杏香兔耳風化學成分研究

徐貞權，何明珍，姚 閩, 3，王昭君，歐陽輝，李志峰，楊世林, 2，李軍茂*，馮育林, 2*

杏香兔耳風化學成分研究

徐貞權1，何明珍1，姚 閩1, 3，王昭君1，歐陽輝1，李志峰1，楊世林1, 2，李軍茂1*，馮育林1, 2*

1. 江西中醫藥大學，中藥固體制劑制造技術國家工程研究中心，江西 南昌 330006 2. 創新藥物與高效節能降耗制藥設備國家重點實驗室，江西 南昌 330006 3. 江西省藥品檢驗檢測研究院，江西 南昌 330029

研究兔耳風屬植物杏香兔耳風的化學成分。采用溶劑萃取、大孔吸附樹脂、硅膠、ODS柱色譜以及HPLC等技術進行化學成分分離純化，運用核磁共振等波譜數據分析鑒定化合物結構。從杏香兔耳風乙醇提取物中分離得到20個化合物，分別鑒定為3β--β--glucopyranosyl-8α-hydroxy-11α,13-dihydrozaluzanin C（1）、巖白菜素（2）、glucozaluzanin C（3）、芹菜素-7--β--葡萄糖醛酸甲酯（4）、costunolide-15-β--glucopyranoside（5）、芹菜素-7--β--葡萄糖醛酸苷（6）、木犀草素-7--β--葡萄糖醛酸苷（7）、芹菜素-6,8-二-C-葡萄糖苷（8）、綠原酸（9）、1,3--二咖啡酰奎寧酸（10）、3--反式對羥基香豆酰奎寧酸（11）、木犀草素-7--β--葡萄糖苷（12）、木犀草素（13）、原兒茶酸（14）、5--順式對羥基香豆酰奎寧酸（15）、1--咖啡酰奎寧酸（16）、隱綠原酸（17）、5--反式對羥基香豆酰奎寧酸（18）、3,5--二咖啡酰奎寧酸（19）、2′---caffeoyl-8α-hydroxy-11α,13-dihydro-3β--β--glucozaluzanin C（20）。化合物2、4～8、11、15～16、18為首次從兔耳風屬植物中分離得到。

兔耳風屬；杏香兔耳風；咖啡酰奎寧酸；芹菜素-7--β--葡萄糖醛酸苷；木犀草素-7--β--葡萄糖醛酸苷；芹菜素-6,8-二-C-葡萄糖苷

杏香兔耳風Champ.又名一支香、撲地金鐘，為菊科兔耳風屬多年生草本植物，具有清熱解毒、利濕、止血等功效[1]，主要用于治療慢性宮頸炎、陰道炎、呼吸道感染等疾病[2-3]。杏香兔耳風被開發成的中成藥制劑，如“復方杏香兔耳風片”“復方杏香兔耳風顆粒”等，臨床廣泛引用于治療濕熱帶下所導致的婦科疾病。杏香兔耳風植物主要有奎寧酸類、黃酮類、倍半萜類等化學成分[4-6]，現代藥理學研究發現杏香兔耳風具有抗菌、抗炎、止血等藥理學作用[3]。課題組前期研究發現，杏香兔耳風水部位為其活性部位，為進一步開發杏香兔耳風植物資源利用，闡明該藥物的藥效物質基礎，為其臨床應用及質量控制提供科學依據，本實驗對杏香兔耳風水部位的化學成分進行研究，從中分離并鑒定了20個化合物，分別鑒定為8α-hydroxy-11α, 13-dihydroglucozaluzanin（1）、巖白菜素（bergenin monohydrate，2）、glucozaluzanin C（3）、芹菜素- 7--β--葡萄糖醛酸甲酯 [apigenin 7--β- (6′′-methylglucuronide)，4]、costunolide-15-β-- glucopyranoside（5）、芹菜素-7--β--葡萄糖醛酸苷（apigenin-7--β--glucuronopyranoside，6）、木犀草素-7--β--葡萄糖醛酸苷（luteolin- 7--β--glucuronopyranoside，7）、芹菜素-6,8-二-C-葡萄糖苷（apigenin-6,8-di-C-β--glucopyranoside，8）、綠原酸（chlorogenic acid，9）、1, 3--二咖啡酰奎寧酸（1,3-di--caffeoylquinic acid，10）、3--反式對羥基香豆酰奎寧酸（3---- coumaroylquinic acid，11）、木犀草素-7--β--葡萄糖苷（luteolin-7--β--glucoside，12）、木犀草素（luteolin，13）、原兒茶酸（protocatechuic acid，14）、5--順式對羥基香豆酰奎寧酸（5---coumaroyl- quinic acid，15）、1--咖啡酰奎寧酸（1-- caffeoylquinic acid，16）、隱綠原酸（cryptochlorogenic acid，17）、5--反式對羥基香豆酰奎寧酸（5--- coumaroylquinic acid，18）、3,5--二咖啡酰奎寧酸（3,5--dicaffeoylquinic acid，19）、protocatechuic acid 2′---caffeoyl-8α-hydroxy-11α,13-dihydro-3β--β-- glucozaluzanin C（20）。其中，化合物2、4～8、11、15～16、18為首次從兔耳風屬植物中分離得到。

