外周血細胞炎癥標志物與PCOS患者性激素水平和胰島素抵抗的關系*

楊羞花，張慧青

（桂林市婦幼保健院 婦科，廣西 桂林 541001）

多囊卵巢綜合征（polycystic ovary syndrome,PCOS）是一種以月經紊亂、雄激素過多、長期無排卵與卵巢多囊形態改變為主要特征的代謝紊亂性疾病，在育齡婦女中發病率約為5%～20%[1]。PCOS 患者常表現為月經失調、痤瘡、多毛、不孕等，多伴有肥胖、胰島素抵抗，長期可并發糖尿病、子宮內膜癌、心血管疾病等[2-3]。研究發現，慢性炎癥與胰島素抵抗、高雄激素血癥、肥胖、排卵障礙等有關[4]。PCOS 屬于亞臨床炎癥，雖不存在發熱、局部紅腫熱痛等全身性表現，但可釋放白細胞介素（Interleukin,IL）、C 反應蛋白（C reactive protein,CRP）、腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）等炎癥因子，導致代謝功能紊亂與機體防御能力減弱[5-6]。外周血細胞炎癥標志物是基于血常規的衍生炎癥指標，可客觀反映患者免疫反應、炎癥反應的平衡狀態，其中中性粒細胞與淋巴細胞比值（NLR）、血小板與淋巴細胞比值（PLR）等已被證實可用于疾病早期診斷、判斷病情程度、評估預后[7]。但目前國內外研究關于外周血細胞炎癥標志物水平與PCOS 關系的報道較少。本研究采用病例對照試驗，分析PCOS 患者外周血細胞炎癥標志物表達及與性激素水平、胰島素抵抗的相關性，旨在為臨床診斷、評估PCOS 病情提供指導。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2021年8月—2022年8月就診于桂林市婦幼保健院的200 例PCOS 患者為PCOS 組。其中，年齡23～35 歲，平均（27.96±2.32）歲；體質量指數（BMI）21.9～29.2 kg/m2，平均（25.68±2.21）kg/m2；月經紊亂時間7～20 個月，平均（14.38±2.97）個月。另選取同期年齡匹配的健康體檢女性為對照組。年齡24～33 歲，平均（26.86±2.54）歲；BMI 22.1～28.6 kg/m2，平均（25.13±2.34）kg/m2。兩組的年齡、BMI 比較，差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 納入及排除標準

納入標準：①PCOS 組。符合《婦產科學》[8]與《荷蘭鹿特丹PCOS 會議修訂的診斷標準》[9]的PCOS診斷標準：血清總睪酮（T）≥ 0.7 μg/L 或伴有痤瘡、多毛癥等高雄激素臨床表現；月經稀發或延遲；超聲表現為同一切面上直徑2～9 mm 的卵泡個數≥12 個，或卵巢容積≥ 10 mL。具備至少2 項則診斷為PCOS。已婚女性，性生活正常，有生育要求；男方生殖功能正常；自愿簽署知情同意書。②對照組。血激素水平、基礎體溫雙相、月經周期正常；雙側輸卵管通暢；B 超顯示子宮與雙側附件均未見明顯異常。排除標準：入組前3 個月內接受激素類藥物、免疫抑制劑、糖皮質激素、避孕藥、降糖類藥物治療；產生高雄激素的其他內分泌疾病，包括卵巢或腎上腺腫瘤、先天性腎上腺皮質增生癥、庫欣綜合征等；有系統性紅斑狼瘡、類風濕關節炎、潰瘍性結腸炎等炎癥性疾病；有血液系統疾病；重要臟器功能嚴重不全；有凝血功能障礙。

1.3 方法

1.3.1 血標本采集采集兩組研究對象月經周期第2～4 天（閉經者則于B 超未見優勢卵泡時采集）的3 mL 空腹外周血，3 000 r/min 離心10 min（離心半徑為6 cm），取上清液。

