魏 瑞,袁 旭,田學文,魯艷軍
華中科技大學同濟醫學院附屬同濟醫院檢驗科,湖北武漢 430000
呼吸道感染是一種臨床上常見多發的感染性疾病,好發于兒童,70%~80%的兒童呼吸道感染是由病毒引起[1],常見的呼吸道病毒包括甲型流感病毒(Flu A)、乙型流感病毒(Flu B)、呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)、副流感病毒(PIV)等,除此之外,肺炎支原體(MP)、肺炎衣原體(CP)、細菌等多種病原體也可引起呼吸道感染。呼吸道感染與患者年齡、檢測季節、地域及氣候等因素存在一定聯系,不同病毒可呈現不同的流行特點[2-6]。有研究顯示[7],Flu B感染陽性患者白細胞、淋巴細胞、血小板計數較Flu B陰性患者明顯降低,肌酸激酶明顯升高;RSV感染兒童血小板計數明顯高于其他病毒感染[8];部分PIV感染患兒有肝功能異常和心肌損傷表現[9];以上研究提示不同的病原體可導致實驗室檢測指標出現差異。本研究對2021年9月至2021年12月來本院就診的302例呼吸道感染患兒進行臨床和實驗室資料的回顧性分析,為呼吸道感染的診療和防控提供依據。
1.1一般資料 收集2021年9月至2021年12月因疑似呼吸道感染來本院就診患兒的病例資料,其中男185例(61.3%),女117例(38.7%);年齡29 d至13歲,其中0~3歲檢出率最高;納入標準是篩選經實驗室開展雙擴增技術檢測七項呼吸道病原體(RSV、Flu A、Flu B、PIV、ADV、MP、CP)檢測任一項陽性的患兒為研究對象,剔除標準是沒有開展該項目檢測或檢測陰性,共納入病例302例,整理相關臨床和實驗室檢查資料。
1.2檢測方法 采用武漢中幟生物科技股份有限公司生產的 “七項呼吸道病原體核酸檢測試劑盒”,該試劑盒采用雙擴增技術(即T7核酸擴增和生物素信號放大技術)檢測咽拭子標本細胞中的7種呼吸道病原體RNA。標本中的細胞經細胞裂解液裂解后釋放病原體核酸,然后在逆轉錄酶和T7RNA聚合酶的作用下,實現T7核酸擴增,擴增結束后將產物進行與特異探針雜交進行雜交,經過孵育、洗板、加酶聯物、再洗板等過程后,最終形成捕獲探針-RNA擴增產物-特異探針-放大探針-酶聯物復合體,最后通過化學發光進行檢測。最后讀取標本和陰陽性指控物8個檢測指標的相對光單位(RLU),根據比值R進行定性判斷,比值R>1.0則判斷為陽性,≤1.0則為陰性。
1.3統計學處理 采用 SPSS25.0 軟件進行數據統計分析,計數資料以例數或百分率表示,不同組間呼吸道病原體的實驗室結果比較使用χ2檢驗,評估兩變量之間是否具有相關性使用 Pearson 相關系數分析或 Fisher 精確檢驗。檢驗水準取α=0.05,以P<0.05為差異有統計學意義。
2.1基本情況 7種呼吸道病原體檢出率最高的疾病類型為肺部感染(以肺炎、支氣管肺炎為主);其中,RSV檢出率最高,其次為Flu B、PIV;病例以單一病原體感染為主,共284例,占陽性病例的94.0%,18例為混合感染,占陽性病例的6.0%,其中RSV合并PIV感染7例,RSV合并ADV 4例,RSV合并Flu B 4例,RSV合并MP 1例,PIV合并MP 1例,還有1例同時感染Flu B、RSV、ADV,見表1。

表1 302例呼吸道病原體檢出患者的基本信息
2.2實驗室檢查結果 302例患兒入院血常規結果分析顯示:白細胞、中性粒細胞、淋巴細胞、血小板計數及血紅蛋白異常占比分別為34.5%、29.1%、23.9%、20.2%、15.2%,可表現為升高或降低;生化檢測指標顯示:部分患兒天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)、丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、肌酸激酶、高敏心肌肌鈣蛋白出現升高,分別為41.0%(121/295)、8.5%(25/295)、14.0% (41/293)、4.6% (11/240),98.0%(289/295)的患兒出現不同程度的肌酐降低;287例患兒具有凝血功能檢測結果,凝血功能顯示:凝血酶原時間、活化部分凝血活酶時間、纖維蛋白原異常占比分別為14.9%、15.7%、25.4%,30.0%患兒D-二聚體定量大于0.5 μg/mL,見表2。