1 儀器與材料

Bruker avance 600型核磁共振儀（德國布魯克公司）；Triple TOF 5600型高分辨質譜儀（美國ABSciex公司）；EYALA旋轉蒸發器（日本Eyala公司）；DHG-9036A型電熱恒溫鼓風干燥箱（上海精宏實驗設備有限公司）；EL204型電子天平[梅特勒托利多儀器（上海）有限公司]；LC-XR20UPLC/HPLC（日本島津公司）；漢邦NU3000制備液相色譜（江蘇漢邦科技股份有限公司）；LC-20AT型高效液相色譜儀（日本島津公司）；YMC-Pack ODS-A HPLC（250 mm×10 mm，5 μm，日本）；COSMOSILC18色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 μm，日本NacalaiTesque公司）；DAION HP20樹脂（日本三菱公司）；柱色譜硅膠（300～400目，青島海洋化工有限公司）；WRR型熔點儀（上海精密儀器有限公司）；WZZ-2B型自動旋光儀（上海精密科學儀器有限公司）；液相和制備液相所用試劑為色譜純，其他均為分析純。

杏香兔耳風藥材購買于江西省樟樹藥材市場，由江西中醫藥大學鐘國躍教授鑒定為兔耳風屬杏香兔耳風Champ.的干燥全草，樣本（XXTEF20210905）保存在江西中醫藥大學中藥固體制劑制造技術國家工程研究中心。

2 提取與分離

干燥的杏香兔耳風全草25 kg，粉碎，用70%乙醇回流提取2次，每次2 h。提取液減壓濃縮至無醇味，依次用石油醚（60～90 ℃）、醋酸乙酯萃取，將被石油醚、醋酸乙酯萃取后的溶液稱為水部位，水部位浸膏2082 g。

取水部位浸膏2082 g經DAION HP20樹脂分離，依次采用水及30%、60%、90%乙醇洗脫，得到4個部位A～D；組分B（280 g）經硅膠柱色譜分離，用二氯甲烷-甲醇（100∶0～0∶100）洗脫，得到15個組分B-1～B-15。

組分B-8利用硅膠柱色譜，二氯甲烷-甲醇（100∶0→0∶100）溶劑體系梯度洗脫，得到42個流分Fr. 1～42，經高分辨質譜儀檢測，合并Fr. 27～42，Fr. 27～42再經制備液相（乙腈-水15∶85）分離得到化合物1（1700 mg，R＝15.1 min）、2（16.9 mg，R＝7.5 min）；組分B-7利用硅膠柱色譜，二氯甲烷-甲醇（100∶0→0∶100）梯度洗脫，得到47個流分Fr. 1～47，經高分辨質譜儀檢測，合并Fr. 5～9，再經制備液相色譜（乙腈-水25∶75）分離得到化合物13（156.4 mg，R＝25.4 min）；合并Fr. 17～23，再經制備液相（乙腈-水25∶75）分離得到化合物3（200.1 mg，R＝21.4 min）、5（61.5 mg，R＝33.6 min）。B-12～B-15利用ODS柱，甲醇-水（10∶90→90∶10）溶劑梯度洗脫，得到38個流分Fr.1～38，Fr. 25再經制備液相（乙腈-水25∶75）分離得到化合物4（50.0 mg，R＝30.2 min）；合并Fr. 11～13，Fr. 11～13再經制備液相（乙腈-水20∶80）分離分到化合物6（500.1 mg，R＝20.8 min）、7（604.6 mg，R＝25.4 min）；合并Fr. 6～10，再經制備液相（乙腈-水15∶85）分離得到化合物8（54.2 mg，R＝42.6 min）；Fr. 2經制備液相（乙腈-水10∶90）制備得到化合物11（17.2 mg，R＝15 min）；合并Fr. 20～21，再經制備液相（乙腈-20∶80）制備得到化合物10（14.6 mg，R＝25.4 min）、Fr. 3-5合并，Fr. 3～5再經制備液相（乙腈-水5∶95→12∶82）制備得到化合物14（16.2 mg，R＝26.3 min）、9（18.0 mg，R＝32.3 min）、15（43.3 mg，R＝53.1 min）、16（19.9 mg，R＝60.2 min）、17（16.7 mg，R＝68.3 min）、18（5.0 mg，R＝79.5 min）、19（16.7 mg，R＝81.5 min）。

