急性缺血性腦卒中患者基質金屬蛋白酶-9、 誘導型一氧化氮合酶、神經元特異性烯醇化酶、 神經導向因子 -1與神經功能缺損及預后的關系

鄭亞彬，王 蔚

[南京中醫藥大學附屬南京醫院（南京市第二醫院）神經內科，江蘇 南京 210003]

急性缺血性腦卒中（acute ischemic stroke，AIS）患者臨床多表現為共濟失調、感覺障礙、偏癱、失語等神經功能缺損癥狀，部分患者還會伴有昏迷、嘔吐、頭痛等癥狀，若不能得到及時有效的控制和治療，極易對患者的生命安全造成嚴重威脅。因此，對AIS患者的病情進行早期診斷，有利于后續治療方案的制定，及時對病情予以控制，對患者的預后改善具有重要的意義。基質金屬蛋白酶-9（MMP-9）屬于炎癥因子的一種，參與動脈粥樣硬化斑塊的形成，其水平升高能夠誘發腦卒中的發生[1]；誘導型一氧化氮合酶（iNOS）正常生理條件下水平較低，在炎癥、神經損傷條件下其表達水平升高，具有神經毒性，可誘導神經元凋亡，從而加重腦損傷[2]；神經元特異性烯醇化酶（NSE）參與大腦神經元和神經內分泌細胞內的糖酵解，體液中NSE含量較低，當中樞神經系統受損時，神經細胞膜的完整性遭到破壞，導致NSE從細胞外進入血液中，其水平可直接反映大腦神經系統的受損程度[3]；神經導向因子-1（Netrin-1）在神經系統中的表達較為廣泛，其參與神經元遷移、血管生成和抗凋亡過程，可參與神經系統受損后的功能和結構重建[4]。因此，本研究旨在探討血清MMP-9、iNOS、NSE、Netrin-1水平與AIS患者神經功能缺損和預后的關系，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2019年1月至2022年2月南京中醫藥大學附屬南京醫院（南京市第二醫院）收治的81例AIS患者作為研究對象，其中男性52例，女性29例；年齡45～76歲，平均（64.17±6.25）歲；基礎疾病：糖尿病29例，高血壓35例，冠心病26例，其他7例。同時選取同期健康體檢者101例作為對照組，其中男性53例，女性48例；年齡46～78歲，平均（64.23±6.18）歲；基礎疾病：糖尿病28例，高血壓43例，冠心病28例，其他7例。AIS患者和對照組的一般資料經比較，差異無統計學意義（P＞0.05），組間具有可比性。診斷標準：所有AIS患者參照《臨床神經內科疾病診療》[5]中關于AIS的診斷標準。納入標準：符合上述診斷標準者；均屬于初次發病者；近3個月內未采用抗凝、抗炎等相關治療者；肝、腎功能均無異常者等。排除標準：伴有急性感染者；自身免疫性疾病者；合并惡性腫瘤者等。本研究已經南京中醫藥大學附屬南京醫院（南京市第二醫院）醫學倫理委員會批準，且所有患者及家屬均知曉并簽署知情同意書。

1.2 研究方法

1.2.1 檢測方法采集AIS患者入院次日、對照組研究對象受檢當天空腹靜脈血5 mL，以3 000 r/min的轉速離心15 min后分離血清，采用酶聯免疫吸附實驗法檢測血清MMP-9、iNOS、Netrin-1水平，采用電化學發光法檢測血清NSE水平。

1.2.2 分組、治療方法根據入院時美國國立衛生研究院卒中量表（NIHSS）[6]評分情況，將AIS患者分為輕度組（NIHSS評分＜4分，25例）、中度組（NIHSS評分4～15分，30例）和重度組（NIHSS評分＞15分，26例）。AIS患者入院后均接受血糖、血脂和血壓調節，抗血小板、營養神經、改善循環及功能鍛煉等治療，采用改良Rankin量表（mRS）[7]評分評估患者的預后情況并將其分為預后良好組（mRS評分0～2分，57例）和預后不良組（mRS評分3～6分，24例）。

