山西某地區由出血性大腸桿菌引發麋鹿死亡的分析報告

張 卓，李金邦，孫樂天，霍占鎖

（太原動物園，山西 太原 030009）

大腸埃希氏菌（E.coli）通常稱為大腸桿菌，是埃希菌屬中的一類，為革蘭氏陰性無芽孢的直桿菌，兩端鈍圓、周身鞭毛，為兼性厭氧菌，常見于溫血生物的下腸。大腸桿菌廣泛分布在自然界，大多數是不致病菌，附生于腸道內為正常菌群。某些血清型的致病性強，大致分為5類：致病性大腸桿菌（EPEC）、腸產毒性大腸桿菌（ETEC）、腸侵襲性大腸桿菌（EIEC）、腸出血性大腸桿菌（EHEC）和腸黏附性大腸桿菌（EAEC）。其中，腸出血性大腸桿菌（Enterohemorrhagic E.coli，EHEC）是一種人畜共患病，被感染的病人、帶菌動物等均可傳播本病，較常見的易感動物為牛、羊、雞、狗、豬等家畜，也有從鵝、馬、鹿的糞便中分離出此菌的報道。出血性腸炎在我國大部分鹿類園區時有發生，成為對我國養鹿業威脅較大的傳染病之一[1]。

麋鹿（Elaphurus davidianus）隸屬偶蹄目（Artiodacty）鹿科（Cervidae）鹿亞科麋鹿屬，原產于中國長江中下游沼澤地帶。2021年2月份，山西某養殖鹿場死亡2只麋鹿，通過臨床癥狀和病理變化的分析，以及實驗室診斷等，明確死因，為今后麋鹿的飼養和疾病預防工作提供參考。

1 發病情況

該鹿區共飼養20頭麋鹿，分3個圈，發生疾病的是其中一個圈舍，內飼養有6頭麋鹿。據該場人員介紹，2021年2月12日上午突然發現兩只麋鹿狀態不佳，其中一只♂7歲麋鹿走路時出現跛行的癥狀；一只♀6歲麋鹿出現精神沉郁、少食的癥狀。后于13日及15日這兩只麋鹿先后出現不食，精神不振、頭垂地常臥、拉血便的癥狀，排泄物為帶有黏液和暗紅色血液的坨狀糞便。15日上午♀麋鹿死亡，20日上午♂麋鹿死亡。發病期間圈內剩余4只麋鹿精神狀態一般，采食較平日減少，但未發現拉血便情況。

2 剖檢情況

對病死的兩只麋鹿病理解剖時發現：

心臟明顯腫大、心冠脂肪處有少量出血點、心房內壁有出血點（圖1A）；

肝臟邊緣鈍圓，輕微腫大（圖1B）；

肺臟表面輕微出血；腎臟包膜不易剝離，質脆（圖1C），皮質與髓質間的邊界不清；腸系膜廣泛性點狀出血，淋巴結腫大；

小腸彌漫性出血壞死，內有血性內容物；部分腸段脹氣，小腸內容物呈暗紅色液體（圖1D）。

圖1 麋鹿尸體剖檢結果

3 實驗室診斷

3.1 細菌分離培養及鏡檢

在超凈工作臺內，無菌操作，使用接種環在心、肝、腎和腸道等病變組織取樣，劃線接種于血平板和中國藍瓊脂培養基（購于上海廣銳生物科技有限公司），于 37℃需氧條件下培養18～24 h，觀察菌落形態，相互對照后發現，菌落在血平板和中國藍培養基上均生長良好，血平板上出現圓形，稍凸，灰白色不透明菌落，在中國藍平板上出現藍色菌落，挑取單個菌落進行革蘭氏染色、鏡檢后，顯微鏡下可見細菌為革蘭氏陰性，菌體中等大小、兩端鈍圓短桿菌，基本符合腸出血性大腸桿菌的特點。

3.2 細菌生化特性鑒定

在超凈工作臺內，利用細菌微量生化反應管，對所分離的菌株進行生化指標測定。結果表明該細菌能分解葡萄糖乳糖與靛基質、鳥氨酸、賴氨酸、衛矛醇反應；不與苯丙氨酸、枸櫞酸鹽、尿素、硫化氫反應。這些生化鑒定結果與大腸桿菌生物學特征相符，表明該菌極有可能是出血性大腸桿菌。

3.3 藥敏試驗

3.3.1 方法

采用紙片擴散法，按K-B法要求操作，35℃溫箱中培養18～24h后，測抑菌圈直徑。判斷標準，參照K-B法藥敏試驗標準，抑菌圈直徑≧18mm者為敏感（S）；抑菌圈直徑13～17mm者為中敏（M）；抑菌圈直徑＜12mm者為耐藥（R）。