組分C（168 g）經硅膠柱色譜分離，二氯甲烷-甲醇（100∶0→0∶100）溶劑體系梯度洗脫，得到6個組分C-1～C-6，組分C-6利用ODS柱，甲醇-水（5∶95→95∶5）溶劑梯度洗脫，得到60個流分Fr. 1～60，合并Fr. 10～13，再經制備液相（乙腈-水13∶87）制備得到化合物12（113.4 mg，R＝23.2 min）；合并Fr. 23～29，Fr. 23～29再經制備液相色譜（乙腈-水14∶86），制備得到化合物合物20（79.2 mg，R＝45.3 min）。

3 結構鑒定

化合物2：白色針晶（甲醇），mp 272 ℃，ESI-MS/327.071 4 [M－H]?，結合NMR推測分子式為C14H16O9。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 7.00 (1H, s, H-7), 4.97 (1H, d,= 10.2 Hz, 11-OH), 3.98 (1H, t,= 9.8 Hz, H-4a), 3.85 (1H, d,= 10.3 Hz, H-11), 3.77 (3H, s, 9-OCH3), 3.58 (1H, t,= 8.8 Hz, H-3)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 163.8 (C-6), 151.5 (C-8), 148.5 (C-10), 141.0 (C-9), 118.5 (C-6a), 116.3 (C-10a), 109.9 (C-7), 82.2 (C-2), 80.2 (C-4a), 74.1 (C-4), 72.5 (C-10b), 71.1 (C-3), 61.5 (C-11), 60.2 (OCH3)。以上數據與文獻報道數據基本一致[8]，故鑒定化合物2為巖白菜素。

化合物4：黃色粉末，ESI-MS/459.092 2 [M－H]?，結合NMR推測分子式為 C22H20O11。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 13.0 (1H, brs, 5-OH), 7.96 (2H, d,= 8.9 Hz, H-3, 5), 6.86 (1H, s, H-3), 6.85 (1H, d,= 2.2 Hz, H-8), 6.48 (1H, d,= 2.2 Hz, H-6), 5.57 (1H, brs, 2-OH), 5.48 (1H, brs, 4-OH), 5.32 (1H, d,= 7.4 Hz, H-1), 5.30 (1H, brs, 3-OH), 4.22 (1H, d,= 9.3 Hz, H-5), 3.67 (3H, s, 6-OCH3), 3.43 (1H, brt,= 9.4 Hz, H-4), 3.34 (2H, m, H-2, 3)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 182.5 (C-4), 169.7 (C-6′′), 164.8 (C-2), 162.9 (C-7), 161.9 (C-5), 161.7 (C-4′), 129.1 (C-2′, 6′), 121.5 (C-1′), 116.5 (C-3′, 5′), 105.9 (C-10), 103.9 (C-3), 99.8 (C-6), 99.5 (C-1′′), 95.1 (C-8), 75.9 (C-3′), 75.6 (C-5′′), 73.2 (C-2′′), 71.8 (C-4′′), 52.5 (-OCH3)。以上數據與文獻報道數據基本一致[10]，故鑒定化合物4為芹菜素-7--β--葡萄糖醛酸甲酯。

化合物6：黃色粉末，ESI-MS/445.076 2 [M－H]?，結合NMR推測分子式為C21H18O11。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 12.97 (1H, s, 5-OH), 7.93 (2H, d,= 8.5 Hz, H-2′, 6′), 6.94 (2H, d,= 8.6 Hz, H-3′, 5′), 6.84 (1H, s, H-8), 6.45 (1H, d,= 1.8 Hz, H-6), 5.27 (1H, d,= 7.2 Hz, H-1′′), 4.04 (1H, d,= 8.5 Hz, H-5′′), 3.31～3.44 (3H, m, sugar-H)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 182.4 (C-4), 170.8 (C-6′′), 164.8 (C-2), 163.0 (C-7), 161.9 (C-5), 161.6 (C-4), 157.4 (C-9), 129.0 (C-2, 6), 121.4 (C-1), 116.5 (C-3, 5), 105.9 (C-10), 103.5 (C-3), 99.8 (C-1′′), 99.6 (C-6), 95.1 (C-8), 76.2 (C-5′′), 75.8 (C-4′′), 73.2 (C-3′′), 71.8 (C-2′′)。以上數據與文獻報道數據基本一致[12]，故鑒定化合物6為芹菜素-7-- β--葡萄糖醛酸苷。