1.3 觀察指標①對AIS患者與對照組研究對象血清MMP-9、iNOS、NSE、Netrin-1水平進行比較。②對不同神經功能缺損程度AIS患者血清MMP-9、iNOS、NSE、Netrin-1水平進行比較。③對不同預后AIS患者血清MMP-9、iNOS、NSE、Netrin-1水平進行比較。④分析血清MMP-9、iNOS、NSE、Netrin-1水平與NIHSS、mRS評分的關系。

1.4 統計學方法使用SPSS 20.0統計學軟件進行數據分析，使用S-W法檢驗計量資料數據是否服從正態分布，對于符合正態分布的計量資料以(±s)表示，兩組間比較采用t檢驗，3組間比較采用單因素方差分析，以Pearson相關性分析法分析血清MMP-9、iNOS、NSE、Netrin-1水平與神經功能缺損和預后的相關性。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 AIS患者與對照組研究對象血清MMP-9、iNOS、 NSE、Netrin-1水平比較AIS組患者血清MMP-9、iNOS、NSE水平均高于對照組，血清Netrin-1水平低于對照組，差異均有統計學意義（均P＜0.05），見表1。

表1 AIS患者與對照組研究對象血清MMP-9、iNOS、NSE、Netrin-1水平比較( ±s)

表1 AIS患者與對照組研究對象血清MMP-9、iNOS、NSE、Netrin-1水平比較( ±s)

注：AIS：急性缺血性腦卒中；MMP-9：基質金屬蛋白酶-9；iNOS：誘導型一氧化氮合酶 ；NSE ：神經元特異性烯醇化酶；Netrin-1：神經導向因子-1。

組別 例數 MMP-9(μg/L) iNOS(U/mL) NSE(ng/mL) Netrin-1(pg/mL)對照組 101 214.12±37.74 14.34±2.56 3.46±0.45 487.74±67.36 AIS組 81 325.78±43.62 28.97±3.38 38.99±4.74 226.11±35.22 t值 18.503 33.220 74.962 31.647 P值 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05

2.2 不同神經功能缺損程度AIS患者血清MMP-9、iNOS、 NSE、Netrin-1水平比較與輕度組比，中度組、重度組患者血清MMP-9、iNOS、NSE水平均呈升高趨勢，血清Netrin-1水平呈降低趨勢，且組間兩兩比較，差異均有統計學意義（均P＜0.05），見表2。

表2 不同神經功能缺損程度AIS患者血清MMP-9、iNOS、NSE、Netrin-1水平比較( ±s)

表2 不同神經功能缺損程度AIS患者血清MMP-9、iNOS、NSE、Netrin-1水平比較( ±s)

注：與輕度組比，*P＜0.05，與中度組比，#P＜0.05。

組別 例數 MMP-9(μg/L) iNOS(U/mL) NSE(ng/mL) Netrin-1(pg/mL)輕度組 25 257.96±37.48 25.46±3.57 10.35±2.67 327.12±45.74中度組 30 335.47±42.59* 29.47±3.24* 25.64±3.58* 234.58±36.80*重度組 26 412.63±58.61*# 32.58±3.73*# 51.37±6.94*# 143.52±19.61*#F值 69.063 26.410 492.115 169.086 P值 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05

2.3 不同預后AIS患者血清MMP-9、iNOS、NSE、 Netrin-1水平比較預后不良組患者血清MMP-9、iNOS、NSE水平均高于預后良好組，血清Netrin-1水平低于預后良好組，差異均有統計學意義（均P＜0.05），見表3。

表3 不同預后AIS患者血清MMP-9、iNOS、NSE、Netrin-1水平比較( ±s)

表3 不同預后AIS患者血清MMP-9、iNOS、NSE、Netrin-1水平比較( ±s)

組別 例數 MMP-9(μg/L) iNOS(U/mL) NSE(ng/mL) Netrin-1(pg/mL)預后良好組 57 273.25±30.41 21.36±3.53 18.97±3.85 289.77±35.36預后不良組 24 375.48±33.54 33.94±3.32 45.41±4.22 174.14±21.18 t值 13.400 14.898 27.430 14.901 P值 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05

