法醫(yī)物證學DNA實驗室質量控制分析

畢節(jié)黔蘇博醫(yī)學檢驗所有限公司法醫(yī)司法鑒定所 張琴，王躍新，葛傳龍

在高等醫(yī)學院專業(yè)課程的建設中，法醫(yī)物證學是基礎課程，體現(xiàn)出DNA分型的核心點地位，現(xiàn)階段在教學質量持續(xù)提升的背景下，法醫(yī)物證學DNA實驗室管理工作備受關注，怎樣科學的利用實驗室現(xiàn)有資源，增強學生綜合實踐能力，讓相關學生可以更好地服務于社會，這是一個比較關鍵的問題。在具體的DNA實驗室質量管理上，相關人員要制定行之有效的控制方案，不斷推動實驗室建設進程，具體如下。

一、法醫(yī)物證學DNA實驗室質量控制的一般原則與控制標準

（一）一般原則

（1）技術應用原則。從一定層面上而言，實驗室質量控制過程中，應該遵循技術應用原則，利用技術應用原則，具體規(guī)定DNA實驗室相關實驗模式以及檢驗環(huán)節(jié)，包含檢測工作者應該擁有較強的知識技能，可以把全新的檢測方法運用在檢驗工作中。可是現(xiàn)階段法醫(yī)物證學DNA實驗室應用的技術類型比較多，人員自身的素質和能力良莠不齊，不能充分體現(xiàn)出DNA鑒定結果的真實性，所以要強化人員培訓以及信息數(shù)據(jù)的溝通，有效運用法醫(yī)物證學DNA技術管理原則[1]。（2）法律原則。在控制法醫(yī)物證學DNA實驗室質量過程中，生活人員應進行高精度的研究， DNA研究流程應滿足國家制定的法律規(guī)定。換言之，不管是物證檢驗還是樣本數(shù)據(jù)采集，都應該和法律規(guī)定相匹配，DNA信息鑒定應備受法律規(guī)定的肯定以及認同。現(xiàn)階段法醫(yī)物證學DNA實驗室質量控制的過程中，缺乏相對完善的法律規(guī)定，難以保障實驗室質量管理存在可操作性，因此需要進行DNA研究鑒定單位的從業(yè)技術法規(guī)完善，使得法醫(yī)物證學DNA實驗室質量工作能夠有法必依[2]。

（3）道德素質原則。在法醫(yī)物證學DNA實驗室質量控制中，全部的DNA研究環(huán)節(jié)應體現(xiàn)出倫理性標準，對一個人的隱私進行完整保護。DNA實驗檢測時，相關人員不可以擅自進行基因重組實驗，擁有較強的環(huán)境保護意識是實驗室工作者必備的素質，所以若缺少良好的實驗室環(huán)境，是有可能污染到實驗室的，所以實驗室工作者應保證實驗室環(huán)境干凈整潔，不要由于放射性物質和有毒物質對實驗室環(huán)境帶來污染，從而減少法醫(yī)物證學DNA實驗室檢驗項目對人體帶來的傷害。

（二）控制標準

（1）人員管理。總體來講，實驗室工作者涉及實驗人員、技術控制者、檢驗工作者和后勤人員。實驗室工作者應該接受對應的實驗操作培訓，加入法醫(yī)物證學DNA分享檢測的資格考試[3]。技術控制者要獲得相關的學歷、學位，同時具備法醫(yī)物證學DNA實驗室工作經(jīng)驗至少三年。檢驗工作者應該在實驗室工作超過六個月，后勤人員要參與對應的技能培訓，如此完善法醫(yī)物證學DNA實驗室質量控制的人員管理標準，促進實驗室管理工作進展。（2）儀器設備管理。實際的法醫(yī)物證學DNA實驗室質量控制工作，需要減小實驗室受到的污染，不要引導無關人員和實驗室接觸，恰當?shù)姆蛛xDNA擴增項目以及DNA提取項目。實驗室管理中，配備相對完整的管理機制，完整收集實驗數(shù)據(jù)，有效地進行實驗數(shù)據(jù)編號，以免出現(xiàn)混淆現(xiàn)象。實驗室的管理要遵照書面程序，強化儀器設備的保養(yǎng)效率，實現(xiàn)全方位的儀器設備管理工作[4]。（3）研究檢驗管理。法醫(yī)物證學實驗室質量控制工作，相關人員應該運用已經(jīng)得到審核的有效檢驗模式，按照檢驗技術應用的注意要點，切合實際地處理實驗樣品和DNA檢測數(shù)據(jù)，實驗室質量管理上，及時準備好測試樣品，提高DNA信息提取的有效性，利用相關檢測方法保證實驗室檢驗效率。

