不同情況淋巴瘤患者血清LDH、β2-MG、IL-2R及IL-10水平變化及臨床意義

曾文興，萬 穎，敖繼紅

江西省宜春市人民醫院檢驗科，江西宜春 336000

淋巴瘤原發于淋巴結或其他淋巴組織，發病率呈上升趨勢，是嚴重威脅人類健康的惡性腫瘤[1]。淋巴瘤分為B細胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)、T細胞非霍奇金淋巴瘤(T-NHL)和霍奇金淋巴瘤(HL)。有研究表明，EB病毒(EBV)的潛伏膜蛋白、核抗原1、編碼的小RNA蛋白被激活時，與淋巴瘤的發生、發展存在密切關系，并影響淋巴瘤的轉歸[2]。隨著研究的深入，近年來發現越來越多的血清標志物與腫瘤發病密切相關，而某些靈敏度及特異度較高的血清標志物對臨床診斷、療效及預后的評估至關重要。其中β2微球蛋白(β2-MG)與乳酸脫氫酶(LDH)在淋巴瘤診斷中的意義越來越受到重視[3]；而國外研究表明，細胞因子具有細胞信號轉導、促炎癥和免疫調節功能，其中白細胞介素(IL)-2R表達異常與淋巴瘤的發生、發展相關[4]。因此，淋巴瘤作為人體免疫系統的惡性腫瘤，血清標志物LDH、β2-MG、IL-2R、IL-10水平與EBV感染相關淋巴瘤及其組織免疫學類型發生、發展等的關系值得研究。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018-2021年于本院確診的50例淋巴瘤患者作為淋巴瘤組，其中男32例，女18例；年齡23～76歲；HL患者3例作為HL組，B-NHL患者34例作為B-NHL組，T-NHL患者13例作為T-NHL組；臨床分期Ⅰ～Ⅱ期15例，Ⅲ～Ⅳ期35例；存在EBV感染者35例作為EBV+組，不存在EBV感染者15例作為EBV-組；有骨髓浸潤34例，無骨髓浸潤16例。選取同期體檢健康者20例作為對照組，其中男12例，女8例；年齡32～70歲。淋巴瘤組和對照組年齡、性別比較，差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。淋巴瘤納入標準：(1)經病理組織或細胞學確診；(2)患者年齡≥18歲。排除其他惡性腫瘤，溶血，心、肝、腎功能嚴重損傷，肝硬化，免疫性疾病等。本研究經本院醫學倫理委員會批準，所有受試者均知情同意。

1.2儀器與試劑 LDH和β2-MG檢測試劑購自寧波美康生物科技有限公司；IL-2R和IL-10檢測試劑購自青島瑞斯凱爾生物科技有限公司；ADVIA2400全自動生化分析儀購自美國西門子公司；流式細胞儀購自美國BD公司。

1.3檢測方法 采集受試者空腹靜脈血3 mL，室溫靜置20 min，以3 000 r/min離心10 min，分離血清。LDH采用速率法檢測，β2-MG采用膠乳增強免疫透射比濁法檢測，IL-2R和IL-10采用免疫熒光法檢測。

1.4治療方案 NHL患者接受CHOP方案(靜脈推注環磷酰胺750 mg/m2，第1天；靜脈推注長春新堿1.4 mg/m2，第1天；靜脈滴注阿霉素50 mg/m2，第1天；口服醋酸潑尼松100 mg/m2，第1～5天，21 d為1個周期，療程間隔3周)，HL患者接受ABVD方案(靜脈推注阿霉素25 mg/m2，第1及第15天；靜脈推注博萊霉素10 mg/m2、長春堿6 mg/m2、達卡巴嗪375 mg/m2，療程間隔2周)，并結合放療治療；2個周期后觀察患者血清LDH、β2-MG、IL-2R和IL-10水平變化。

2 結 果

2.1淋巴瘤組與對照組血清LDH、β2-MG、IL-2R、IL-10水平比較 與對照組比較，淋巴瘤組血清中LDH、β2-MG、IL-2R及IL-10水平升高(P<0.05)。見表1 。

