降鈣素原在新生兒血流感染細(xì)菌鑒定中的應(yīng)用價(jià)值

褚福第 郭忠燕 馬亞軍

濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院附屬滕州市中心人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，滕州 277599

新生兒血流感染是臨床常見(jiàn)的一種全身性感染，主要是由病原菌侵入患兒血液系統(tǒng)造成大量毒素產(chǎn)生而引發(fā)的全身炎性反應(yīng)［1］。由于新生兒免疫系統(tǒng)發(fā)育還未成熟，屏障功能和抵抗力相對(duì)較差，存在較高感染風(fēng)險(xiǎn)，一旦發(fā)生感染較易播散，可發(fā)展為敗血癥，嚴(yán)重者可危及生命。血培養(yǎng)細(xì)菌鑒定是目前診斷血流感染的“金標(biāo)準(zhǔn)”，但存在新生兒取血量難以達(dá)到檢測(cè)要求、易污染、培養(yǎng)周期長(zhǎng)等缺點(diǎn)，不利于新生兒血流感染的早期診治［2］。PCT、CRP 和 WBC 是輔助臨床診斷的常用感染性指標(biāo)。PCT 在臨床上可用于輔助監(jiān)測(cè)新生兒早期血流感染，進(jìn)而對(duì)疾病嚴(yán)重程度加以評(píng)估，且具有較高的準(zhǔn)確度，整體應(yīng)用價(jià)值較高［3］。本研究嘗試分析血清PCT 水平在新生兒不同細(xì)菌血流感染的區(qū)別并探討其在細(xì)菌鑒定中的應(yīng)用價(jià)值，為臨床診斷和治療提供早期依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

資料與方法

1、一般資料

本研究經(jīng)濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院附屬滕州市中心人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審批通過(guò)，選取2019年1月至2021年12月濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院附屬滕州市中心人民醫(yī)院收治的經(jīng)血培養(yǎng)確診為血流感染的新生兒198 例作為研究對(duì)象，進(jìn)行回顧性分析，根據(jù)血培養(yǎng)結(jié)果分為革蘭陰性菌組（86 例）和革蘭陽(yáng)性菌組（112 例）。同時(shí)選取90 例血培養(yǎng)陰性新生兒為對(duì)照組。血流感染組男 103 例，女 95 例；日齡（15.15±2.63）d，體質(zhì)量（3.2±0.8）kg。對(duì)照組男47例，女43例；日齡（15.65±2.78）d，體質(zhì)量（3.3±0.7）kg。兩組新生兒一般資料比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05），具有可比性。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）符合人民衛(wèi)生出版社《實(shí)用新生兒學(xué)（第4 版）》［4］中新生兒血流感染診斷標(biāo)準(zhǔn)；（2）出生體質(zhì)量2 000～4 000 g，出生天數(shù)為0～28 d；（3）資料數(shù)據(jù)完整；（4）患兒家屬及其親屬知情同意并簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）抗菌藥物使用史；（2）早期顱內(nèi)出血或嚴(yán)重產(chǎn)傷；（3）考慮合并血液系統(tǒng)疾病者；（4）嚴(yán)重窒息或懷疑存在嚴(yán)重遺傳性疾病。

2、方法

（1）PCT 檢測(cè)：采集新生兒空腹靜脈血3 ml，以 3 000 r/min 轉(zhuǎn)速（離心半徑10 cm）離心6 min，分離血清，使用羅氏Cobas e602 全自動(dòng)免疫分析儀進(jìn)行檢測(cè)，PCT正常范圍為0～0.05 μg/L；CRP 和WBC 檢測(cè)：使用抗凝管采集新生兒靜脈血2 ml，使用全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀BC-5180CRP 進(jìn)行檢測(cè)，CRP 正常范圍為 0～10 mg/L，WBC正常范圍為（4～10）×109/L。超過(guò)正常范圍上限判為陽(yáng)性。（2）細(xì)菌培養(yǎng)及鑒定：嚴(yán)格執(zhí)行無(wú)菌操作，在不同部位采取血培養(yǎng) 2 套，1 套 2 瓶（需氧和厭氧各 1 瓶），每瓶 3～5 ml。使用法國(guó)梅里埃微生物鑒定藥敏分析儀對(duì)分離后的單個(gè)菌落進(jìn)行鑒定。以上嚴(yán)格遵照臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程。

