胃癌患者HER2、PD-L1、p53、axin蛋白表達情況及其與臨床病理特征的關系

賈海娟 許俊卿

(1.西安交通大學第一附屬醫院消化科，陜西 西安 710089；2.兵器工業五二一醫院病理科，陜西 西安 710065)

胃癌是一種常見的消化內科疾病，其在發病早期多無明顯癥狀，但隨著病情進展，可逐漸出現出現疼痛、嘔血等癥狀，并可伴隨胃穿孔、幽門梗阻等并發癥，從而嚴重降低患者的生存質量。胃癌的發生、發展屬于一種復雜的病變過程，其多與腫瘤新生血管生成、原癌及抑癌基因的表達及調控、腫瘤的免疫耐受性等有密切關系。人表皮生長因子受體2(HER2)不僅可以調控細胞增殖，抑制細胞凋亡，還可促進新生血管加速生成，進而參與腫瘤的侵襲與轉移[1]；程序性死亡因子1配體(PD-L1)可參與調節生理性免疫應答反應，且在免疫耐受維持方面具有十分重要的意義[2-3]；p53可參與惡性腫瘤的發生、發展過程[4]；相關研究顯示，axin不僅可以影響細胞的增殖、分化及凋亡，還可能參與腫瘤轉移、浸潤過程[5]。本研究旨在探討胃癌患者HER2、PD-L1、p53、axin蛋白表達情況及其與臨床病理特征的關系。報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 回顧性分析2018年10月至2021年10月我院收治的116例胃癌患者的臨床資料，所有患者經手術切除并病理證實，且均接受HER2、PD-L1、p53、axin蛋白表達檢查。所有胃癌患者中，男性76例，女性40例；年齡40～78歲，平均(66.37±7.36)歲；分化程度：中高分化73例，低分化43例；淋巴結轉移：否39例，是77例。診斷標準：參照《胃癌》[6]中有關胃癌的診斷標準。納入標準：符合上述診斷標準者；經病理學檢查確診者；臨床資料完整者；均接受HER2、PD-L1、p53、axin蛋白表達檢查者等。排除標準：伴有其他惡性腫瘤者；嚴重肝、腎等功能損傷者；胃癌復發者；術前放化療者等。本研究已通過我院醫學倫理委員會審核批準。

1.2檢測方法 所有患者入院后，均接受手術切除并病理學檢查。病理、正常組織的HER2、PD-L1、p53、axin蛋白表達檢測均使用免疫組織化學染色法。HER2蛋白檢測：采用二步法進行免疫組織化學染色，且操作嚴格參照規范步驟。使用HER2單克隆抗體(北京中杉金橋有限公司)及其相關試劑進行檢測。由醫師(病理科，2名及以上高年資)嚴格參照相關規定進行病理學分析，以得出免疫組化結果。根據其顯色強度、陽性細胞率進行評分：(1)顯色強度分為0分(未顯色)、1分(淡黃色)、2分(棕黃色)、3分(棕褐色)；(2)在400倍顯微鏡下進行隨機選取視野(5個)，陽性細胞率分為0分(<5%)、1分(5%～25%)、2分(26%～50%)、3分(51%～75%)、4分(>75%)。陰性：顯色強度得分陽性細胞率得分介于0～1；陽性：顯色強度得分陽性細胞率得分>1。PD-L1蛋白檢測：使用抗PD-L1(SP142)兔單克隆抗體以及二抗(0.2 mL，RAB-0724)及其相關試劑進行檢測，以上儀器與試劑均源于福州邁新生物技術開發有限公司，由醫師(病理科，2名及以上高年資)依據相關標準進行病理學分析，以得出免疫組化結果。根據其顯色強度、陽性細胞率進行評分：(1)顯色強度分為0分(無著色)、1分(淡黃色)、2分(棕黃色)、3分(棕褐色)；(2)在400倍顯微鏡下進行隨機選取視野(5個，100個細胞計數/視野)，陽性細胞率分為1分(≤10%)、2分(11%～50%)、3分(>50%)。陰性：顯色強度得分陽性細胞率得分介于0～1；弱陽性：顯色強度得分陽性細胞率得分≤3；強陽性：顯色強度得分陽性細胞率得分>3。p53、axin蛋白檢測：取胃癌組織及癌旁正常組織，使用甲醛固定，并常規石蠟包埋，取適量石蠟切片，使用兔SP檢測試劑盒(上海烜雅生物科技有限公司)進行檢測p53、axin蛋白，且操作嚴格參照規范步驟。陽性對照：已知的陽性片，axin、p53蛋白陽性細胞判斷標準：axin蛋白定位于細胞漿，p53蛋白定位于細胞核，經顯微鏡觀察，細胞(細胞核或細胞漿)中存在棕黃色顆粒沉淀便為陽性細胞，隨機選取視野(10個)，對應蛋白陽性表達：陽性染色細胞占比≥10%。