3.3.2 結果

實驗結果表明該分離株對頭孢噻肟和慶大霉素中敏，頭孢曲松、奧美拉唑和慶大霉素等敏感，詳見表1。

表1 腸出血性大腸桿菌對抗生素的敏感程度

4 治療

（1）由于病鹿于2月12日發現少食、精神沉郁，口服健胃消食片（4.8g/次），2次/d。飲水中添加電解多維（5g/10kg），喝完再續。

（2）母鹿于2月1 3日發現拉血便后單圈飼養，治療藥物更換為：肌內注射酚磺乙胺注射液（1.25g∕次），2次/d；肌內注射維生素k1注射液（50mg∕次），2次/d；肌內注射鹽酸林可霉素注射液（10mg∕kg），2次/d。由于病情較為嚴重，在及時治療的同時，采集帶血糞便進行實驗室檢查，但因病料從地面采集，污染嚴重，未培養出有效菌種。

（3）母麋鹿于2月14日，對其進行補液治療，靜脈滴注0.9%生理鹽水，輸液中添加鹽酸林可霉素注射液（10mg/kg），2次/d。并肌內注酚磺乙胺注射液（1.25g∕次），2次/d；維生素k1注射液（50mg/次），2次/d。

發現母麋鹿血便后，公麋鹿采取預防性治療，鹽酸林可霉素注射液（10mg∕kg），2次/d。

（4）母麋鹿病程較快，治療效果不佳，于2月15日死亡。采集心、肝、腎及腸道等病變組織重新進行細菌培養和藥敏試驗。

同時，為預防其他5只麋鹿不受感染，飲水中添加鹽酸土霉素可溶性粉（1g/500ml），飼料中添加電解多維（1g/kg）。也為減少治療期間麋鹿的應激反應。飼料也將苜蓿顆粒更換為易消化的谷草、槐樹葉和東北草。

2月18日，根據藥敏結果治療藥物更換為：肌內注射慶大霉素（400mg/次），2次/d；酚磺乙胺注射液（1.25g/次），2次/d；維生素k1注射液（50mg/次）， 2次/d。但治療效果欠佳，公麋鹿1月20日死亡。

5 討論

本病在我國自然保護區、野生動物場及動物園的斑馬、象、鹿中均有發生，被稱為“猝死癥”[3]。因此，早期發現，及時診斷和治療是控制該病的關鍵[4]。文中兩只麋鹿發生死亡，原因分析可能是早期癥狀不典型，未出現水樣腹瀉和出血性腸炎，對其重視程度不夠，錯過了治療的“黃金時期”，也可能是天氣寒冷食欲減退等多種原因混合引發。圈內剩余4只麋鹿由于治療及時，配合良好的飼養管理，均已好轉。

在飼養中要以預防為主，防重于治。具體的發病機制大體可以總結為4點：

多雨季節，雨水未及時清理，飲到不潔凈水；

季節溫差較大，氣溫驟變，如寒冷、炎熱、干燥等；

突然大量變換飼料種類或飼喂方法，如在北方冬草和青草的轉換上，應慢慢遞增或遞減；

有應激刺激如換舍，斷奶，換環境等。盡量避免上述發病原因，可以有效減少患病的幾率。

在診斷時，也應與產氣莢膜梭菌及巴氏桿菌引起的鹿出血性腸炎區分清楚，避免誤診。由于死亡速度較快，治療時抗生素的選擇需要根據藥敏試驗的結果。本報告中，藥敏試驗結果對頭孢噻肟和慶大霉素中敏，頭孢曲松、奧美拉唑和慶大霉素等敏感，而有些地區對養殖場送檢的病死動物進行細菌分離之后，阿米卡星的敏感度最高，與本實驗結果不同，原因分析可能是不同地區用藥不同導致的敏感性存在差異[5]，或是動物品種的不同導致敏感性也不盡相同。

EHEC主要會通過糞口途徑傳播，動物之間可以通過相互接觸、共食共飲污染的草、水等進行相互傳播，鳥類和禽類也是攜帶者。當懷疑或診斷出此類疾病后，首先選取針對性的方法進行消毒，可以減少患病動物與健康動物之間的傳播；我們使用1%的次氯酸鈉對運動場和食槽、水槽、糞便等重污染地區噴刷消毒，30分鐘后用清水沖洗干凈。因為消毒比較及時所以成效也明顯，對圈內剩余麋鹿并沒有造成感染和死亡。其次，將患病2只麋鹿放入隔離圈舍治療，也能有效地控制傳染源，減少動物應激，方便治療和投喂藥物。