1 064 nm激光致小型豬皮膚損傷效應及其修復的研究

馬瓊 劉智搏 隗雨 崔玉芳 羅振坤 康宏向

摘 要：為探討不同劑量1 064 nm激光照射后豬皮膚組織損傷效應和修復的規律，為擴大激光的臨床應用提供指導，本文采用基模光纖激光器輸出不同功率1 064 nm的連續激光，通過方格陣列法對活體豬皮膚進行單次照射，劑量由小到大依次照射后，即刻觀察皮膚損傷反應并計算其發生率，采用加權概率單位法計算損傷閾值ED50，并在照后6 h至28 d動態觀察激光皮膚損傷斑的愈合情況和病理形態學變化。隨著激光輻照劑量的增加，皮膚損傷由輕到重依次出現紅斑、白斑和焦斑等不同類型的損傷斑。劑量低于70.0 J/cm2時，豬皮膚損傷表現為可逆的紅斑反應；劑量為192.2 J/cm2時，豬皮膚損傷以焦斑為主（發生率約為51.4 %）；而劑量為425.0 J/cm2時，豬皮膚焦斑發生率可達到100.0%。1 064 nm激光致豬皮膚損傷閾值ED50為50.8 J/cm2。病理形態學觀察結果顯示，照射后3～28 d，各照射組創面均出現不同程度的修復趨勢，但這種趨勢隨著照射強度的增加而趨于減弱，且高于192.2 J/cm2的激光輻照組恢復趨勢緩慢。小型豬皮膚經1 064 nm激光照射后，輻照劑量越大，皮膚損傷越重，組織修復趨勢越慢，顯示出較好的量效關系。本研究為激光皮膚損傷和修復過程的醫療應用提供了重要的試驗和理論依據。

關鍵詞：1 064 nm激光；小型豬；皮膚損傷閾值；皮膚損傷效應；修復

中圖分類號：TN249 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 文獻標志碼：ADOI：10.3969/j.issn.1007-7146.2023.04.004

Research on the Damage Effects and Repair Rules of Miniature Pig Skin Induced by a 1 064 nm Laser

MA Qiong1， LIU Zhibo1， WEI Yu2， CUI Yufang1， LUO Zhenkun1， KANG Hongxiang1， 2*

（1. Institute of Radiation Medicine， Academy of Military Medical Sciences， Beijing 100850， China; 2. College of Life Sciences， Hebei University， Baoding 071000， China）

Abstract： The damage effects and repair rules of pig skin tissue after different doses of 1 064 nm laser irradiation were explored， so as to provide guidance for expanding the safe application of laser in clinical practice. This article used a fundamental mode fiber laser to output 1 064 nm continuous laser with different powers. Live pig skin was irradiated at multiple spots one time by using a grid-array method. The skin injury reaction was observed and its incidence was calculated immediately after laser irradiation from low to high doses. The weighted probit method was used to calculate the damage threshold ED50. The healing and pathological changes after laser-induced skin injury were observed dynamically within 6 h and for 28 d after laser irradiation. With the increase of irradiation dose， laser-induced skin injuries ranging from mild to severe appeared erythema， white spot and burnt spot in turn. When the dose was lower than 70.0 J/cm2， a reversible erythema predominantly occurred. When the dose was 192.2 J/cm2， a burnt spot predominantly occurred with an incidence of about 51.4 %. However， the incidence of burnt spots could reach 100.0% at a dose of 425.0 J/cm2. The damage threshold ED50 of pig skin damage caused by a 1 064 nm laser is 50.8 J/cm2. 3～28 d after irradiation， pathomorphological results showed that the wounds of each irradiation group appeared varying degrees of repair trend. However， this trend tended to be weakened with the increase of laser irradiation intensity， and the recovery trend of laser irradiation groups higher than 192.2 J/cm2 was slow. After irradiation with the 1 064 nm laser on pig skin， the higher the laser irradiation dose is， the more serious the skin injury is and the slower the wound repair is， indicating a good dose-effect correlative relationship. This study provides an important experimental and theoretical basis for the medical application of laser irradiation-induced skin injury and repair process.