3、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，符合正態(tài)分布的計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，多組間比較采用F檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以例（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1、不同新生兒血清PCT、CRP、WBC水平比較

革蘭陰性菌組和革蘭陽(yáng)性菌組PCT、CRP、WBC 水平均高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）；革蘭陰性菌組PCT 水平高于革蘭陽(yáng)性菌組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

表1 不同新生兒血清PCT、CRP、WBC水平比較（）

表1 不同新生兒血清PCT、CRP、WBC水平比較（）

注：革蘭陰性菌組為革蘭陰性菌感染的血流感染新生兒，革蘭陽(yáng)性菌組為革蘭陽(yáng)性菌感染的血流感染新生兒，對(duì)照組為血培養(yǎng)陰性新生兒；PCT 為降鈣素原，CRP 為 C 反應(yīng)蛋白，WBC 白細(xì)胞計(jì)數(shù)；與對(duì)照組比較，aP＜0.05；與革蘭陽(yáng)性菌組比較，bP＜0.05

WBC（×109/L）17.23±3.43a 15.53±3.12a 8.54±2.37 3.862 0.003組別革蘭陰性菌組革蘭陽(yáng)性菌組對(duì)照組F值P值例數(shù)86 112 90 PCT（μg/L）7.53±1.93ab 2.91±0.83a 0.07±0.02 2.323 0.032 CRP（mg/L）37.32±16.61a 30.73±15.94a 9.32±3.35 5.063＜0.001

2、PCT、CRP、WBC 檢測(cè)診斷新生兒血流感染的價(jià)值比較

PCT 檢測(cè)診斷新生兒血流感染的靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值及約登指數(shù)均高于CRP 和WBC，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），見(jiàn)表2。

表2 PCT、CRP、WBC檢測(cè)診斷新生兒血流感染的價(jià)值比較（288例）

3、血培養(yǎng)檢出菌構(gòu)成比及血清PCT水平比較

血培養(yǎng)檢出菌以大腸埃希菌、表皮葡萄球菌、肺炎克雷伯菌為主，分別占41.86%（36/86）、38.39%（43/112）、27.91%（24/86）；PCT 水平最高為肺炎克雷伯菌感染新生兒［（11.21±3.32）μg/L］，其次為大腸埃希菌感染新生兒［（9.32±3.43）μg/L］。見(jiàn)表3。

表3 198 例新生兒血流感染血培養(yǎng)檢出菌構(gòu)成比及血清PCT 水平比較

4、革蘭陰性菌組與革蘭陽(yáng)性菌組在各PCT 水平的分布比較

PCT ＜0.5 μg/L 時(shí)，革蘭陽(yáng)性菌組占比明顯高于革蘭陰性菌組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；0.5 μg/L≤PCT＜2.0 μg/L時(shí)，兩組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；PCT≥2.0 μg/L 時(shí)，革蘭陰性菌組占比均明顯高于革蘭陽(yáng)性菌組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）。見(jiàn)表4。

表4 革蘭陰性菌組與革蘭陽(yáng)性菌組血流感染新生兒PCT水平分布比較[例（%）]

討 論

相關(guān)研究指出，醫(yī)院血流感染發(fā)生率為0.7%左右，每千住院日血流感染率為0.4%左右，主要包括革蘭陰性菌以及革蘭陽(yáng)性菌2 種病原菌［5］。新生兒由于免疫系統(tǒng)尚未發(fā)育成熟，其對(duì)于病原菌的防御和清除能力相對(duì)較弱，更易遭受細(xì)菌侵襲而發(fā)生感染［6］。在我國(guó)，血流感染導(dǎo)致的新生兒病死率達(dá)到15%左右，其中，早產(chǎn)新生兒血流感染病死率要遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于平均水平［7］。血培養(yǎng)作為診斷血流感染、鑒定細(xì)菌種類的實(shí)驗(yàn)室金標(biāo)準(zhǔn)，但耗時(shí)長(zhǎng)［8］。