化合物7：黃色粉末，ESI-MS/461.072 0 [M－H]?，結合NMR推測分子式為C21H18O12。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 7.43 (1H, d,= 2.0 Hz, H-2′), 7.41 (1H, dd,= 8.5, 2.0 Hz, H-6′), 6.91 (1H, d,= 2.0 Hz, H-5), 6.81 (1H, d,= 2.0 Hz, H-8), 6.74 (1H, s, H-3), 6.45 (1H, d,= 2.0 Hz, H-6), 5.27 (1H, d,= 7.0 Hz, H-1′), 4.02 (1H, d,= 8.5 Hz, H-5), 3.28～3.42 (3H, m, sugar-H)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 182.3 (C-4), 171.1 (C-6′′), 165.0 (C-2), 163.0 (C-7), 161.6 (C-5), 157.4 (C-9), 150.5 (C-4′), 146.3 (C-3′), 121.8 (C-1′), 119.6 (C-6′), 116.5 (C-5′), 114.0 (C-2′), 105.9 (C-10), 103.6 (C-3), 99.9 (C-6), 99.7 (C-1′′), 95.0 (C-8), 76.2 (C-3′′), 75.7 (C-5′′), 73.3 (C-2′′), 71.8 (C-4′′)。以上數據與文獻報道數據基本一致[13]，故鑒定化合物7為木犀草素- 7--β--葡萄糖醛酸苷。

化合物8：黃色粉末，ESI-MS/593.151 4 [M－H]?，結合NMR推測分子式為C27H30O15。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 13.72 (1H, s, 5-OH), 8, 03 (2H, d,= 8.7 Hz, H-2′, 6′), 6.91 (2H, d,= 8.7 Hz, H-3′, 5′), 6.80 (1H, s, H-3), 5.07 (1H, d,= 4.6 Hz, H-1), 4.79 (1H, d,= 10.0 Hz, H-1), 3.89 (1H, t,= 9.2 Hz, H-2′′′), 3.75 (1H, m, H-6′′′b), 3.71 (1H, m, H-6′′b), 3.50 (2H, m, H-6′a, 6′′a), 3.28 (3H, m, H-3′′～5′′)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 182.6 (C-4), 164.4 (C-2), 161.7 (C-7, 4′), 159.1 (C-5′), 155.6 (C-9), 129.4 (C-2′, 6′), 122.0 (C-1′), 116.3 (C-3′, 5′), 108.0 (C-6), 105.8 (C-8), 104.1 (C-10), 103.0 (C-3), 82.4 (C-5′′), 81.3 (C-5′′), 79.3 (C-3′′′), 78.4 (C-3′′), 74.6 (C-1′′′), 73.9 (C-1′′), 72.3 (C-2′′′), 71.5 (C-2′′), 71.0 (C-4′′′), 69.5 (C-4′′), 61.8 (C-6′′′), 60.3 (C-6′′)。以上數據與文獻報道數據基本一致[14]，故鑒定化合物8為芹菜素-6,8-二--葡萄糖苷。

化合物9：白色粉末，ESI-MS/353.086 9 [M－H]?，結合NMR推測分子式為C16H18O9。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 7.42 (1H, d,= 16.01 Hz, H-7), 7.03 (1H, d,= 2.0 Hz, H-2), 7.00 (1H, dd,= 2.8 Hz, H-6), 6.76 (1H, d,= 8.1 Hz, H-5), 6.14 (1H, d,= 16.1 Hz, H-8), 5.07 (1H, m, H-3), 3.91 (1H, m, H-4), 3.57 (1H, m, H-5), 2.01 (2H, m, H-2), 1.92 (2H, m, H-6)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 175.5 (C-7), 166.2 (C-9′), 148.8 (C-4′), 146.0 (C-3′), 145.4 (C-7′), 126.0 (C-1′), 121.8 (C-6′), 116.2 (C-5′), 115.2 (C-2′), 114.8 (C-8′), 74.0 (C-1), 71.4 (C-3), 70.9 (C-4), 68.7 (C-5), 37.7 (C-6), 36.8 (C-2)。以上數據與文獻報道數據基本一致[15]，故鑒定化合物9為綠原酸。

在小型農田水利設施建設中，資金的缺乏也是制約其發展的重要因素。在對小型農田水利工程進行建設投資時，絕大部分資金都來自于政府撥款。由于管理經費的短缺、機構不健全，致使小型農田水利工程建成后管理粗放，以及維護管理不足導致各種問題出現，對農民群眾的正常生產與生活都產生了較大影響。盡管在大力扶持水利建設與管理、規劃布局、項目的安排以及資金補助方面都給予了很大傾斜，但資金短缺問題依然存在。

