毒品美沙酮的液相色譜定量分析

王 帥 齊萌鍇 韓君良 王敬藝 華 海＊

（昆山市公安局刑事科學技術中心，江蘇 昆山 215300）

0 引言

美沙酮（Methadone）又名美散痛、阿米酮，是國家管制的麻醉藥品。美沙酮維持治療（Methadone Maintenance Treatment，MMT）是第一個治療海洛因依賴被廣泛使用的阿片類替代藥物，由于美沙酮的戒斷癥狀較輕，從而成為最常使用的脫毒藥物，用于海洛因毒品成癮的脫毒藥品美沙酮多為白色片劑（不溶于水，防止二次注射）及橙色糖漿。MMT使海洛因成癮者降低甚至消除對海洛因的渴求，從而減少由于毒品依賴帶來的社會問題。當前，國家在許多地市都設有美沙酮替代治療發放點，在這些發放點進行戒毒治療的海洛因依賴患者中存在非真實服藥（將藥物吐出/未吞服）的情況，并將收集到的用于治療美沙酮再次售賣。這樣的新型犯罪會引發新的社會問題。當部分案件涉毒數量十分龐大時，必要時需要對可能被判處刑罰的嫌疑人的毒品案件物證進行毒品組分含量的檢測，為依法嚴厲懲處相關毒品違法犯罪行為，對其中美沙酮含量的定量十分重要。

1 設備與材料

1.1 儀器設備

安捷倫1200高效液相色譜儀（HPLC）；自動進樣器；低噪音空氣泵；G—560E旋渦混合器（SCIENTIFIC INDUSTRIES公司）；SB6500超聲波清洗器（上海必能信超聲波儀器廠）；醫用低速離心機：最大轉速4 000 r/min；紫外分光光度計（賽默飛世爾科技有限公司）；玻璃研缽。

1.2 試劑與標準物質

甲醇（分析純）；1.0 mg/mL美沙酮可溯源標準儲備溶液（取美沙酮標準物質（二級標準溶液，1.0 mg/mL）為儲備溶液，冰箱冷藏保存，有效期24個月）；不同濃度的美沙酮標準溶液（分別配制含美沙酮目標物濃度分別為0.01 mg/mL、0.025 mg/mL、0.1 mg/mL、0.25 mg/mL、0.5 mg/mL和1.00 mg/mL的工作曲線用系列標準溶液，均采用1.0 mg/mL美沙酮可溯源標準儲備溶液進行逐級稀釋配制，隨配隨用）。

2 方法

2.1 色譜條件

色譜柱：Lichrocart RP-18e（25×4 mm，5μm）；流動相：甲醇：去離子水：三乙胺緩沖液（PH=8）=65∶34.8∶0.2；流速：1 mL/min；柱溫：50℃；檢測波長：220 nm、270 nm、290 nm。

2.2 樣品處理

檢測樣品為涉毒案件查獲的疑似毒品物證；取定性結果為美沙酮的毒品物證檢材適量備用；平行稱取約10 mg液體樣品2份，置于10 mL具塞玻璃試管內，加入10 mL甲醇溶劑用超聲波清洗器超聲10 min至完全溶解，搖勻后置于離心機內4 000 r/min離心3 min作為樣品制備溶液；吸取1 mL樣品制備溶液，渦旋振蕩混勻后作為樣品測試液HPLC檢測；平行吸取1 mg/mL標準美沙酮工作溶液1 mL為標準測試液HPLC檢測；另取空白甲醇試劑作為空白對照。

2.3 進樣與記錄

吸取空白甲醇試劑、樣品測試液、美沙酮標準測試液分別置于自動進樣玻璃小瓶內，用內襯和瓶蓋封口，放入液相色譜儀自動進樣器中，每個測試樣品吸取2 μL進樣，樣品測試液和不同濃度的美沙酮標準測試液各進樣3次，記錄各成分的峰面積。