PCT 是近年來(lái)新發(fā)現(xiàn)的感染標(biāo)志物，研究顯示，在正常生理狀況下，PCT 在血清中的濃度較低，一般由甲狀腺細(xì)胞組合并分泌，血液里面PCT 半衰期為24～29 h，當(dāng)發(fā)生細(xì)菌感染時(shí)，PCT 會(huì)釋放進(jìn)入血液，導(dǎo)致血清PCT 水平迅速升高，常用于細(xì)菌感染性疾病的診斷［9-11］。文獻(xiàn)報(bào)道，PCT 在新生兒感染4 h 明顯升高，6～8 h 達(dá)到高峰，可用于早期感染的輔助診斷［12］。大量研究和臨床經(jīng)驗(yàn)表明，WBC 影響因素較多不能客觀反映感染的真實(shí)情況，CRP 靈敏度高但特異度不夠好且在新生兒血流感染有滯后性出現(xiàn)［13］。本研究結(jié)果顯示，血培養(yǎng)陽(yáng)性患兒（革蘭陰性菌組和革蘭陽(yáng)性菌組）PCT、CRP、WBC 水平均高于血培養(yǎng)陰性新生兒（對(duì)照組），但只有PCT 水平革蘭陰性菌組高于革蘭陽(yáng)性菌組，這說(shuō)明PCT 在輔助診斷新生兒血流感染中可以初步鑒別細(xì)菌類型，相對(duì)于CRP、WBC 更有優(yōu)勢(shì)。已有研究證實(shí)，PCT 可以作為區(qū)別革蘭陰性菌與革蘭陽(yáng)性菌感染的有效工具［14］。革蘭陰性菌感染后PCT 水平比革蘭陽(yáng)性菌更高，原因分析可能是革蘭陽(yáng)性菌多以外毒素致病而革蘭陰性菌產(chǎn)生內(nèi)毒素，不同的致病因子而引起不同的反應(yīng)，內(nèi)毒素可能存在一個(gè)二次刺激導(dǎo)致PCT濃度較高［15］。

從診斷靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值及約登指數(shù)方面看，PCT 均高于CRP 和WBC，這進(jìn)一步說(shuō)明PCT用于診斷新生兒血流感染的價(jià)值相對(duì)于CRP 和WBC 更高一些。此外，本研究血培養(yǎng)檢出菌以大腸埃希菌、表皮葡萄球菌、肺炎克雷伯菌為主，PCT 水平最高為肺炎克雷伯菌感染新生兒，其次為大腸埃希菌。王麗偉等［16］研究，在兒童血流感染中，致病菌以肺炎克雷伯菌、表皮葡萄球菌、白色假絲酵母菌最為多見(jiàn)，PCT 水平最高為鮑氏不動(dòng)桿菌，其次為腸桿菌和大腸埃希菌。這與本研究不完全一致，可能因?yàn)椴煌貐^(qū)致病菌有著自身的特點(diǎn)。

為進(jìn)一步驗(yàn)證PCT 在新生兒血流感染細(xì)菌鑒定中的應(yīng)用價(jià)值，將PCT 水平分為5 個(gè)層次［17］。從結(jié)果中可以看出，PCT ＜0.5 μg/L 感染革蘭陽(yáng)性菌的可能性較大；0.5 μg/L≤PCT ＜2.0 μg/L 不能明確區(qū)分細(xì)菌類型；PCT ≥2.0 μg/L 時(shí)感染革蘭陰性菌的可能性較大。目前沒(méi)有文獻(xiàn)表明PCT 升高的幅度能夠明確區(qū)分不同類型的細(xì)菌，但是可為早期診斷及治療提供臨床參考。

綜上所述，PCT 在新生兒血流感染診斷中相對(duì)于CRP、WBC 更有優(yōu)勢(shì)，可用于初步鑒別細(xì)菌感染類型，為早期診斷和治療提供參考依據(jù)，有較高的應(yīng)用價(jià)值。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突