Key words： 1 064 nm laser; miniature pig; skin damage threshold; skin damage effects; repair

（Acta Laser Biology Sinica， 2023， 32（4）： 312-320）

隨著激光技術在醫療、軍事和工業的應用越來越廣泛［1-2］，激光意外損傷事故時有發生，尤其是工業或軍事應用中高功率激光造成的意外損傷。一直以來，激光生物學效應的研究以往多集中在激光眼損傷，對激光所致的皮膚損傷效應研究也有報道［3-5］。激光輻照對皮膚的損傷程度跟激光功率密度和輻照時間的長短有關［6］。當前，激光在皮膚的治療或美容醫療中已有廣泛的應用［7-9］。多數研究認為，激光對皮膚的治療效果、損傷效果主要是利用激光的光熱效應，即激光與皮膚組織相互作用時產生的熱量，使組織達到治療應有的熱效應或是損傷程度［10-12］。Dang等［13］研究發現，1 064 nm激光非消融治療可以提高小鼠皮膚彈性，增加皮膚組織膠原蛋白。他們認為，光熱效應促進了I型膠原蛋白的合成。Kim等［14］利用1 064 nm激光，通過光熱分解效應消融大鼠的表皮和真皮，以去除良性皮膚病變。他們認為，該激光是治療良性皮膚病的替代治療選擇。合理有效地利用激光與生物組織相互作用時產生的熱量，使組織達到應有的熱效應或是損傷程度，這是激光對疾病進行診斷或治療的關鍵。然而，防止多余的熱量對臨近正常組織造成意外損傷是激光醫學需要防護的最主要的內容。

過大的激光劑量，如高功率工業激光或激光武器使用不當可能導致皮膚發生激光燒傷，而且不同劑量的激光輻照會對皮膚產生不一樣的效果。開展多激光輻照劑量的試驗研究能夠為臨床治療或者損傷防護提供重要的理論支撐。當前高功率激光導致的皮膚嚴重損傷及愈合研究較少。激光皮膚損傷愈合是一個極復雜的過程，而且涉及的重要生物學效應及相關機制也亟待深入研究。前期本課題開展的30 W/mm2 1 064nm激光不同輻照時間對小鼠皮膚熱損傷的試驗研究發現：輻照時間為0～100 ms時，皮膚組織損傷可恢復；150～280 ms時，皮膚組織出現水腫現象和熱凝固損傷；280～550 ms時，皮膚表皮層出現汽化現象，真皮層發生變性，損傷斑周圍出現焦痂；大于660 ms時，皮膚表皮真皮層出現汽化現象，皮下組織發生變性，傷口滲出組織液［15］。前期本課題組開展的400 ms 1 064 nm激光不同功率密度對小鼠皮膚熱損傷的試驗研究發現：功率密度小于958 W/cm2時，皮膚表皮層泛紅且損傷可逆；958～1 160 W/cm2 時，皮膚損傷呈白色水皰狀；1 160～1 370 W/cm2時，皮膚損傷呈淺坑狀焦黃斑，且周圍伴有鼓起的白色皮膚水皰；1 370～2 190 W/cm2時，皮膚損傷呈紅色坑狀斑，且周圍伴有黑黃色焦痂［16］。

小型豬皮膚與人皮膚結構較嚙齒類動物更相似，具有相似的皮膚生理結構、表皮形態學、更新周期以及創傷修復模式，甚至皮膚燒傷后的體液和代謝也非常相似，故小型豬可作為激光灼傷研究更理想的動物模型。本研究以1 064 nm激光為光源，采用不同劑量和多點依次單次照射方式對小型豬進行照射，建立激光豬皮膚損傷的動物模型，觀察激光皮膚損傷斑及其損傷反應發生率，計算激光皮膚損傷閾值ED50，并通過觀察豬皮膚損傷后的病理形態學改變，探討1 064 nm激光照射后小型豬皮膚組織損傷效應和修復的變化特點及其劑量效應關系。

