王壬巍
(天津農學院水產學院,天津 300000)
弧菌為一種水產養殖業中較為常見的水生動物病原,其存活能力、感染速度、發病速度、死亡率和病原在飼養水體內的殘留率均較強,且目前無較好的方法對其進行預防和治療,傳統的抗生素治療法不僅效果不佳,也會影響苗種生產的質量,并有培育出強抗藥性的弧菌菌株的可能,屬于水產業中較為頑固的病原種類。在水生動物育苗標粗和生產性飼養過程中,腸炎是嚴重影響水生動物苗種存活的重要因素,其中又以弧菌性腸炎暴發最為普遍、發病快、前期癥狀不明顯、致死率高。在各種水產的生產過程中,都能見到弧菌感染的情況,無論是觀賞魚育苗還是經濟性魚類育苗,外塘養殖還是循環水養殖,魚類還是蝦蟹類,弧菌感染引發的疾病所帶來的損失都是不可估量的,可以說它是水產養殖業的頭號敵人也不為過。弧菌由于分布廣泛、芽孢存活能力強、感染發病迅速但病期久、早期癥狀不明顯,導致弧菌性腸炎在預防和治療上難度均較大,傳統治療弧菌性腸炎的方式通常是投喂含抗生素的飼料、隔離病魚、勤換水,降低未發病魚與以達到發病濃度閾值的病原接觸的機會來降低感染風險,阻斷水體內弧菌密度的進一步上升和繼發性的弧菌感染。但由于弧菌病原會在養殖池池底淤泥、污物等缺氧環境中長時間存活停留,所以這些方案的效果在實際生產中使用時并不佳。目前對于各種弧菌性疾病,尤其是弧菌性腸炎的預防和治療,業內還未有較為理想成熟的方案。
弧菌種類較多,各種弧菌對病魚的感染位置也各不相同,其中感染消化道比例較大的種類為鰻弧菌和溶藻弧菌。鰻弧菌引起的弧菌性疾病復雜多樣,流行性強。感染鰻弧菌的魚蝦最初的疾病癥狀會出現局部褪色,魚各個魚鰭基部和下鰓發紅、充血,泄殖孔紅腫,大面積肌肉組織出血、溶解,體表變黑,鰭潰瘍,對死魚進行解剖檢查時會發現有明顯的粘性組織液滲出,腸道黏膜組織腐爛、脫落。溶藻弧菌,同樣為一種可作為弧菌性腸炎的病原,會引發魚體消瘦,體表紅斑狀潰瘍等情況,最終導致死亡。在實際養殖過程中這兩種弧菌為主要的病原感染類型。感染后水生生物前期首先會出現食欲下降、活動力減弱,進一步發展為收口、貼邊游動、白便,最終消瘦死亡。也有部分水產動物在感染后處于與弧菌共存的狀態,但此狀態下的水產動物基本不生長,且弧菌能夠通過粘膜等代謝物感染同環境下未患病的個體。
弧菌性腸炎引發的因素較多且復雜,但其在不同弧菌種類之間引發的因素基本一致。一般來講最常見的誘發因素即為弧菌濃度升高超過感染閾值,通常原因是投喂量過大導致水體有機物含量超標,引起的水體溶氧下降,導致厭氧性的弧菌活動繁殖力增強,濃度上升,繼而誘發弧菌感染。也有一些情況的弧菌感染來自于外源性的感染,如投喂的活體餌料培養環境較差,攜帶大量弧菌,投喂后造成魚苗大面積感染死亡。亦有間接性的弧菌感染情況,如人工配合飼料儲存條件不佳出現的投喂后魚免疫力下降,或水質條件較差、更換新水體,密度較高,造成的個體應激,引發間接性弧菌感染死亡。
目前水產生物使用藥物預防弧菌性腸炎的方式較少,通常是以增加水體溶氧量,減少養殖容器污染,減少養殖密度,減少應激的基礎方式來降低弧菌對養殖水生動物的感染概率。