（4）多種類型的檔案管理。在實驗室檔案管理中納入DNA項目檢驗的程序、記錄人群基本信息，尤其是民族信息和數(shù)據(jù)來源。保證實驗室檔案記錄中體現(xiàn)統(tǒng)一的類別，利用DNA技術分型判斷標準，強調(diào)實驗室的保存條件結合標準規(guī)定，研究DNA檢測樣品的數(shù)據(jù)類型，體現(xiàn)實驗室檢驗工作的質量。在儀器設備的運用上，保持檢驗設備性能良好，工作者對儀器設備的使用情況進行統(tǒng)計，涉及清潔情況、保養(yǎng)情況和維護情況，給DNA檢驗提供更好的條件支持[5]。DNA實驗檢測中，需要得到國家法定技術標準，合理地進行科研成果轉化。圍繞設備制造商提供的信息數(shù)據(jù)完善項目指導書，實驗室擁有全部檢驗項目的操作手冊，不相同的DNA檢驗方法應涉及不同的靈敏度，所以要通過科學可靠的方式，嚴選微量物證檢驗范圍，體現(xiàn)法醫(yī)物證學DNA實驗室數(shù)據(jù)處理的及時性，統(tǒng)計相關表格，確保DNA實驗室檢驗工作，保證儀器設備良好的性能、要求指標和實驗室安全操作指標。

二、影響DNA實驗室檢驗質量的因素

法醫(yī)物證學DNA實驗室檢驗工作，主要進行的是DNA檢驗項目，針對物證污染，也就是在相關人員犯罪之后，物證物品在外部環(huán)境的影響下，造成鑒定結果失真。含有DNA的人物組織離開原有的生物體之后，很有可能被其他物質所污染，降低DNA研究結果的可信度。總體來講，影響DNA實驗室檢驗質量的因素包括幾點：首先是DNA采集受到污染、外源性物質污染到DNA的質量。發(fā)生案件的現(xiàn)場，由于外部環(huán)境的作用，促使物證原有的位置出現(xiàn)變動，那么工作者要全面掌握環(huán)境影響因素，提高DNA樣品保護的力度[6]。在外源性物質污染的影響下，比如DNA取證工作者沒有及時保護好DNA的完整性，摻雜外部物證，此種情況下要在最短時間內(nèi)完善DNA實驗室質量管理資料，細致化甄別和篩選。

其次是物證包裝不夠恰當，沒有規(guī)范地對DNA進行送檢保管。造成人員傷亡的工具以及毛發(fā)，DNA取證人員并沒有進行一體化包裝，引出物證包裝不夠恰當?shù)膯栴}，對應工作者應固定好相關工具，對物證進行科學的包裝和保護。針對DNA送檢保管不夠恰當?shù)膯栴}，比如包裝碎裂，工作者應規(guī)范化晾干DNA樣品，妥善固定好樣品的存在形式，促進DNA實驗室檢驗工作。

再次是檢驗DNA的過程不夠清晰，檢驗設備出現(xiàn)故障。工作者需要進行實驗分區(qū)劃分，把特殊的材料放在特殊區(qū)域中實施檢驗，分開比對案件物證和DNA樣本，把檢驗的數(shù)據(jù)結果傳遞給上級鑒定單位，在嚴格審核之后，把DNA檢驗的結果納入數(shù)據(jù)庫[7]。要想規(guī)避檢驗設備出現(xiàn)故障，檢驗人員應規(guī)范的保存的樣本，利用儀器設備進行溫度測量和濕度測量，合理檢驗設備運作過程，完成DNA檢驗工作的陰性對比和陽性對比研究。