1 材料與方法

1.1 試驗動物

貴州白色小型香豬（Sus barbatus）6只，體重為20～25 kg，購自北京科興實驗動物飼養中心，動物生產許可證編號為SCXK（北京）2017-0003，由本院實驗動物中心統一單籠飼養。在試驗前常規飼養7 d，觀察無異常后方可進行試驗。本動物試驗方案獲得了本院實驗動物中心批準，并根據IACUC-DWZX-2019-502指南對豬進行所有動物試驗。

1.2 激光皮膚損傷的照射方法

小型豬經3%戊巴比妥鈉肌肉麻醉后剃毛備皮，在脊柱單側皮膚上畫定一個5×10方格陣列的激光照射區域，方格邊長為3 cm，面積為15 cm×30 cm。本試驗采用國防科技大學自主研制的基模光纖激光器，輸出的1 064 nm連續激光經光纖傳導與激光輸出頭耦合，經透鏡擴束和準直后，照射活體豬皮膚；通過電腦程序控制激光功率和照射時間，并通過PD300-3W-V1激光功率計測量激光照射功率；定位環用于控制激光裝置尖端到皮膚的距離為10 cm。該激光器連續輸出激光的功率P的范圍為12～1 112 W，激光器的輸出功率穩定，與電流具有良好的線性關系（線性相關系數R2>0.99）。設定激光輻照時間t為0.3 s，光斑直徑d為1 cm，利用公式Q=Pt和 H=計算激光能量Q和激光輻照劑量H，得出激光照射的最小激光輻照量為4.59 J/cm2，最大激光輻照量為425.00 J/cm2。每個方格為一個照射點位，每列5個方格給予相同的激光輻照劑量，激光功率由小到大依次進行照射。激光照射活體小型豬皮膚的光路如圖1所示。試驗的照射方法如圖2所示。

1.3 激光皮膚損傷和愈合的宏觀觀察

激光輻照劑量低時，皮膚主要出現紅斑反應；輻照劑量增加到一定數值時，皮膚出現中心小白色凝固斑，伴外周較大環狀紅斑；劑量再增大時，白色凝固斑面積增大，中心部位的皮膚出現淡褐色焦斑［17］。激光照射功率由低到高依次照射，照射過程中記錄各類型損傷斑（紅斑、白斑和焦斑）以及出現時的輻照劑量，特別是于照后即刻動態記錄紅斑顏色及持續時間；于照射后6 h、3 d、7 d、14 d、21 d和28 d共6個時間點宏觀觀察并拍照記錄皮膚損傷創面的愈合情況。

1.4 損傷反應的發生率及皮膚損傷閾值的計算

激光照射后皮膚出現紅斑是最輕的反應，也是可逆反應。紅斑反應的發生率是以照后即刻出現肉眼可見的紅斑（血管充血）為判定標準的，由兩人觀察核對為準。記錄紅斑發生的點數和照射的總點數，據此計算紅斑反應發生率（計算公式：發生率=損傷斑點數÷照射點總數×100%）；照后觀察并記錄白斑包括中心小白斑發生點數和照射總點數，據此計算白斑反應的發生率；同樣的方法計算焦斑反應的發生率。激光損傷閾值研究的經典統計學方法是加權概率單位法，即Bliss法［18］，以激光劑量的對數值為橫坐標，以紅斑反應百分率轉化成概率單位為縱坐標，建立線性回歸方程，求出50%損傷（概率單位為5）對應的激光劑量，即為損傷閾值，并用ED50來表示。

1.5 皮膚損傷創面愈合的病理學觀察

于激光照射后6 h、3 d、7 d、14 d、21 d和28 d共6個時間點，分別安樂死處死1只動物進行皮膚創面組織取材，置于4%中性福爾馬林溶液中保存，制成石蠟切片，然后進行蘇木精-伊紅染色（hematoxylin-eosin staining，HE），光鏡下觀察皮膚創面組織在激光照射后不同時間的病理形態學變化（放大倍數為100×）。