1.3.2 外周血細胞炎癥標志物檢測將采集的血標本在2 h 內利用邁瑞Mindray 全自動血液細胞分析儀6000（南京貝登醫療股份有限公司）測定白細胞計數、淋巴細胞計數、中性粒細胞計數、單核細胞計數、血小板計數，并計算NLR、衍生中性粒細胞與淋巴細胞比值[dNLR，dNLR=中性粒細胞計數/（白細胞計數-中性粒細胞計數）]、PLR、淋巴細胞與單核細胞比值（LMR）、系統免疫炎癥指數（SII，SII=血小板計數×中性粒細胞計數/淋巴細胞計數）。

1.3.3 性激素水平檢測通過放射免疫法（試劑盒購自深圳市健竹科技有限公司）測定黃體生成素（LH）、卵泡刺激素（FSH）、T 水平，均通過美國雅培i2000 發光全自動免疫分析系統檢測。

1.3.4 胰島素抵抗指標檢測利用美國雅培i6000 全自動生化分析儀測定空腹胰島素水平與血糖水平，計算穩態模型胰島素抵抗指數（HOMA-IR）=空腹血糖×空腹胰島素/22.5，胰島素敏感指數（ISI）=1/（空腹血糖×空腹胰島素）。

1.4 統計學方法

數據分析采用SPSS 24.0 統計軟件，計量資料以均數±標準差（±s）表示，比較用t檢驗；相關分析用Pearson 法；繪制ROC 曲線；影響因素的分析采用多因素Logistic 逐步回歸分析模型。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組外周血細胞炎癥標志物指標比較

兩組研究對象的白細胞計數、淋巴細胞計數、中性粒細胞計數、單核細胞計數、血小板計數、NLR、dNLR、PLR、LMR、SII 比較，經t檢驗，差異有統計學意義（P<0.05），PCOS 組均高于對照組。見表1。

表1 兩組外周血細胞炎癥標志物指標比較 （±s）

表1 兩組外周血細胞炎癥標志物指標比較 （±s）

組別對照組PCOS組t 值P 值n 100 200白細胞計數/×109/L 5.13±1.32 7.35±1.65 11.708 0.000淋巴細胞計數/×109/L 2.03±0.32 2.75±0.41 5.866 0.000中性粒細胞計數/×109/L 3.65±1.32 4.06±1.08 2.873 0.004單核細胞計數/×109/L 0.39±0.15 0.49±0.22 4.093 0.000血小板計數/×109/L 225.62±18.56 274.62±24.65 17.541 0.000組別對照組PCOS組t 值P 值NLR/%1.11±0.27 1.47±0.40 7.467 0.000 dNLR/%1.00±0.26 1.41±0.30 10.462 0.000 PLR/%112.13±12.07 132.38±12.08 11.857 0.000 LMR/%2.57±0.30 2.82±0.29 5.916 0.000 SII/%169.31±14.90 198.89±18.13 12.602 0.000

2.2 兩組的性激素與胰島素抵抗指標比較

兩組研究對象的LH、FSH、T、HOMA-IR、ISI 比較，經t檢驗，差異均有統計學意義（P<0.05），PCOS 組LH、T、HOMA-IR 均高于對照組，FSH、ISI 均低于對照組。見表2。

表2 兩組的性激素水平與胰島素抵抗指標比較 （±s）

表2 兩組的性激素水平與胰島素抵抗指標比較 （±s）

組別對照組PCOS組t值P值n 100 200 FSH/（mIU/mL）7.02±1.32 5.15±0.98 13.822 0.000 LH/（mIU/mL）7.82±2.67 12.74±3.35 12.792 0.000 T/（ng/mL）0.35±0.15 0.83±0.12 13.097 0.000 HOMA-IR 2.18±0.39 4.16±0.51 34.141 0.000 ISI-2.02±0.41-3.46±0.49 25.288 0.000

2.3 兩組外周血細胞炎癥標志物與性激素、胰島素抵抗的相關性分析

Pearson 相關性顯示，外周血NLR、dNLR、PLR、LMR、SII 與LH（r=0.385、0.425、0.483、0.231 和0.494）、T（r=0.435、0.479、0.539、0.349 和0.501）、HOMA-IR（r=0.452、0.561、0.580、0.361 和0.632）呈正相關（P<0.05），與FSH（r=-0.340、-0.463、-0.621、-0.378 和-0.533）、ISI（r=-0.512、-0.546、-0.732、-0.462 和-0.638）呈負相關（P<0.05）。見表3。

