尿毒清顆粒輔助治療早期糖尿病腎病對機體氧化/抗氧化平衡及血清LncRNA KCNQ1OT1、LncRNA Malat1的影響*

俞 華，梁從蝶，胡小華，俞 勇

上海市靜安區閘北中心醫院腎內科，上海 200040

近年來，糖尿病的發病率逐年升高，糖尿病患者機體長期處于高血糖狀態，可能誘發微血管病變，導致腎功能損傷，嚴重者甚至可誘發腎功能衰竭[1]。既往有研究顯示，終末期腎病患者中近30%為糖尿病腎病(DN)患者，其致病率僅次于慢性腎炎[2-3]。因此，及早診斷和治療早期DN，控制病情發展，對于改善患者預后有重要意義，目前臨床中對于早期DN患者的治療主要以改善生活方式、降壓、控糖、調脂等手段為主，雖具有一定臨床療效，但仍有部分患者難以獲得滿意的效果。LncRNA是細胞反應、發育和疾病進展中的重要調節因子，對于機體氧化應激、炎癥反應、腎小管上皮細胞凋亡也有具有作用，并參與了DN的發生與發展過程[4]。既往有研究指出，正常狀態下機體的氧化和抗氧化系統處于動態平衡中，若活性氧自由基過量，則抗氧化酶表達不足，導致氧化/抗氧化失衡，體內蓄積大量活性氧自由基，誘發細胞和組織損傷[5]。因此本研究通過了解氧化/抗氧化平衡及LncRNA KCNQ1重疊轉錄物1(KCNQ1OT1)、LncRNA 人肺腺癌轉移相關轉錄本(Malat1)水平變化，探討早期DN的常規治療效果，同時本研究在常規治療的基礎上采用尿毒清顆粒輔助治療，該藥具有通腑降濁、活血化瘀、健脾利濕的功效，可緩解炎癥反應，穩定腎功能，具有一定的臨床作用效果[6]。現分析報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2019年1月至2022年1月于本院就診的100例早期DN患者為研究對象，采用隨機數字表法分為觀察組和對照組，每組50例。觀察組中男30例，女20例；年齡47～69歲，平均(51.54±3.68)歲；體質量指數(BMI)在21～31 kg/m2，平均(26.49±3.24)kg/m2；糖尿病病程2～10年，平均(4.14±1.57)年。對照組中男32例，女18例；年齡48～70歲，平均(52.47±3.17)歲； BMI在21～31 kg/m2，平均(26.18±3.55)kg/m2，糖尿病病程2～10年，平均(4.37±1.61)年。兩組一般資料比較，差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

納入標準：(1)符合DN診斷標準，且Mogensen分期為Ⅲ期者；(2)年齡≥18歲者；(3)病程≥6個月者；(4)已經簽署知情同意書者。排除標準：(1)合并繼發性腎臟疾病者；(2)合并泌尿系統疾病者；(3)合并重要臟器功能障礙者；(4)有糖尿病并發癥者；(5)妊娠期或哺乳期者；(6)有藥物過敏史者；(7)有認知障礙或精神疾病者。

1.2方法 對照組給予常規治療，包括低鹽、低脂、優質蛋白飲食，配合適量運動，依據患者情況給予胰島素或降糖藥治療，并口服0.1 g/d的拜阿司匹林(廠家：拜耳醫藥保健有限公司；國藥準字：J20130078)和20 mg/d的阿托伐他汀鈣(廠家：輝瑞制藥有限公司；國藥準字：H20051408)，治療3個月。觀察組給予常規治療聯合尿毒清顆粒輔助治療，尿毒清顆粒輔助治療： 每天3次口服尿毒清顆粒(廠家：康臣藥業有限責任公司；國藥準字：H20150115)，每次5 g。兩組均治療3個月。

1.3觀察指標

1.3.1氧化和抗氧化指標 均于治療前1 d和治療后1 d采集兩組患者清晨空腹肘靜脈血3 mL，以3 000 r/min離心(半徑10 cm)15 min取上清液，使用放射免疫沉淀法檢測血清總抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、終末氧化蛋白產物(AOPP)、丙二醛(MDA)水平，試劑盒購自上海羽朵生物科技有限公司。

1.3.2腎功能 均于治療前1 d和治療后1 d采集兩組患者清晨空腹肘靜脈血3 mL，以3 000 r/min離心(半徑10 cm)15 min取上清液，使用全自動生化分析儀檢測血清同型半胱氨酸(Hcy)、胱抑素C(Cys C)、肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平。