表1 淋巴瘤組與對照組血清LDH、β2-MG、IL-2R、IL-10水平比較

2.2血清LDH、β2-MG、IL-2R、IL-10水平在不同EBV狀態淋巴瘤患者中的比較 與EBV-組比較，EBV+組血清LDH、IL-2R、β2-MG水平升高(P<0.05)，但IL-10水平差異無統計學意義(P>0.05)。見表2。

表2 血清LDH、β2-MG、IL-2R、IL-10水平在不同EBV狀態淋巴瘤患者中的比較

2.3血清LDH、β2-MG、IL-2R、IL-10水平在不同組織免疫學類型淋巴瘤患者中的比較 與對照組比較，T-NHL、B-NHL、HL組血清LDH、β2-MG、IL-2R及IL-10水平升高(P<0.05)；但T-NHL、B-NHL、HL組血清LDH、β2-MG、IL-2R、IL-10水平比較，差異無統計學意義(P>0.05)。見表3。

表3 血清LDH、β2-MG、IL-2R、IL-10水平在不同組織免疫學類型淋巴瘤患者中的比較

2.4血清LDH、β2-MG、IL-2R、IL-10水平在不同臨床分期淋巴瘤患者中的比較 與臨床分期Ⅰ～Ⅱ期患者比較，Ⅲ～Ⅳ期患者血清LDH、β2-MG、IL-2R水平升高(P<0.05)，但IL-10水平差異無統計學意義(P>0.05)，見表4。

表4 血清LDH、β2-MG、IL-2R、IL-10水平在不同臨床分期淋巴瘤患者中的比較

2.5血清LDH、β2-MG、IL-2R、IL-10水平在不同骨髓浸潤情況淋巴瘤患者中的比較 與無骨髓浸潤患者比較，有骨髓浸潤患者血清LDH、β2-MG、IL-2R水平明顯升高(P<0.05)，但IL-10水平差異無統計學意義(P>0.05)，見表5。

表5 血清LDH、β2-MG、IL-2R、IL-10水平在不同骨髓浸潤情況淋巴瘤患者中的比較

2.6血清LDH、β2-MG、IL-2R、IL-10水平在淋巴瘤患者治療前、后的比較 與治療前比較，治療后血清LDH、β2-MG、IL-2R、IL-10水平降低(P<0.05),見表6。

表6 血清LDH、β2-MG、IL-2R、IL-10水平在淋巴瘤患者治療前、后的變化

組別nIL-2R(U/mL)治療前治療后IL-10(pg/mL)治療前治療后淋巴瘤組503 112.56±1127.09825.5±130.21a77.33±13.0825.37±11.76aEBV+組353 692.92±981.391 677.56±526.36a81.85±14.3934.12±14.56aEBV-組152 068.45±617.11607.25±113.36a74.25±4.7116.75±9.63a

3 討 論

淋巴瘤是嚴重危害人體健康的惡性腫瘤之一，常以淺表淋巴結無痛性進行性腫大或伴發熱、消瘦及肝脾腫大為表現。研究發現EBV基因組的相對高拷貝性、EBV的持續潛伏感染等均是致瘤的重要因素，與HL、伯基特淋巴瘤、彌漫大B細胞淋巴瘤、結外NK/T細胞淋巴瘤、外周T細胞淋巴瘤(非特指型)及血管免疫母T細胞淋巴瘤等的發生、發展密切相關[5]。原因[6]：(1)曾經患傳染性單核細胞增多癥的人群HL發病風險是健康人群的4倍；(2)EBV包膜抗原抗體效價上升；(3)淋巴瘤細胞中證實存在單克隆性的EBV附加體。(4)大多數淋巴瘤細胞中存在克隆游離的EBV。目前淋巴瘤EBV感染患者實驗室檢查僅表現為血清C-反應蛋白升高及白細胞、血小板、血紅蛋白降低等，結果缺乏特異性[7]。隨著研究的深入，某些靈敏度及特異度較高的指標對疾病的診斷、療效及預后的評估至關重要。