化合物10：白色粉末，ESI-MS/515.128 7 [M－H]?，結合NMR推測分子式為C25H24O12。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 9.27 (4H, brs, Ar-OH), 7.48 (1H, d,= 15.7 Hz, H-7), 7.45 (1H, d,= 15.7 Hz, H-7), 7.05 (2H, brs, H-2, 2), 7.00 (2H, d,= 7.6 Hz, H-6, 6), 6.77 (2H, d,= 7.6 Hz, H-5), 6.21 (2H, d,= 15.6 Hz, H-8, 8), 5.23 (1H, m, H-3), 4.07 (1H, m, H-5), 3.60 (1H, m, H-4), 2.34 (2H, m, H-2, 6)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 173.3 (C-7), 166.5 (C-9′), 165.7 (C-9′′), 148.9 (C-4′′), 148.9 (C-4′), 146.1 (C-3′′), 145.6 (C-7′, 7′′), 126.0 (C-1′, 1′′), 121.8 (C-6′), 121.6 (C-6′′), 116.3 (C-5′), 116.3 (C-5′′), 115.4 (C-2′′), 115.3 (C-2′), 114.7 (C-8′, 8′′), 80.2 (C-1), 71.8 (C-4), 70.5 (C-5), 68.2 (C-3), 36.7 (C-6), 34.7 (C-2)。以上數據與文獻報道數據基本一致[16]，故鑒定化合物10為1,3--二咖啡酰奎寧酸。

化合物11：白色粉末，ESI-MS/337.092 3 [M－H]?，結合NMR推測分子式為C16H18O8。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 7.53 (3H, m, H-2, 6, 7) 6.81 (2H, d,= 9.1 Hz, H-3, 5), 6.31 (1H, d,= 16.2 Hz, H-8), 5.10 (1H, m, H-3), 3.75 (1H, brs, H-5), 3.55 (1H, dd,= 3.0, 7.2 Hz, H-4), 1.80～2.06 (3H, m, H-2, 6a, 6b)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 176.1 (C-7), 166.5 (C-9′), 160.3 (C-4′), 144.9 (C-7′), 130.7 (C-2′, 6′), 125.6 (C-1′), 116.2 (C-3′5′), 115.1 (C-8′), 74.9 (C-1), 71.8 (C-3), 71.5 (C-4), 69.7 (C-5), 40.5 (C-6), 37.8 (C-2)。以上數據與文獻報道數據基本一致[17]，故鑒定化合物11為3--反式對羥基香豆酰奎寧酸。

化合物12：黃色無定形粉末，ESI-MS/447.092 4 [M－H]?，結合NMR推測分子式為 C21H20O11。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 7.44 (1H, dd,= 8.7, 2.0 Hz, H-6′), 7.42 (1H, d,= 2.0 Hz, H-2′), 6.92 (1H, d,= 8.7 Hz, H-5′), 6.80 (1H, d,= 1.8 Hz, H-8), 6.75 (1H, s, H-3), 6.45 (1H, d,= 2.0 Hz, H-6), 5.09 (1H, d,= 7.2 Hz, H-1), 3.18～3.74 (6H, m, H-2～6)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 182.4 (C-4), 164.9 (C-7), 163.4 (C-2), 161.6 (C-5), 157.4 (C-9), 150.4 (C-4′), 146.2 (C-3′), 121.8 (C-1′), 119.6 (C-6′), 116.4 (C-5′), 114.0 (C-2′), 105.8 (C-3), 103.6 (C-10), 100.3 (C-1′), 100.0 (C-6), 95.2 (C-8), 77.6 (C-4′), 76.8 (C-3′), 73.6 (C-2′), 70.0 (C-5′), 61.1 (C-6′)。以上數據與文獻報道數據基本一致[18]，故鑒定化合物12為木犀草素-7--β--葡萄糖苷。

化合物13：黃色針晶（甲醇），mp 346～350 ℃，ESI-MS/285.041 5 [M－H]?，結合NMR推測分子式為C15H10O6。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 7.40 (2H, m, H-2′, 6′), 6.90 (1H, d,= 8.8 Hz, H-5′), 6.65 (1H, s, H-3), 6.44 (1H, d,= 2.0 Hz, H-8), 6.19 (1H, d,= 2.0 Hz, H-6)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 182.1 (C-4), 164.6 (C-7), 164.3 (C-9), 161.9 (C-5), 157.7 (C-3′), 150.1 (C-2), 146.2 (C-4′), 122.0 (C-1′), 119.4 (C-6′), 116.5 (C-2′), 113.8 (C-5′), 104.2 (C-10), 103.3 (C-3), 99.3 (C-8), 94.3 (C-6)。以上數據與文獻報道數據基本一致[19]，故鑒定化合物13為木犀草素。