1.3.3血糖指標 均于治療前1 d和治療后1 d采集兩組患者清晨空腹肘靜脈血3 mL，使用葡萄糖氧化酶法檢測空腹血糖(FPG)，使用糖化血紅蛋白儀檢測糖化血紅蛋白(HbA1c)水平。

1.3.4炎癥指標 均于治療前1 d和治療后1 d采集兩組患者清晨空腹肘靜脈血3 mL，以3 000 r/min離心(半徑10 cm)15 min取上清液，使用酶聯免疫吸附試驗檢測血清白細胞介素(IL)-1β、IL-6、C反應蛋白(CRP)水平。

1.3.5LncRNA KCNQ1OT1、LncRNA Malat1水平 均于治療前1 d和治療后1 d采集兩組患者清晨空腹肘靜脈血3 mL，以3 000 r/min離心(半徑10 cm)15 min取上清液，采用實時熒光定量PCR分析LncRNA KCNQ1OT1、LncRNA Malat1水平，試劑盒購自寶生物工程(大連)有限公司，KCNQ1OT1上游引物5′-CCCAGAAATCCACACCTCGG-3′，下游引物5′-TCCTCAGTGAGCAGATGGAGA-3′；LncRNA Malat1上游引物5′-CAGACCACCACAGGTTTA-CAG-3′，下游引物5′-AGACCATCCCAAAATGCTTCA-3′；GADPH上游引物5′-TGACTTCAACAGCGACACCCA-3′，下游引物5′-CACCCTGTTGCTGTAGCCAAA-3′。

1.3.6臨床療效 24 h尿蛋白定量、血糖均為正常范圍，或24 h尿蛋白定量下降超過1/2、血糖下降超過1/3，各臨床癥狀及體征基本消失為顯效；24 h尿蛋白定量、血糖均未達到顯效的標準，各臨床癥狀及體征明顯好轉為有效；24 h尿蛋白定量、血糖、各臨床癥狀及體征無明顯變化甚至加重為無效；總有效率=顯效率+有效率。

1.3.7不良反應 統計并比較兩組胃腸反應、乏力、頭暈的發生率。

2 結 果

2.1治療前后兩組氧化/抗氧化指標水平比較 與治療前1 d比較，治療后1 d兩組T-AOC、SOD、CAT水平均升高，且觀察組高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)；治療后，兩組AOPP、MDA水平均降低，且觀察組低于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 治療前后兩組氧化/抗氧化指標水平比較

2.2治療前后兩組腎功能指標水平比較 與治療前1 d比較，治療后1 d兩組腎功能指標水平均降低，且觀察組低于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)，見表2。

組別nAOPP(μmol/L)治療前1 d治療后1 dMDA(μmol/L)治療前1 d治療后1 d觀察組5035.89±4.8720.41±1.12a15.32±1.789.01±1.02a對照組5035.42±5.2625.78±2.14a15.78±1.3611.47±1.54at1.9262.5731.7832.489P0.0630.0110.0790.025

2.3治療前后兩組血糖指標水平比較 與治療前1 d比較，治療后1 d兩組血清FPG、HbA1c水平均降低，且觀察組低于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)，見表3。

表2 治療前后兩組腎功能指標水平比較

表3 治療前后兩組血糖指標水平比較

2.4治療前后兩組炎癥指標水平比較 與治療前1 d比較，治療后1 d兩組血清IL-1β、IL-6、CRP水平均降低，且觀察組低于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)，見表4。

表4 治療前后兩組炎癥指標水平比較

2.5治療前后兩組LncRNA KCNQ1OT1、LncRNA Malat1水平比較 與治療前1 d比較，治療后1 d兩組LncRNA KCNQ1OT1、LncRNA Malat1水平均降低，且觀察組低于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)，見表5。

表5 治療前后兩組LncRNA KCNQ1OT1、LncRNA Malat1水平比較

2.6兩組臨床療效比較 觀察組臨床有效率為96.00%，高于對照組的82.00%，差異有統計學意義(P<0.05)，見表6。

表6 兩組臨床療效比較[n(%)]

2.7兩組不良反應發生率比較 觀察組不良反應發生率為10.00%，對照組不良反應發生率為12.00%，兩組比較差異無統計學意義(P>0.05)，見表7。

表7 兩組不良反應發生率比較[n(%)]