最后是PCR過程污染，難以保證審核的及時性。對于PCR過程污染現(xiàn)象，尤其是非生物樣本的污染情況以及自身遺傳物質的交叉污染情況，工作者要及時消毒和處理，實施分區(qū)檢驗的要點，比較陰陽對照數(shù)據(jù)，時效性處理DNA樣本。對于審核過程不夠及時的問題，工作者應按照行政標準以及技術標準進行針對話審核，必要情況下再次檢驗DNA樣本的信息，全部工作者一同討論復核，優(yōu)化法醫(yī)認證學DNA實驗室質量控制規(guī)程[8]。需要注意的是，DNA實驗室質量管理中，加大力度進行外部專業(yè)單位驗證也是十分可行的措施，實驗室質量管理要和科研院所進行適當合作，增強DNA檢驗的綜合效果。

三、提高法醫(yī)物證學DNA實驗室質量控制效率的途徑

（一）重視優(yōu)化人員組成結構

總體而言，實驗室質量控制中，人員是決定檢測結果是否真實可靠的關鍵因素，新時期下需要對實驗室工作者的技術能力進行充分指引，利用教育培訓活動，提高工作者對法醫(yī)物證學DNA實驗室質量控制工作的關注度。實驗室質量管理中，需要安排具備專業(yè)知識技能與職業(yè)素養(yǎng)的工作者從事此項工作，DNA實驗室檢測要保持公平公正的理念，做到精準而嚴格，不可以有半點馬虎。統(tǒng)計工作者的專業(yè)技能以及工作經(jīng)歷，記錄工作者的上崗考核成績與培訓信息，在人員結構的優(yōu)化上，強調(diào)領導層以及技術層工作者的決策能力，從而制定理想化的DNA實驗室質量管理方案，每一個人都要認真地投入工作項目，促進法醫(yī)物證學DNA實驗室檢驗工作的創(chuàng)新[9]。

（二）提高檢驗設備的性能

結合法醫(yī)物證學DNA實驗室檢驗工作的實際情況，管理者應及時選取高性能的檢驗設備，包含電子天平、直續(xù)光譜以及光度計等，設備的性能與操作工作者的工作態(tài)度以及設備所處環(huán)境條件，均會影響到法醫(yī)物證學DNA實驗室質量管理的效果，操作工作者要嚴謹執(zhí)行自己的本職工作，遵照規(guī)章制度對設備進行保養(yǎng)，增加DNA檢測設備的運用壽命，還要提高DNA檢測設備的精準度。工作者關注儀器設備的校正，檢驗儀器設備性能期間要圍繞國家制定的計量檢定規(guī)程，關注設備已具備的靈敏度指標、分辨率指標、靈敏度指標和標準物質選取指標，分析和DNA檢驗質量存在關系的因素，通過檢驗設備的性能最大化保障法醫(yī)認證學DNA實驗室檢測質量。

（三）創(chuàng)新DNA檢驗的方法

（1）有效選取檢驗方法。在法醫(yī)認證學DNA的實驗室檢驗過程中，工作者應有效選取檢驗方法，充分發(fā)揮DNA檢驗的重要作用。相關人員研究檢驗方法的物理性質，包含材質的類型以及DNA狀態(tài)，實現(xiàn)標準化分類。并且初步研究化學性質，注意不要由于偏差造成DNA檢驗結果的失誤，適當運用控制圖體系記錄和評估過程質量特性，確保DNA檢驗工作的真實有效。另外，把檢驗的結果保存在信息庫中，判斷個別離群值的有效性，通過定量研究的方法多次測定檢驗信息，計算平均數(shù)值。多次研究信息都需要納入平均值，在工作者發(fā)現(xiàn)存有特大值以及特小值的情況下，要及時排除相關數(shù)值，以免影響DNA檢驗結果的真實性[10]。

（2）內(nèi)化樣品檢驗過程。在法醫(yī)認證學院DNA實驗室質量管理中，需要高度重視樣品檢驗過程，促使單一檢測樣品的機制和控制樣品的特征基本相同，體現(xiàn)檢驗樣品的性質指標在可控范圍內(nèi)。實驗室通過多種類型的控制樣品提高實驗室質量控制的效果，適當運用有證標準物質研究DNA檢測結果出現(xiàn)的偏差，通過標準樣品對DNA檢測的過程進行指標統(tǒng)計，在多次檢測DNA樣品之后，研究檢驗結果之間的統(tǒng)一性，一旦出現(xiàn)檢驗結果誤差的情況，要及時改正DNA檢驗的方法，確保DNA檢驗數(shù)據(jù)具備參考價值。