1.6 統計學分析

采用SPSS軟件進行數據分析，直接使用軟件進行概率單位加權回歸法計算損傷閾值ED50以及95%置信區間。

2 結果與分析

2.1 激光皮膚損傷創面愈合的宏觀變化

小型豬皮膚經29.3～425.0 J/cm2劑量的1 064 nm激光由低到高依次照射0.3 s后，即刻進行皮膚損傷部位的宏觀觀察，發現：隨著劑量增高，皮膚損傷由輕至重依次為紅斑、中心小白斑、白斑、中心小焦斑、焦斑等各種類型的損傷，其中紅斑出現數秒、數十秒或10 min后消失；而中心小白斑、白斑、中心小焦斑和焦斑外周均伴有環形紅斑，且30 min或大于1 h后才消失，如圖3所示。

激光照射后6 h、3 d、7 d、14 d、21 d和28 d，依據損傷斑嚴重程度選擇低、中、高3個劑量，分別為134.0、192.2和308.6 J/cm2，動態觀察激光照射后皮膚損傷創面的宏觀愈合情況（圖4）。試驗動物在抓取固定過程中容易發生劇烈碰撞而導致傷口撕裂，多次麻醉會明顯增加動物死亡的風險，因此，本試驗采用不同時間點觀察不同待處死動物的方法，而未采取觀察28 d組動物的方法。結果顯示：不同劑量照射后6 h，134.0 J/cm2低劑量組損傷斑以凝固斑為主，且創面腫脹但未發生破損，192.2 J/cm2中劑量組損傷斑以白色凝固斑和中心小焦斑為主，308.6 J/cm2高劑量組損傷斑以焦斑為主，中、高劑量組創面均發生破損，并伴有不同程度激光燒灼坑；照射后3 d，激光皮膚各類損傷斑創面干燥，未見滲出，皮膚損傷面積隨劑量增加而增大；照射后7 d，各損傷斑創面開始出現不同程度的結痂，且損傷創面較初始創面有增大的趨勢，尤其是308.6 J/cm2高劑量組創面結痂明顯，且損傷創面變大；照射后14 d，損傷斑創面已經完全結痂，且134.0 J/cm2低劑量組創面有明顯縮小的趨勢；照射后21 d和28 d，除低劑量組愈合明顯外，中、高劑量組損傷創面結痂仍較明顯，未見脫痂跡象，創面愈合緩慢。從以上結果可看出，激光輻照劑量越大，皮膚損傷越明顯（表現為創面面積大、結痂程度重等），創面愈合速度越緩慢，呈現出較好的劑量效應關系。

2.2 皮膚損傷反應的發生率及損傷閾值

小型豬經1 064 nm激光照射0.3 s后，激光輻照劑量為46.7 J/cm2時，豬皮膚紅斑發生率僅為34.3%；劑量為52.5 J/cm2時，豬皮膚紅斑發生率為43.3%；劑量達到70.0 J/cm2時，豬皮膚紅斑發生率達到100.0%（表1），但未見白色凝固斑損傷。

紅斑反應是激光皮膚損傷最輕且可逆的損傷反應，利用上表中紅斑反應發生率數據并通過加權概率單位法計算激光皮膚損傷閾值，以激光劑量的對數值為橫坐標，以紅斑反應百分率轉化成概率單位為縱坐標，建立線性回歸方程y=13.039x-17.23，且線性相關系數R2=0.966 2，求出50%損傷（概率單位為5）對應的激光劑量作為損傷閾值，用ED50來表示。計算得出ED50=50.8 J/cm2，且置信系數α=0.05時，即95%置信區間為47.9～53.0 J/cm2（圖5）。

進一步對激光照射后，損傷斑發生率的分析結果顯示：輻照劑量為104.9 J/cm2時，豬皮膚紅斑和白斑發生率分別為13.3%和86.7%（n=30）；劑量增加到192.2 J/cm2時，白斑、焦斑發生率分別為48.6%和51.4%（n=35）；劑量增加到308.6 J/cm2時，白斑、焦斑發生率分別為11.4%和88.6%（n=35）；而當劑量達到425.0 J/cm2時，豬皮膚焦斑發生率達到100.0%。以上結果表明，激光劑量越高，皮膚損傷越重。