化合物14：白色粉末，ESI-MS/153.018 3 [M－H]?，結合NMR推測分子式為C7H6O4。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 7.34 (1H, d,= 2.0 Hz, H-2), 7.29 (1H, dd,= 8.2, 2.0 Hz, H-6), 6.79 (1H, d,= 8.2 Hz, H-5)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 167.8 (C-1′), 150.4 (C-4), 145.3 (C-3), 122.3 (C-1), 122.1 (C-6), 117.0 (C-5), 115.6 (C-2)。以上數據與文獻報道數據基本一致[20]，故鑒定化合物14為原兒茶酸。

化合物15：淡黃色粉末，ESI-MS/337.092 4 [M－H]?，結合NMR推測分子式為 C16H18O8。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 7.52 (2H, d,= 8.2 Hz, H-5′, 9′), 6.80 (1H, d,= 12.9 Hz, H-3′), 6.63 (2H, d,= 8.9 Hz, H-6′, 8′), 5.19 (1H, m, H-5), 3.87 (1H, m, H-3), 3.55 (1H, m, H-4), 2.10 (2H, m, H-6), 2.02 (1H, dd,= 3.2, 14.2 Hz, H-2α), 1.90 (1H, m, H-2β)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 176.5 (C-7), 166.6 (C-9′), 160.1 (C-4′), 144.5 (C-7′), 130.6 (C-2′, 6′), 125.7 (C-1′), 116.3 (C-8′), 115.7 (C-3′, 5′), 73.3 (C-1), 71.6 (C-5), 71.4 (C-4), 67.8 (C-3), 40.5 (C-2), 35.5 (C-6)。以上數據與文獻報道數據基本一致[21]，故鑒定化合物15為5--順式對羥基香豆酰奎寧酸。

化合物16：黃色無定形粉末，ESI-MS/353.088 8 [M－H]?，結合NMR推測分子式為 C16H18O9。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 7.42 (1H, d,= 15.9 Hz, H-3′), 7.05 (1H, d,= 1.8 Hz, H-5′), 6.98 (1H, brd,= 8.2 Hz, H-9′), 6.77 (1H, d,= 8.2 Hz, H-8′), 6.16 (1H, d,= 15.9 Hz, H-2′), 5.09 (1H, dd,= 5.0, 17.0 Hz, H-4), 4.76 (1H, d,= 5.0 Hz, H-3), 2.00 (2H, m, H-2), 1.79 (2H, m, H-6)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 175.6 (C-7), 166.3 (C-1′), 148.8 (C-7′), 146.0 (C-6′), 145.4 (C-3′), 126.0 (C-4′), 121.8 (C-9′), 116.2 (C-8′), 115.2 (C-2′), 114.8 (C-5′), 74.1 (C-1), 71.4 (C-4), 71.1 (C-3), 68.8 (C-5), 37.7 (C-6), 37.2 (C-2)。以上數據與文獻報道數據基本一致[22]，故鑒定化合物16為1--咖啡酰奎寧酸。

化合物17：黃色無定形粉末，ESI-MS/353.091 2 [M－H]?，結合NMR推測分子式為 C16H18O9。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 7.50 (1H, d,= 15.9 Hz, H-7′), 7.06 (1H, s, H-2′), 7.01 (1H, d,= 7.6 Hz, H-6′), 6.77 (1H, d,= 7.6 Hz, H-5′), 6.28 (1H, d,= 15.9 Hz, H-8′), 4.87 (1H, d,= 4.8 Hz, H-4), 4.67 (1H, dd,= 8.0, 5.0 Hz, H-3), 4.10 (1H, brs, H-5)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 176.0 (C-7), 166.8 (C-9′), 148.8 (C-4′), 145.3 (C-3′), 126.1 (C-1′), 121.7 (C-6′), 116.3 (C-5′), 115.2 (C-8′), 115.1 (C-2′), 77.3 (C-4), 74.5 (C-1), 66.9 (C-3), 64.5 (C-5), 40.4 (C-6), 38.3 (C-2)。以上數據與文獻報道數據基本一致[23]，故鑒定化合物17為隱綠原酸。