（3）充分保障DNA樣品的質量。法醫(yī)物證學DNA實驗室質量控制中，最為關鍵的環(huán)節(jié)是保證DNA樣品的質量，樣品應該具有代表性，推動實驗項目的進展，所以要對DNA取樣以及DNA制樣過程準備提出嚴格標準，相關人員不可以隨意地省略DNA檢驗過程。制作樣品期間，嚴格管理好空氣因素、溫度因素和水分因素，由于樣品的水分含量會直接影響檢驗結果，工作者要防止DNA樣品受到污染，維持良好的檢驗環(huán)境，從根源上提高DNA樣品的檢驗質量。

（4）優(yōu)化檢驗數(shù)據(jù)管理。法醫(yī)認證學DNA實驗室管理，如果存在數(shù)據(jù)信息失控的問題，工作者應該有計劃性地處理影響因素，以免生成的報告單信息不夠真實。按照標準規(guī)定整理好DNA實驗室檢測的數(shù)據(jù)，清晰保存原始信息，不要隨意修改。

（四）對實驗室管理項目進行專業(yè)評估

專業(yè)評估是提高法醫(yī)物證學DNA實驗室質量控制的最佳方案，專業(yè)評估從外部評估和內(nèi)部評估入手，前者是通過內(nèi)部系統(tǒng)提供的、后者是通過外部單位提供的，構建具備較強說服力的測試委員會，促進DNA檢驗技術的標準化發(fā)展。

（五）及時處理實驗室管理錯誤

提取DNA材料期間，可能會存在DNA檢驗研究以及結果解釋的偏差，特別是受到樣本檢驗流程不夠清晰或與實驗室系被污染等問題的影響，在發(fā)現(xiàn)相關問題后工作者要及時糾正錯誤，不要以錯誤的數(shù)據(jù)信息為基礎得到檢驗結論。

（六）制定DNA檢驗樣品多次檢測的方案

以確保法醫(yī)認證學DNA實驗室檢驗質量的準確性為前提，工作者應多次運用DNA檢驗樣品。在開展具體的檢驗工作之前，把相關樣品進行多個模塊劃分，對其中一份樣品進行全方位檢測，剩下的樣品應該被及時保管。重復檢測的過程中，工作者應該選取與首次檢驗相同的樣本檢驗人員，或者安排其他專業(yè)科室的人員進行DNA檢驗，如果多次檢驗出現(xiàn)的結果，不能和首次檢驗的結果達到一致，要按照材料質量檢驗的原則進行針對性判斷，分析是否存在DNA被污染的情況[11]。結合具體的實驗室質量控制問題，一些保留DNA樣品沒有得到應有的關注，相關人員覺得只要是具備鑒定書，就可以從根源上解決實驗室檢驗DNA的問題，甚至沒有關注物證信息，不能給DNA樣品的多次檢測工作提供支持，基于此，要明確DNA實驗室復合比對機制，最大化地降低鑒定問題出現(xiàn)的概率，體現(xiàn)DNA鑒定結果的權威性。

四、結束語

綜上所述，法醫(yī)認證學DNA實驗室檢驗工作中，要提高質量控制的效果，可以更好地保證數(shù)據(jù)信息檢測準確率質量控制工作，還能夠整體性反映實驗室管理的發(fā)展趨勢，每一個實驗室管理工作者都應該強調(diào)質量控制，明確行之有效的質量控制方案，全面給DNA檢驗數(shù)據(jù)的準確性帶來參考依據(jù)。質量是企業(yè)長久生存的源泉，質量控制是企業(yè)高效率運作的支持條件，DNA實驗室質量控制中，相關人員要按照規(guī)范化標準，切實進行實驗室檢驗，整理DNA檢驗的流程，促進法醫(yī)認證學領域的現(xiàn)代化建設。