2.4 血清MMP-9、iNOS、NSE、Netrin-1水平與神經功能缺損和預后的關系經Pearson相關系數分析，血清MMP-9、iNOS、NSE水平與NIHSS、mRS評分呈正相關，血清Netrin-1與NIHSS、mRS評分呈負相關，差異均有統計學意義（均P＜0.05），見表4。

表4 血清MMP-9、iNOS、NSE、Netrin-1水平 與神經功能缺損和預后的關系

3 討論

AIS具有較高的發病率、致殘率和致死率，且超過一半以上的存活患者均存在不同程度的后遺癥，嚴重影響患者的身心健康和生活質量，且給患者家庭帶來較大的經濟負擔[8]。因此，盡早對患者的病情和預后狀況作出準確的評估，可為臨床治療提供較好的指導，及時有效地控制病情進展，促進患者預后的改善。

MMP-9主要由血管內皮細胞和吞噬細胞等合成和分泌，其含量增高后可加重炎癥反應，破壞腦血管基底膜，嚴重者可導致腦水腫的發生[9]。iNOS、NSE主要參與腦組織的繼發性損傷過程，與神經細胞的凋亡過程具有同步的規律。有研究顯示，Netrin-1的高表達可降低腦梗死面積，其血清含量與神經功能密切相關，可促進神經行為的轉歸[10]。NIHSS評分是臨床評估腦卒中患者神經功能缺損情況的重要指標；mRS評分常用來反映腦卒中患者預后改善情況。本研究結果顯示，AIS組患者血清 MMP-9、iNOS、NSE水平均高于對照組，血清Netrin-1水平低于對照組；與輕度組比，中度組、重度組患者血清MMP-9、iNOS、NSE水平呈升高趨勢，血清Netrin-1水平呈降低趨勢，表明AIS患者的血清MMP-9、iNOS、NSE水平越高，血清Netrin-1水平越低，其神經功能缺損程度越嚴重，其可作為預測評估AIS患者嚴重程度的指標，與沈杰等[11]研究結果一致。AIS患者的腦組織受到嚴重損傷，血流量顯著下降，致使潰破的斑塊加重了機體的炎癥反應，進而導致MMP-9因子大量釋放至血液中，其含量明顯升高，進一步對血腦屏障造成損傷，加重神經功能缺損[12]。AIS患者發病后，其腦組織神經元受到嚴重的損傷，致使iNOS、NSE因子大量分泌和釋放，血清含量明顯升高[13]。Netrin-1具有調節血管生成和軸突導向的作用，在神經功能受損時其水平顯著降低，致使神經元再生功能受到抑制，加重病情[14]。本研究結果顯示，預后不良組患者血清MMP-9、iNOS、NSE水平均高于預后良好組，血清Netrin-1水平低于預后良好組；經Pearson相關系數分析，血清MMP-9、iNOS、NSE水平與NIHSS、mRS評分成正相關，血清Netrin-1與NIHSS、mRS評分呈負相關，表明AIS患者血清MMP-9、iNOS、NSE、Netrin-1水平與神經功能缺損、預后具有一定的相關性，可作為對患者預后的預測評估指標。血清MMP-9含量較高表明機體炎癥反應較為嚴重，會促進患者動脈粥樣硬化的破裂，逐漸增大梗死面積，另外iNOS、NSE通常參與腦損傷疾病的病情進展，其含量較高可增加腦梗死面積，影響患者的預后；Netrin-1血清含量升高可有助于血管灌注和神經元再生，減少神經元凋亡和減輕缺血再灌注造成的損傷，進而改善 預后。

綜上，AIS患者的血清MMP-9、iNOS、NSE水平越高，血清Netrin-1水平越低，其神經功能缺損程度越嚴重，預后越差，對以上指標進行檢測可對患者的病情進行判斷，為臨床后續治療提供一定的參考依據，并可作為對預后情況的預測指標，值得臨床進一步推廣應用。