2.3 激光皮膚損傷創面愈合的病理學變化

1 064 nm激光照射后6 h、3 d、7 d、14 d、21 d和28 d，動態觀察小型豬皮創面愈合的病理形態學改變（圖6）。照后6 h，真皮淺層腺體周圍結構松散，192.2 J/cm2組表皮和真皮間出現裂隙，308.6 J/cm2組表皮下膠原變性、局部表皮細胞明顯壞死。照后3 d，134.0 J/cm2組局部表皮增厚，仍可見真皮淺層腺體結構松散；192.2 J/cm2和308.6 J/cm2組可見大片表皮壞死脫落，膠原變性、表皮細胞壞死加重。照后7 d，各組新生粗厚表皮向創面延伸生長，192.2 J/cm2和308.6 J/cm2組真皮淺層局部可見變性壞死的膠原纖維和大量的炎性細胞。照后14 d，134.0 J/cm2組局部表皮較厚且已經完全覆蓋創面，表皮下真皮淺層新生膠原纖維和肉芽組織明顯，且肉芽組織中含有較多梭形的成纖維細胞；192.2 J/cm2組新生表皮形態不佳，真皮淺層新生膠原纖維明顯并向創面中心延伸生長；308.6 J/cm2組新生表皮向創面延伸生長但未覆蓋創面表面，仍可見片狀炎性細胞浸潤灶，真皮淺層膠原增生不良。照后21 d，134.0 J/cm2組除局部表皮較厚外，表皮和真皮層基本恢復至正常組織結構；192.2 J/cm2組新生粗厚表皮下可見部分肉芽組織，真皮淺層新生膠原纖維明顯增加；308.6 J/cm2組壞死脫落的表皮下新生表皮已覆蓋創面但粗厚形態欠佳，真皮淺層可見明顯的肉芽組織、膠原纖維增多但纖細且結構混亂。照后28 d，134.0 J/cm2組表皮厚度變薄，表皮真皮層基本恢復至正常組織結構；192.2 J/cm2組新生表皮仍較厚，真皮淺層膠原纖維明顯增多但仍未達到正常水平；308.6 J cm2組新生表皮較厚，真皮淺層仍可見晚期肉芽組織，膠原纖維仍纖細且含量遠不及正常水平。

3 討論

激光生物學效應的研究一直是激光醫學領域研究的前沿內容，而激光對皮膚的損傷效應的研究又是激光生物學研究的重要內容，目前涉及此方面的研究還非常少。皮膚作為人體最外層的器官，相較于其他組織更易遭受熱損傷。在激光熱療過程中，皮膚表面溫度會瞬間升高到一定的值，這一過程極易引起皮膚灼傷，進而誘發皮膚膠原蛋白變性，生物組織內部的蛋白質以及細胞器的結構發生變化，導致細胞死亡甚至組織壞死［19］。本研究采用與人的皮膚結構相似的小型豬作為試驗動物。小型豬表皮層同樣是由基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質層組成，真皮層則由乳頭層和網織層構成，還包含皮下組織及皮膚附屬器［20-21］。