表3 外周血細胞炎癥標志物與性激素、胰島素抵抗的相關性分析參數

2.4 外周血細胞炎癥標志物對PCOS 發生的預測效能

將PCOS 是否發生作為狀態變量（未發生 = 0，發生 = 1）繪制ROC 曲線，結果顯示，NLR、dNLR、PLR、LMR、SII 及聯合預測PCOS 發生的敏感性分別為68.9%（95% CI：0.593，0.782）、72.6%（95% CI：0.652，0.796）、75.1%（95% CI：0.683，0.818）、64.2%（95% CI：0.528，0.721）、76.2%（95% CI：0.699，0.842）、82.1%（95% CI：0.782，0.896），特異性分別為76.2%（95% CI：0.693，0.832）、84.3%（95% CI：0.793，0.902）、87.9%（95% CI：0.816，0.921）、75.3%（95% CI：0.673，0.828）、90.2%（95% CI：0.834，0.953）、96.7%（95% CI：0.893，0.986）。見表4和圖1。

圖1 外周血細胞炎癥標志物預測PCOS發生的ROC曲線

表4 外周血細胞炎癥標志物預測PCOS發生的效能分析

2.5 影響PCOS發生的危險因素

將PCOS 是否發生作為因變量（未發生 =0，發生 =1），將NLR、dNLR、PLR、LMR、SII 作為自變量（均為連續變量），納入多因素Logistic 逐步回歸分析模型（α入=0.05，α出=0.10），結果顯示，為PCOS 發生的危險因素（P<0.05）。見表5。

表5 影響PCOS發生危險因素的多因素Logistic逐步回歸分析參數

3 討論

大部分PCOS 患者體內存在慢性低度炎癥反應，且與胰島素抵抗、雄激素分泌過多、動脈粥樣硬化、腹型肥胖等因素相關[10-11]。但由于PCOS屬于一個涉及代謝、內分泌、生殖等多系統的疾病，關于炎癥與PCOS 的機制尚未完全闡明。ROSTAMTABAR 等[12]研究顯示，炎癥復合物介導的IL-18、IL-1β 的產生可能參與PCOS 的發生、發展過程中。BANNIGIDA 等[13]研究報道，PCOS 女性血清炎癥因子升高，存在明顯的炎癥反應。同時HERMAN 等[14]通過檢測炎癥通路基因證實，炎癥通路中的遺傳變異可對葡萄糖穩態、PCOS 發生風險產生影響。由此可見，探尋PCOS 發病機制中的炎癥過程與相應介質，再進一步明確PCOS 病理生理學機制，通過控制相關通路治療中尤為關鍵。