3 討 論

DN的基本病理變化為腎小球基底膜增厚和基質增生，患者主要表現出尿液內蛋白量升高、身體水腫、腎功能排泄紊亂等臨床癥狀[7]。目前世界范圍內1億多人口患有糖尿病，其中42%的患者可隨病情的進展而發生腎臟疾病，加重腎臟負荷[8]。而糖尿病患者進展為DN患者的發病機制相對復雜，據報道與糖代謝異常、遺傳、多元醇通路激活、氧化應激等多種因素均存在密切相關，且各因素相互作用會加劇病情嚴重程度，誘發腎功能衰竭，甚至導致患者死亡[9-10]。因DN患者復雜的發病機制，僅憑西藥治療無法有效控制其病情發展，因此考慮給予患者中西醫結合療法，考慮DN患者的病理機制特點為外體虛弱，內里實火，病情發展與各臟腑均存在密切相關，因此中醫學認為治療DN患者應當以消炎消腫、清熱解毒、祛濕利尿為主，因此本研究輔以患者尿毒清顆粒治療，以期能改善臨床療效[11-12]。

尿毒清顆粒內含大黃、桑白皮、黃芪、白芍、茯苓、丹參、白術、車前草、苦參、何首烏等藥物，其中大黃可瀉熱通腸、逐瘀通經、解毒涼血，桑白皮可利水消腫，黃芪可利水消腫、補氣固表、排毒祛濃，白芍可平肝止痛、斂陰止汗，茯苓可健脾滲濕、利水消腫，丹參可通經止痛、活血祛瘀，白術可健脾益氣、燥濕利水，車前草可清熱解毒、利水消腫，苦參可清熱解毒、利尿燥濕，何首烏可補肝益腎、益精血，因此尿毒清顆粒內諸藥共同發揮健脾利濕、活血化瘀、清熱解毒的功效[13-14]。本研究結果顯示，與治療前1 d比較，治療后1 d兩組T-AOC、SOD、CAT水平均升高，且觀察組高于對照組(P<0.05)；兩組AOPP、MDA、腎功能指標、血清FPG、HbA1c、IL-1β、IL-6、CRP、LncRNA KCNQ1OT1、LncRNA Malat1水平均降低，且觀察組低于對照組(P<0.05)。氧化/抗氧化平衡為腎臟組織結構重要的病理緩解過程，若該平衡失衡，則會導致腎組織損傷，T-AOC、SOD、CAT、AOPP、MDA為臨床常用的氧化產物和抗氧化指標，其水平的高低能夠反映出氧化/抗氧化平衡情況[15-16]。因此，本研究結果提示尿毒清顆粒可幫助改善氧化/抗氧化平衡，減少DN患者體內氧化產物的生成，提高機體的抗氧化能力，緩解患者的氧化應激反應。同時有研究指出，LncRNA KCNQ1OT1在糖尿病患者和糖尿病小鼠心臟組織內均呈現高表達，其可促進血管生成，促進細胞增殖，相反敲除LncRNA KCNQ1OT1則可誘導細胞凋亡，抑制細胞增殖[17-18]。本研究結果與既往研究結果相似[19]，提示LncRNA KCNQ1OT1可能會加速DN患者病情進展，臨床中可通過抑制LncRNA KCNQ1OT1高表達而抑制DN病情進展。而LncRNA Malat1為miR-23c的靶基因，LncRNA Malat1高表達會降低細胞內miR-23c的表達，導致焦磷酸化相關蛋白表達上調，促進機體釋放大量炎癥因子，誘發炎癥反應，因此調控LncRNA Malat1表達可通過緩解炎癥反應而延緩DN病情進展[20]。本研究中觀察組聯合應用尿毒清顆粒治療后患者LncRNA KCNQ1OT1、LncRNA Malat1水平降低，炎癥反應緩解，氧化/抗氧化平衡改善，進而改善了臨床療效。且觀察組和對照組的不良反應發生率比較，差異無統計學意義(P>0.05)，提示聯合尿毒清顆粒治療安全性較好。

綜上所述，尿毒清顆粒輔助治療早期DN可通過調控氧化/抗氧化平衡降低LncRNA KCNQ1OT1、LncRNA Malat1水平，改善血糖水平和腎功能，抑制炎癥反應，改善臨床療效，且不良反應少。