表2 302例呼吸道病原體檢出患者的實驗室結果
2.3不同組間實驗室檢查結果比較 進一步分析提示:單純RSV感染與單純PIV感染組間實驗室檢查結果比較差異無統計學意義(P>0.05);與單純ADV、 RSV、 PIV、MP感染組患兒實驗室結果相比,單純Flu B感染患兒部分血常規、生化檢測指標比較差異具有統計學意義(P<0.05),Flu B感染組患兒白細胞、中性粒細胞、淋巴細胞、血小板明顯降低,降低比例分別為36.4%、32.7%、45.5%、23.6%,AST、肌酸激酶較其他組明顯升高,升高的比例分別為45.3%、26.4%;ADV感染組患兒的白細胞、中性粒細胞以及纖維蛋白原顯著高于其他病原體感染患兒,升高比例分別為76.2%,61.9%,76.2%;RSV感染患兒的血小板升高比例明顯高于其他組,占比16.6%;MP感染患兒主要表現為纖維蛋白原、D-二聚體的增加,增加比例均為88.9%,及血紅蛋白的降低,降低比例為50.0%;MP感染與其他病原體感染患兒實驗室指標差異分析與Flu B感染結果類似;RSV感染、PIV感染組患兒AST升高比例分別為47.3%、41.4%,PIV感染患兒總蛋白升高比例高于其他組,占比17.2%,見表3。

表3 不同病原體感染組間實驗室結果差異分析[n/n(%)]

單純MPP1P2P3P4P5白細胞計數(×109/L) 升高2/10(20.0)0.1240.2140.053<0.0100.292 降低0<0.0100.7020.0010.0060.025中性粒細胞計數(×109/L)

續表3 不同病原體感染組間實驗室結果差異分析[n/n(%)]
急性呼吸道感染因其發病率高、流行性廣、傳播速度快等特點,對人類健康尤其是兒童、老人等免疫力低下人群健康造成了嚴重危害[10]。由于急性呼吸道感染通常引起相似的臨床表現[11],臨床上不易明確感染種類。然而,實驗室指標在不同病原感染者之間存在一定的差異。有研究顯示[12],新型冠狀病毒感染(SARS-CoV-2)外周血白細胞顯著低于Flu B、RSV感染者。因此,總結急性呼吸道感染的臨床和實驗室特征,對于理解發病機制,為診療和預后判斷提供依據具有重要意義。
本研究結果顯示,呼吸道病原體感染在0~3歲檢出率最高,且隨著年齡增加而逐漸降低,男性患兒比例略高于女性;多為單一病原體感染,少數存在混合感染;在檢測的7種呼吸道病原體中,RSV檢出率最高,與多地報道相符合[13-15],Flu B、PIV次之,其中Flu A,CP檢出率為0,證明RSV是兒童最常見的呼吸道感染病原體;302例呼吸道病原體檢出陽性病例中最多的疾病類型為肺炎、支氣管肺炎,提示呼吸道病原體感染可能與下呼吸道疾病關系更密切。實驗室檢查結果顯示:ARTI患兒的白細胞、中性粒細胞及血小板可表現為升高或降低,淋巴細胞、血紅蛋白以降低為主;半數患兒伴有肝功能異常,少數患兒可出現心肌酶譜的變化,提示可能與心肌損傷相關。進一步分析不同組間病原體感染患兒的實驗室結果發現,Flu B感染患兒主要表現為白細胞、中性粒細胞、淋巴細胞、血小板降低及AST、肌酸激酶的升高,結果與相關報道類似[7];ADV感染患兒白細胞、中性粒細胞、纖維蛋白原顯著高于其他病原體感染患兒,這與ADV感染機體后,可觸發類似于細菌感染的強烈炎癥反應有關[16-17]。MP感染患兒與其他病原體感染患兒相比,主要表現為纖維蛋白原、D-二聚體的增加及血紅蛋白的降低。RSV、PIV感染提示可伴有肝功能的異常。此發現可能為臨床上急性呼吸道感染患者的鑒別診斷提供了一定的參考價值。
綜上所述,RSV是武漢地區兒童最常見的呼吸道感染病原體;肺炎、支氣管肺炎等下呼吸道感染疾病中病原體檢出率最高;實驗室檢測結果的變化對急性呼吸道感染的臨床診療有一定的提示意義,Flu B、ADV感染患兒常伴血常規、生化以及凝血部分指標明顯波動,相較其他病原引起的呼吸道感染,可能更易發生重癥;RSV、PIV感染患兒血常規、凝血功能與其他病原組感染無明顯差異,但肝功能指標可表現為異常升高。本研究通過對急性呼吸道感染患兒實驗室特征分析,增加了醫師對急性呼吸道感染的認識,為臨床診治提供了線索和參考依據,對相關疾病防控工作有一定的意義。