3.1 PCOS患者外周血細胞炎癥標志物水平升高

LIU 等[15]在一項回顧性病例對照研究中報道，PCOS 組NLR、HOMA-IR 高于健康對照組，且NLR、HOMA-IR 與BMI 指數呈正相關。黃哲人等[16]研究發現，PCOS 患者NLR 異常升高，且與血脂代謝異常密切相關。但KA?U?NA 等[17]卻提出不一樣的結果，該研究發現PCOS 患者與健康受試者的NLR、LMR 未見明顯差異。由此可見，目前臨床上關于外周血細胞炎癥標志物水平與PCOS 的關系尚存在一定爭議，且細胞炎癥標志物的研究多集中于NLR、 LMR 等。 本研究中，PCOS 組NLR、dNLR、PLR、LMR 與SII 較對照組高，表示PCOS患者免疫、炎癥途徑激活，上述外周血細胞炎癥標志物水平升高往往表示PCOS 患者體內炎癥、免疫平衡狀態被打破，從而造成慢性炎癥反應與免疫功能紊亂。分析原因在于：①中性粒細胞可產生細胞外陷阱（NET），影響高遷移率組蛋白B1/晚期糖基化終末產物受體/白細胞介素-8（HMGB1/RAGE/IL-8）軸表達，從而在啟動與調節炎癥過程中發揮重要作用。同時，中性粒細胞吞噬能力強，可在病變處分泌基質金屬蛋白酶、趨化因子與細胞因子等物質，進而造成免疫細胞浸潤與組織損傷，誘發慢性炎癥[18-19]。②淋巴細胞具有分泌抗體、調節免疫等功能，可分泌TNF-α、?-干擾素（?-IFN）等諸多細胞因子，加劇炎癥反應。③脂肪組織與白細胞分泌的細胞因子作用于細胞的糖脂代謝，導致體內炎癥反應被激活，加重慢性炎癥反應。④單核細胞進入組織中可成為巨噬細胞，而巨噬細胞在脂肪組織中的累積與肥胖有關。脂肪組織分泌巨噬細胞炎癥蛋白-1α 與單核細胞化學趨化蛋白-1，誘導胰島素抵抗、巨噬細胞浸潤至脂肪組織。⑤血小板可視為與白細胞結合的特異性炎癥標志物，血小板活化時釋放的組織因子與組織的炎癥、損傷有關，且可刺激中性粒細胞等其他細胞，進一步導致炎癥因子大量分泌。而炎癥反應、免疫功能受損可直接作用于卵巢，造成排卵異常或阻礙卵泡正常發育；或通過諸多機制誘導高雄激素血癥、胰島素抵抗或肥胖，進而加劇PCOS 的發生。本研究ROC 曲線分析結果顯示，NLR、dNLR、PLR、LMR、SII 及聯合預測PCOS 發生的AUC 分別為0.752、0.835、0.869、0.709、0.889 和0.961，且NLR、dNLR、PLR、LMR 與SII 均可能是PCOS 發生的危險因素，再次證實外周血細胞炎癥標志物水平與PCOS 的發生、發展密切相關，且提示臨床應警惕NLR、dNLR、PLR、LMR 與SII 同時升高的患者，以預防PCOS 的發生。

3.2 外周血細胞炎癥標志物與PCOS 患者性激素、胰島抵抗相關

本研究Pearson 相關性結果顯示，NLR、dNLR、PLR、LMR、SII 均與LH、T、HOMA-IR 呈正相關，與FSH、ISI 呈負相關，可見PCOS 患者外周血細胞炎癥標志物水平與性激素水平、胰島素抵抗存在密切相關性，可指導臨床合理診治。分析具體原因包括：①高雄激素血癥是PCOS 的特征之一，可加劇腹部脂肪沉積，進一步增加雄激素分泌與胰島素抵抗。雄激素與雌激素受體相結合可激活活性氧自由基（ROS）系統與NF-κB 炎癥通路，進而誘導諸多炎癥因子產生，加劇炎癥反應。而PCOS 體內炎癥因子可通過誘導胰島素抵抗而間接促進雄激素合成，引發性激素紊亂[20]。②隨著PCOS 病情不斷進展，單核細胞進入組織中形成巨噬細胞與淋巴細胞，炎性介質可改變胰島素受體的親和力與數量，干擾胰島素受體信號傳導，影響胰島素受體磷酸化水平。同時，炎性介質存在一定氧化性，可誘發氧化損傷，減弱外周組織對胰島素的敏感度，降低胰島素細胞分泌功能，進而造成胰島細胞分泌缺陷和/或胰島素抵抗與糖耐量異常。而作為代謝紊亂的中心環節，胰島素抵抗可直接介導炎癥反應，經激活交感神經系統、抑制淋巴細胞傳導等方式間接激活炎癥反應，進而導致外周血NLR、dNLR、PLR 等增加，形成惡性循環。PERGIALIOTIS 等[21]研究發現，PCOS 患者PLR與孕酮呈負相關（r=-0.177，P=0.024），NLR 與FSH呈負相關（r=-0.204，P=0.007），與T 呈正相關（r=0.234，P=0.003），與本研究結果相似，再次證實外周血細胞炎癥標志物與PCOS 患者性激素有關。

綜上所述，PCOS 患者外周血NLR、dNLR、PLR、LMR、SII 呈高表達，與性激素水平、胰島素抵抗密切相關，聯合檢測可有效預測PCOS 的發生