亦有使用接種疫苗的方法,來降低魚感染的概率,但由于該方法成本較高且無法對苗種進行接種,實際生產中僅應用于一些高價值的水產品種,如工廠化養殖使用的老鼠斑、東星斑苗種,適合在標粗至5~7厘米后全面對該疫苗進行接種。較有經驗的養殖者,會通過使用弧菌專性的TCBS檢測板監測弧菌密度,并調控水中的溶氧濃度,減少水流死角造成的缺氧區,并對引進水體系統的生物和餌料進行嚴格消毒。這樣的操作是能夠對弧菌進行一定程度的預防的,但由于操作繁瑣嚴格,一旦某環節出現失誤,就會大大提高將弧菌引入系統的風險。
水生動物益生菌制劑是在水產養殖全面禁止檢出抗生素后,所研發出的一類由益生菌和其他微生物的代謝物以及其休眠孢子所制成的對水產動物具有一定誘食、改善臟器代謝、改善腸道、提高免疫力等積極飼養效果的產品。目前市面上主要以芽孢桿菌類、乳酸桿菌類、酵母類和光合細菌類作為主要的產品生產菌種,這些品種的益生菌尤其能在腸道層面上產生改善腸粘膜活性、拉長腸絨毛細胞、提高對營養物質的吸收、減少應激、合理化腸道菌群的積極功能。研究表明飼料中添加益生菌可以提高軍曹魚幼魚的腸道蛋白酶活力,改善雜交鱘腸道微生物環境,在大菱鲆的高密度養殖中也可以應用于提高餌料轉化率,改善生產性能。而在對眼斑雙鋸魚的飼養中添加益生菌的相關研究表明益生菌可以顯著提高其腸道內蛋白酶的活性。
益生菌制劑的使用理論上可以直接或間接地對弧菌感染腸道,誘發弧菌性腸炎的情況進行預防。從腸道菌落角度來看,益生菌休眠孢子在補充進所飼養水產動物的體內后一定程度上可以在水產動物腸道內定植繁育并起到一定積極作用,當水產動物腸道內有益菌群占優作為優勢種群時,即使弧菌濃度能夠達到感染閾值,也未必能夠快速感染個體并令個體發病,若個體體質較好,甚至能夠避免弧菌性疾病的發生。體質一般的個體,亦能夠為弧菌性疾病發病治療,隔離爭取時間。從間接的角度來看,弧菌未達到發病濃度閾值時,仍有一定幾率對群體內亞健康的個體進行感染,感染后進一步提升水體內弧菌濃度,進而造成全部魚只感染的效果。而在飼料中添加益生菌制劑不僅能夠提高魚體免疫力,減少弧菌感染的可能。也能夠在魚排出代謝物后活體益生菌在水體內與弧菌進行競爭,占據弧菌的生長空間和生長資源,將其濃度控制在該系統的感染閾值以下,大大減少了弧菌感染水生動物個體,引發腸炎的機會。
蛭弧菌為一種專性寄生于其他細菌,且能夠引起其他細菌裂解的革蘭氏陰性菌,相比較于傳統的殺菌物質,其安全性高,對許多水產致病菌均有良好的殺滅裂解效果,且攝食蛭弧菌對水產動物無毒害作用。其隸屬于蛭弧菌科,尺寸小于一般的細菌,能夠通過細菌濾器,蛭弧菌不僅能夠殺滅有害的致病菌,還作為一種好氧性細菌,能夠對氨氮,亞硝酸鹽,含氮有機物等水體污染物進行代謝氧化分解。其諸多特性也使其適合應用于弧菌感染的預防。
目前弧菌病在國內水產種苗業和養殖業內傳播流行較為嚴重,其中又以弧菌性腸炎的暴發速度最快、造成的損失最大。尤其對于近海海水魚如石斑魚、軍曹魚等粘膜較厚品種的苗種生產造成的影響尤為強烈。而傳統采用高濃度抗生素進行治療的方法對于已經發病的苗種效果不僅不佳,更容易造成弱苗、僵苗的現象。對水產養殖的苗種生產工作是較大打擊,且會連帶性地對整個水產業造成影響。通常對于養殖業來說,七分防、兩分養、一分治,面對各種致病性強的弧菌,以益生菌制劑作為預防手段,能夠一定程度上提高養殖個體對于高弧菌濃度水體的耐受能力和抵抗弧菌感染的能力,也能夠間接地降低水體內弧菌的密度。通過多種益生菌制劑聯用作為預防弧菌的手段,能夠較大限度地降低水產動物感染弧菌的概率,從而起到降低育苗和養殖風險、提高養殖成功率的作用。