化合物18：黃色無定形粉末，ESI-MS/337.093 5 [M－H]?，結合NMR推測分子式為 C16H18O8。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 7.60 (2H, d,= 8.9 Hz, H-3′, 5′), 7.53 (1H, m, H-7′), 6.75 (2H, d,= 9.0 Hz, H-2′, 6′), 5.69 (1H, d,= 13.2 Hz, H-8′), 3.94 (1H, s, H-3), 3.57 (1H, dd,= 3.0, 8.4 Hz, H-4), 2.00 (2H, m, H-6)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 175.4 (C-7), 166.2 (C-9′), 160.2 (C-4′), 145.0 (C-7′), 130.7 (C-2′, 6′), 125.6 (C-1′), 116.2 (C-3′, 5′), 115.0 (C-8′), 74.0 (C-1), 70.9 (C-5), 70.6 (C-3), 68.6 (C-4), 37.6 (C-2), 37.6 (C-6)。以上數據與文獻報道數據基本一致[24]，故鑒定化合物18為5--反式對羥基香豆酰奎寧酸。

化合物19：黃色無定形粉末，ESI-MS/515.123 5 [M－H]?，結合NMR推測分子式為C25H24O12。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 9.53 (2H, brs, 4′, 4′′-OH), 9.08 (2H, brs, 3′, 3′′-OH), 7.43 (1H, d,= 15.8 Hz, H-7′), 7.39 (1H, d,= 15.8 Hz, H-7′′), 7.01 (1H, s, H-2′), 6.99 (1H, s, H-2′′), 6.91 (2H, d,= 8.1 Hz, H-6′, 6′′), 6.74 (2H,= 8.1 Hz, H-5′, 5′′), 6.21 (1H, d,= 15.8 Hz, H-8′), 6.07 (1H, d,= 15.8 Hz, H-8′′), 5.29 (1H, m, H-3), 5.02 (1H, m, H-5), 4.00 (1H, m, H-3)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 173.0 (C-7), 166.5 (C-9′), 165.7 (C-9′′), 148.9 (C-3′), 148.5 (C-3′′), 146.0 (C-7′), 145.8 (C-7′′), 145.3 (C-4′, 4′′), 125.8 (C-1′), 125.7 (C-1′′), 121.4 (C-6′), 120.4 (C-6′′), 116.3 (C-2′), 116.3 (C-2′′), 116.2 (C-5′), 115.7 (C-5′′), 114.9 (C-8), 114.5 (C-8′), 79.9 (C-1), 73.3 (C-5), 71.5 (C-4), 66.4 (C-3), 32.3 (C-2, 6)。以上數據與文獻報道數據基本一致[25]，故鑒定化合物19為3,5--二咖啡酰奎寧酸。

化合物20：白色無定形粉末，ESI-MS/587.213 5 [M－H]?，結合NMR推測分子式為 C30H36O12。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 7.48 (1H, d,= 15.9 Hz, H-β), 7.02 (1H, d,= 2.0 Hz, H-2′′), 6.98 (1H, m, H-6′′), 6.77 (1H,= 8.1 Hz, H-5′′), 6.20 (1H, d,= 16.0 Hz, H-α), 5.15 (1H, d,= 1.1 Hz, H-15), 5.13 (1H, d,= 1.1 Hz, H-15), 4.94 (1H, s, H-14), 4.82 (1H, s, H-14), 4.70 (1H, m, H-2′), 4.54 (1H, d,= 8.1 Hz, H-1′), 4.46 (1H, m, H-3), 3.94 (1H, t,= 10.0 Hz, H-6), 1.05 (3H, d,= 7.54 Hz, H-13)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 179.3 (C-7), 166.0 (C=O), 149.9 (C-4), 148.9 (C-3′′), 146.0 (C-4′′), 145.6 (C-β), 144.4 (C-10), 126.0 (C-1′′), 121.7 (C-6′′), 116.2 (C-5′′), 115.2 (C-14), 114.5 (C-2′′), 113.2 (C-15), 99.4 (C-1′), 79.8 (C-3), 79.1 (C-6), 77.5 (C-5′), 74.8 (C-2′), 74.1 (C-3′), 70.9 (C-8), 69.2 (C-4′), 61.4 (C-6′), 52.6 (C-7), 49.4 (C-5), 46.0 (C-9), 43.6 (C-1), 38.3 (C-11), 36.8 (C-2), 11.1 (C-13)。以上數據與文獻報道數據基本一致[26]，故鑒定化合物20為2′---caffeoyl-8α-hydroxy-11α,13-dihydro-3β--β--glucozaluzanin C。