2 結 果

2.1HER2、PD-L1、p53、axin蛋白表達在胃癌組織及癌旁組織中的表達情況 與癌旁組織相比，胃癌組織的HER2、PD-L1、p53蛋白表達陽性率較高，而axin蛋白表達陽性率較低，差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 HER2、PD-L1、p53、axin蛋白表達在胃癌組織及癌旁組織中的表達情況比較[n(%)]

2.2胃癌組織中HER2、PD-L1、p53、axin蛋白表達與臨床病理特征的關系 胃癌組織中，低分化、淋巴結轉移的PD-L1、HER2、p53蛋白陽性表達率高于陰性表達率，而axin蛋白陽性表達率低于陰性表達率，差異有統計學意義(P<0.05)，同時PD-L1、HER2、p53蛋白的陽性表達率分別與分化程度、淋巴結轉移呈正相關；axin蛋白陽性表達率與分化程度、淋巴結轉移呈負相關，差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 胃癌組織中HER2、PD-L1、p53、axin蛋白表達與臨床病理特征的關系 [n(%)]

3 討 論

胃癌主要是由環境、不良飲食習慣、遺傳等因素導致胃黏膜上皮畑胞發生惡性腫瘤病變的一種病癥。相關研究表明，即便胃癌患者獲得了較為理想的治療，但其5年內生存率仍處于較低水平，因此探究與胃癌發生、發展有關的標志物具有重要的臨床意義[7]。

HER2屬于一種原癌基因，其可通過產生異源或同源二聚體，以激活磷脂酰肌醇3激酶等通路，進而加速新生血管的形成，同時調控細胞增殖，抑制細胞凋亡，進一步加速腫瘤的發生與發展，在健康人體內，HER2表達多處于非激活狀態，但當機體受到外界有害因素(如致癌等)刺激后，該因子將被激活，表達水平顯著升高[8-9]；在部分炎癥介質的刺激下，PD-L1可誘導多種細胞類型表達，以抑制免疫傳遞信號，使得腫瘤細胞逃過機體的免疫監視及殺傷系統，進而增加腫瘤的免疫耐受性，加速患者病情惡化，因此，在在惡性腫瘤細胞組織中，PD-L1可表現為高表達[10-11]；p53具有半衰期短的特點，因此在正常細胞組織中，多處于較低水平，但當p53水平升高時，則可提示p53蛋白基因已發生突變，進而可參與惡性腫瘤細胞的增殖，加快細胞分化，推動胃癌的發生和病情進展[12]；axin可通過與p53結合，以參與p53信號通路，使得p53產物磷酸化，進而提高抑癌基因p53的轉錄活性，發揮促進細胞凋亡的作用，因此，axin的高表達可抑制胃癌的發生與發展[13]。本研究結果顯示，與癌旁組織相比，胃癌組織的HER2、PD-L1、p53蛋白表達陽性率較高，而axin蛋白表達陽性率較低，表明胃癌組織中HER2、PD-L1、p53蛋白表達升高，axin蛋白表達降低，與沙金平等[14]研究結果基本一致。分化程度、淋巴結轉移均可作為胃癌臨床病理特征指標，其中低分化、淋巴結轉移則表明患者的病情越嚴重，而HER2、PD-L1、p53、axin蛋白有可參與胃癌的發生與發展，故胃癌臨床病理特征指標與HER2、PD-L1、p53、axin蛋白水平間可存在密切的關系。本研究結果顯示，胃癌組織中，低分化、淋巴結轉移的PD-L1、HER2、p53蛋白陽性表達率高于陰性表達率，而axin蛋白陽性表達率低于陰性表達率

(P<0.05)，同時PD-L1、HER2、p53蛋白的陽性表達率分別與分化程度、淋巴結轉移呈正相關；axin蛋白陽性表達率與分化程度、淋巴結轉移呈負相關，表明胃癌患者HER2、PD-L1、p53、axin蛋白表達水平與臨床病理特征指標間可存在密切的關系，與趙玲娜等[15]研究結果基本一致。

綜上，胃癌組織中HER2、PD-L1、p53蛋白表達升高，axin蛋白表達降低，且HER2、PD-L1、p53、axin蛋白表達水平與臨床病理特征指標間可存在密切的關系，值得臨床后期推廣應用。