LDH是一種糖酵解酶，在無氧酵解和糖異生中發揮重要作用。有研究認為惡性腫瘤患者LDH水平升高的原因為腫瘤細胞的糖酵解速度高于健康人群，且糖酵解會導致多種酶活性改變，而作為糖酵解重要酶類的LDH活性也隨之升高，由于惡性腫瘤細胞的代謝加快及細胞膜通透性改變等，導致癌組織酶釋放至血液，從而破壞了血液循環中酶的正常動態平衡，使患者血清LDH水平升高[8]。在本研究中，淋巴瘤組血清LDH水平高于對照組(P<0.05)，EBV+患者血清LDH水平高于EBV-患者(P<0.05)，臨床分期Ⅲ～Ⅳ期患者血清LDH水平高于Ⅰ～Ⅱ期患者(P<0.05)，有骨髓浸潤患者血清LDH水平高于無骨髓浸潤患者(P<0.05)，治療后淋巴瘤患者LDH水平較治療前降低(P<0.05)，但在不同組織免疫學類型淋巴瘤患者中LDH水平無明顯差異(P>0.05)。分析原因可能與淋巴瘤細胞酵解酶系統活躍有關，特別是EBV影響酶代謝系統，使LDH酶活性升高，但其具體機制尚不十分明確；隨著病情進展，淋巴瘤細胞大量增殖浸潤，影響其他正常組織的代謝及造成組織細胞溶解破壞，廣泛病變者LDH水平高于局限病變者，說明病情加重；當有效治療后，大量淋巴瘤細胞被殺傷，酶活性減低，說明病情穩定。因此本研究提示淋巴瘤患者血清LDH水平與淋巴瘤負荷、分期、骨髓浸潤及EBV感染有關，也是判斷療效及預后的一項重要指標，但不能反映淋巴瘤組織免疫學類型。有研究表明LDH水平提示惡性程度，惡性程度越高，血清LDH水平越高；LDH水平與腫瘤分期有關，分期越晚，血清LDH水平越高；LDH水平與結外轉移相關，侵犯肝、脾及骨髓患者血清LDH水平升高；LDH水平與NHL腫瘤負荷有關[9]。

β2-MG主要由淋巴細胞產生，是細胞膜上完整組織相容性抗原的一部分，能夠透過腎小球濾過膜，被近曲小管重吸收。近年研究報道顯示，腫瘤細胞和淋巴細胞均可產生大量的β2-MG，且植物血凝素能夠加速這一合成過程[10]。在本研究中，淋巴瘤組血清β2-MG水平高于對照組(P<0.05)，臨床分期Ⅲ～Ⅳ期患者血清β2-MG水平高于Ⅰ～Ⅱ期患者(P<0.05)，有骨髓浸潤患者血清β2-MG水平高于無骨髓浸潤患者(P<0.05)，治療后淋巴瘤組β2-MG水平較治療前降低(P<0.05)，EBV+患者β2-MG水平高于EBV-患者(P<0.05)，在不同組織免疫學類型淋巴瘤患者中β2-MG水平無明顯變化(P>0.05)。分析原因為β2-MG是有核細胞膜可溶性成分，且淋巴瘤細胞本身可以合成及分泌大量β2-MG，但其具體機制尚不十分明確，可能與細胞周轉增加有關；并與EBV感染相關；隨著病情進展，淋巴瘤細胞大量增殖浸潤，造成組織細胞溶解破壞，廣泛病變者β2-MG水平高于局限病變者，說明病情加重；當有效治療后，大量淋巴細胞被殺傷，β2-MG合成及分泌減少，說明病情穩定。因此本研究提示血清β2-MG水平與淋巴瘤負荷、分期、骨髓浸潤及EBV感染有關，也是判斷療效及預后的一項重要指標，但不能反映淋巴瘤組織免疫學類型。有研究表明淋巴瘤、淋巴增殖性疾病等的β2-MG水平升高，提示病情惡化，治療后β2-MG水平降低往往提示病情趨向穩定，其結外浸潤的傾向更大，提示血清β2-MG水平測定不僅是惡性腫瘤診斷的重要指標之一，其動態監測還是療效觀察和判斷預后的重要指標之一[3]。

