙竹蓀對有機氮源和無機氮源均可有效利用，但在同化吸收上存在極顯著差異，在不同氮源培養基上的菌絲生長速度表現為尿素＞硫酸銨＞蛋白胨＞酵母提取物＞草酸銨。從生長勢看，以尿素和硫酸銨為氮源的培養基上黃裙竹蓀菌絲生長勢最好，其次是以蛋白胨和酵母提取物為氮源的培養基，最差的是以草酸銨為氮源的培養基。結合菌絲生長速度和生長勢得出，與其他氮源培養基相比，尿素為氮源培養基時，黃裙竹蓀的菌絲生長速度和生長勢均呈現出極顯著優勢，是5種供試氮源培養基中的最佳選擇。這一結果與前人研究結果不同，現有的食用菌對氮源利用研究結果表明，多數食用菌對尿素的利用較差，以尿素作為氮源培養基時菌絲甚至出現停滯生長狀態，這可能與尿素經高壓滅菌后，其分解過程中產生的物質有關［9］。因此，黃裙竹蓀在尿素利用上的特異性以及尿素是否能被黃裙竹蓀直接利用，有待進一步研究驗證。