4 討論

本實驗對杏香兔耳風的乙醇提取物進行化學成分研究，從中分離并鑒定了20個化合物，包括4個倍半萜類化合物，9個酚酸類化合物，6個黃酮類化合物，1個異香豆素類化合物，其中化合物2、4～8、11、15～16、18為首次從兔耳風屬植物中分離得到，之前關于兔耳風屬的黃酮苷類化學成分多集中于葡萄糖類黃酮，本研究首次在杏香兔耳風植物中分離得到3個葡萄糖醛酸化黃酮苷，可能為杏香兔耳風植物的專屬性成分。根據文獻報道，分離得到的化合物具有良好的生物活性，其中酚酸類成分綠原酸（9）、3,5--二咖啡酰奎寧酸（19）有效降低NIH3T3細胞中炎癥調節因子PGE2的生成[27]，黃酮類成分木犀草素-7--β--葡萄糖苷（12）、木犀草素（13）對心肌細胞具有保護作用[28-29]、抗炎作用[27]，芹菜素-6,8-二-C-葡萄糖苷（8）具有抗氧化活性[30]。倍半萜類成分glucozaluzanin C（3）對人腫瘤細胞株具有顯著的非特異性細胞毒性[31]，3β--β--glucopyranosyl-8α-hydroxy-11α,13-dihydro- zaluzanin C（1）、2′---caffeoyl-8α-hydroxy-11α,13- dihydro-3β--β--glucozaluzanin C（20）具有抗環氧合酶1和2作用[26]。上述分離得到的化合物可能為杏香兔耳風的活性物質。本研究進一步豐富了杏香兔耳風的化學成分，為杏香兔耳風藥效物質基礎的進一步闡明奠定了基礎。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

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Study on chemical constituents of

XU Zhen-quan1, HE Ming-zhen1, YAO Min1, 3, WANG Zhao-jun1, OUYANG Hui1, LI Zhi-feng1, YANG Shi-lin1, 2,LI Jun-mao1, FENG Yu-lin1, 2

1. National Pharmaceutical Engineering Center for Solid Preparation in Chinese Herbal. Medicine, Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine, Nanchang 330006, China 2. State Key Laboratory of Innovative Medicine and High Efficiency and Energy Saving Pharmaceutical Equipment, Nanchang 330006, China 3. Jiangxi Institute for Drug Control, Nanchang 330029, China

To investigate chemical constitutes of.The compounds were isolated and purified by solvent extraction, macroporous adsorbent resin, silica gel column chromatography, ODS and semi-preparative HPLC. The structures of the compounds were elucidated by spectral analyses, including MS and NMR spectral techniques.Twenty compounds were isolated fromand were identified as 3β--β--glucopyranosyl-8α-hydroxy-11α,13- dihydrozaluzanin C (1), bergenin monohydrate (2), glucozaluzanin C (3), apigenin 7--β-(6′′-methylglucuronide) (4), costunolide-15-β--glucopyranoside (5), apigenin-7--β--glucuronopyranoside (6), luteolin-7--β--glucuronopyranoside (7), apigenin-6,8-di-C-β--glucopyranoside (8), chlorogenic acid (9), 1,3-di--caffeoylquinic acid (10), 3----coumaroylquinic acid (11), luteolin-7--β--glucoside (12), luteolin (13), protocatechuic acid (14), 5---coumaroylquinic acid (15), 1-- caffeoylquinic acid (16), cryptochlorogenic acid (17), 5---coumaroylquinic acid (18), 3,5--dicaffeoylquinic acid (19), and 2′---caffeoyl-8α-hydroxy-11α,13-dihydro-3β--β--glucozaluzanin C (20).Compounds 2, 4—8, 11, 15—16 and 18 were isolated from the genusfor the first time.

DC.;Champ.; cafeoyl quinic acid; apigenin-7--β--glucuronopyranoside; luteolin-7--β--glucuronide; apigenin-6,8-di-C-β--glucopyranoside

R284.1

A

0253 - 2670(2023)06 - 1728 - 08

10.7501/j.issn.0253-2670.2023.06.004

2022-11-11

國家自然科學基金資助項目（82173945）；國家自然科學基金資助項目（81760702）；國家自然科學基金資助項目（81560636）；江西省教育廳科學技術研究項目（GJJ211261）；江西省食品監督管理局科研項目（2020JS10）；江西省衛生健康委員會科技計劃項目（202211429）；江西省中醫藥管理局科技計劃項目（2022A366）；江西中醫藥大學創新基金項目（JZYC22S60）；江西中醫藥大學校級科技創新團隊發展計劃（CXTD22001）

徐貞權，男，碩士研究生，從事中藥活性成分研究。E-mail: xzq330225@qq.com

李軍茂，男，博士，講師，從事中藥活性成分和藥物代謝研究。E-mail: ljm3039@163.com

馮育林，男，博士，教授，從事中藥藥效物質及新藥研究。E-mail: fengyulin2003@126.com

[責任編輯 王文倩]