2.4 單點計算法

按公式（1）計算樣品中美沙酮組分的含量。

式中：W為樣品中毒品美沙酮的百分含量（%）；A樣為樣品測試液中美沙酮的峰面積平均值；A標為美沙酮標準測試液的峰面積平均值；C標為美沙酮標準溶液濃度，單位為毫克每毫升（mg/mL）；M為樣品稱取重量，單位為毫克（mg）；V初為樣品溶液配置的初始體積，單位為毫升（mL）。

2.5 相對相差計算

按公式（2）計算出兩個平行樣品之間美沙酮含量的相對相差：

式中：RD為相對相差（%）；X1、X2為兩個樣品平行定量測定的含量數值；X為兩個樣品平行定量測定含量的平均值。

3 結果

3.1 美沙酮的液相色譜響應

利用美沙酮測試液，按上述實驗部分的儀器分析條件進行HPLC分析，可以獲得相應的色譜峰保留時間，其中美沙酮的保留時間為18.443 min，其色譜圖如圖1所示。

圖1 HPLC色譜圖中美沙酮的出峰情況（RT=18.443 min）

3.2 標準工作曲線

根據不同濃度的美沙酮標準溶液所得線性工作曲線數據點的色譜圖如圖2所示。獲得的線性工作曲線及相關系數如圖3所示。

圖2 線性工作曲線數據點的色譜圖

圖3 線性工作曲線及相關系數

美沙酮工作曲線線性范圍為0.01～1.0 mg/mL，在該濃度范圍內具有良好的線性關系（相關系數r=0.999 6）。定量下限為0.01 mg/mL（1.0%）。

3.3 精密度

分別取低中高三個濃度的美沙酮標準溶液，每個濃度取三個樣品，每個樣品測試三次，連續做三天，其日內與日間精密度數據如表1所示。美沙酮HPLC測定中日內精密度普遍優于日間精密度，美沙酮濃度越高，其精密度也越好。日內精密度RSD＜5%。

表1 美沙酮HPLC檢測的精密度（n=3）

3.4 實際案例應用

對某地市2019年8月份案件中查獲的毒品美沙酮，取約10 mg平行樣品兩份，采用本方法進行含量檢測，其結果如表2所示。檢出樣品中美沙酮的含量約為33%，其中兩平行樣品的相對相差為0.45%。

表2 美沙酮樣品中含量

4 結語

含酸性硅羥基的填料可使堿性樣品的保留值延長，導致峰型拖尾，這是由于堿性化合物與酸性硅羥基的二次硅羥基相互作用產生各類叔胺，選擇三乙胺作為流動相，阻礙了樣品中堿性化合物與硅羥基的作用，從而保證完好的峰型。用紫外可見分光光度法對一定濃度的美沙酮標準物質進行測定，可以得到檢測美沙酮最適檢測波長，將該波長應用于高效液相色譜儀的參數設置中，對美沙酮的準確定量起到關鍵作用。該方法測得的美沙酮標準工作曲線具有很好的線性關系（相關系數r=0.999 6），并且日間和日內精密度（RSD）較好。HPLC法測得的美沙酮含量日內精密度普遍優于日間精密度，并且隨著美沙酮濃度增高，其精密度也越好（RSD＜5%）。得出結論采用該高效液相色譜法對美沙酮的含量進行定量分析，操作簡便、數據準確、重現性好，適用于涉毒案件中查獲毒品美沙酮物證的含量檢測。

除本文中所述美沙酮外，有報道稱社會上還有類似的地芬諾酯、莎菲等戒毒藥品被不法分子收集儲存并售賣的新型犯罪。此類藥品大多以粉末制成片劑的形式存在，通過鼻腔粘膜給藥、舌下含化或者直接吞服等方式吸收，具有極大的危害性和隱蔽性。本文所述的美沙酮除片劑外，另有液體形式存在，通過口服、直腸粘膜給藥的方式吸收。由于此類違法犯罪的進行相當的隱蔽以及給藥單位缺乏戒毒藥品相關的專業知識，相關政府部門的監管尚存不足之處，許多違法分子并沒有在給藥時直接吞服，而是在監管人員放松警惕時將藥品吐到小容器進行毒品二次售賣等行為的發生。筆者后續還會繼續研究相關案例中該藥品的檢測方法，為打擊該新型違法犯罪提供有力的法庭證據。