細胞因子包括IL、干擾素、腫瘤壞死因子及各種造血相關細胞因子，由腫瘤細胞和周圍的免疫細胞產生，在調節免疫的關鍵途徑中起重要作用，在多種血液惡性腫瘤包括淋巴瘤中細胞因子的表達失調，并且使機體處于持續的炎癥環境，影響腫瘤和基質細胞的存活和增殖。有研究表明一些細胞因子水平的升高可作為侵襲性淋巴瘤的標志物[11]。

IL-2R是一種免疫抑制物，研究表明與免疫功能紊亂有關的疾病如惡性腫瘤，IL-2R可在其細胞中持續存在或表達紊亂，可能在惡性腫瘤環境中扮演重要角色[12]。在本研究中，淋巴瘤組血清IL-2R水平高于對照組(P<0.05)，EBV+患者血清IL-2R水平高于EBV-患者(P<0.05)，臨床分期Ⅲ～Ⅳ期患者血清IL-2R水平高于Ⅰ～Ⅱ期患者(P<0.05)，有骨髓浸潤患者血清IL-2R水平高于無骨髓浸潤患者(P<0.05)，治療后淋巴瘤患者IL-2R水平較治療前明顯降低(P<0.05)，在不同組織免疫學類型淋巴瘤患者中IL-2R水平無明顯變化(P>0.05)。分析原因為IL-2R作為膜受體的一部分，在淋巴瘤細胞中持續存在或表達紊亂，特別是EBV感染的淋巴瘤細胞可使IL-2R水平升高，且延長IL-2R的半衰期，但其具體機制尚不十分明確，可能與人類嗜T淋巴細胞瘤1的PX基因產物相關；隨著病情進展，淋巴瘤細胞大量增殖浸潤，其膜受體IL-2R水平與淋巴瘤細胞呈正相關，說明病情惡化；當有效治療后，大量淋巴細胞被殺傷，IL-2R水平降低，說明病情穩定。因此本研究提示血清IL-2R水平可以反映淋巴瘤負荷、分期、骨髓浸潤，也是判斷療效及預后的一項重要指標。

IL-10通過抑制促炎細胞因子分泌而具有較強的免疫抑制作用，還可通過誘導B細胞的增殖和分化產生免疫刺激效應[13]。本研究表明，淋巴瘤組血清IL-10 水平高于對照組(P<0.05)，治療后淋巴瘤組IL-10水平較治療前降低(P<0.05)，但在不同組織免疫學類型、臨床分期、有無骨髓浸潤的淋巴瘤患者比較中，血清IL-10水平無明顯差異(P>0.05)。分析原因可能為免疫功能紊亂的淋巴瘤患者，特別是EBV感染免疫功能低下的兒童或老年患者，可能對淋巴瘤細胞的免疫性清除功能減弱，腫瘤細胞使機體持續處于炎癥環境，刺激機體免疫細胞分泌IL-10，使IL-10水平升高；當有效治療后，大量淋巴瘤細胞被殺傷，機體炎癥刺激減輕，免疫細胞分泌IL-10減少，說明病情穩定。因此本研究提示血清IL-10水平可以反映淋巴瘤負荷，是判斷療效及預后的一項重要指標。有研究表明IL-10水平升高在惡性腫瘤的發生、發展中起重要作用，可能是機體對腫瘤的一種免疫反應，由激活的免疫細胞產生，并非源于腫瘤細胞，其確切機制不明[14]。

一種腫瘤可含多種腫瘤標志物，通過選擇特異性腫瘤標志物或最佳組合進行檢測有利于惡性腫瘤的早期篩查，病情監測及對腫瘤治療療效、復發轉移和預后的判斷。本研究結果顯示，在不同組織免疫學類型的淋巴瘤患者中，血清LDH、β2-MG、IL-2R及IL-10水平無明顯差異，而LDH和β2-MG、IL-2R均反映了腫瘤的負荷、分期、骨髓浸潤、EBV感染程度及療效預后，IL-2R 及IL-10反映了免疫功能狀況。因此，監測血清LDH、β2-MG、IL-2R水平的變化對淋巴瘤患者的輔助診斷、臨床分期、療效、預后及EBV感染評估具有重要的臨床價值。