1 064 nm激光照射后豬皮膚損傷和修復的宏觀觀察結果顯示，隨著輻照劑量的增加，豬皮膚損傷由輕到重依次出現紅斑、中心小白斑、白斑、中心小焦斑和焦斑。激光照射皮膚出現紅斑、白斑、焦斑的輻照劑量分別為46.7、104.9、134.0 J/cm2；皮膚白斑損傷創面在照后3～7 d仍清晰可見，14 d時消退結痂；皮膚焦斑損傷創面在照后3～7 d形成薄痂，14 d結痂明顯，并且在照后28 d仍清晰可見；以白斑損傷為主的134.0 J/cm2組皮膚創面愈合較快，且在28 d基本愈合，以焦斑損傷為主的192.2 J/cm2組和308.6 J/cm2組皮膚創面愈合緩慢，在28 d時結痂仍較明顯且未見脫痂跡象。以上結果表明，激光輻照劑量越高，皮膚損傷越嚴重，愈合速度越緩慢。馬寶章等［22］研究發現，1.06 μm連續激光照射白毛豬的皮膚損傷閾值ED50為59.4 J/cm2。本研究獲得的皮膚損傷閾值ED50為50.8 J/cm2，兩者數值接近。豬品種、激光照射條件不相同導致數值存在一定的差異；試驗動物個體差異（皮膚厚度、顏色、部位等）導致相同劑量照射后皮膚損傷斑并不完全一致，如192.2 J/cm2時，白斑、焦斑發生率分別為48.6%和51.4%，另外，皮膚組織的高度不均勻性導致激光輻射熱傳導過程復雜，且存在較大差異。

皮膚創面損傷和修復的病理形態學觀察結果顯示：激光照射后早期（6 h和3 d），192.2 J/cm2組表皮和真皮間出現裂隙；隨著劑量增大，308.6 J/cm2組表皮下出現膠原變性，局部表皮壞死。照射后中期（7 d和14 d），134.0 J/cm2組修復明顯，而192.2 J/cm2和308.6 J/cm2組新生表皮向創面延伸生長但形態不佳，后者甚至還未覆蓋創面表面。照射后后期（21 d和28 d），134.0 J/cm2組基本愈合，而192.2 J/cm2和308.6 J/cm2組新生表皮仍較厚，真皮淺層膠原纖維增多，但仍未達到正常水平。激光照射后，皮膚創面組織的愈合趨勢分析結果顯示：照射后3 d，各照射組創面均出現不同程度的修復趨勢，但這種趨勢隨著激光照射強度的增加而趨于減弱；照射后7～14 d，各照射組創面修復趨勢明顯，但劑量高于192.2 J/cm2時，皮膚焦斑損傷創面恢復趨勢明顯減弱；照射后21～28 d，134.0 J/cm2組白斑損傷創面基本修復，而中高劑量組創面未完全修復且趨勢緩慢。以上結果也表明，激光輻照劑量越大，皮膚損傷越重，而其愈合趨勢越慢。

綜上，小型豬經1 064 nm激光輻照后，隨著劑量的增加，皮膚損傷由輕到重依次出現紅斑、白斑和焦斑不同類型的損傷斑塊，這些損傷斑的發生發展和消退均顯示出各自的特點或規律。本研究試驗條件下所得到的激光皮膚損傷閾值ED50為50.8 J/cm2。皮膚創面的病理形態與宏觀觀察結果均表明，激光輻照劑量越大，皮膚損傷越重，組織修復趨勢越慢，并顯示出較好的量效關系。以上結果無疑為擴大激光的臨床應用提供了較好的試驗和理論依據。

參考文獻（References）：

［1］ NAFISAH S， TUKIRAN Z， SHENG L W， et al. Laser technology applications in critical sectors： military and medical［J］. Penerbit UTHM， 2021， 2（1）： 38-48.

［2］ 王獅凌， 房豐洲. 大功率激光器及其發展［J］. 激光與光電子學進展， 2017， 54（9）： 51-64.

WANG Shiling， FANG Fengzhou. High power laser and its development［J］. Laser & Optoelectronics Progress， 2017， 54（9）： 51-64.

［3］ 陳鵬， 康宏向， 高榮蓮， 等. KGF-2治療激光角膜灼傷的形態計量學研究［J］. 首都公共衛生， 2010， 4（4）： 151-152.

CHEN Peng， KANG Hongxiang， GAO Ronglian， et al. Therapeutic effects of keratinocyte growth factor-2 on laser-induced corneal burns in rabbits［J］. Capital Journal of Public Health， 2010， 4（4）： 151-152.

［4］ NARAYANAN R， TYAGI M， SAHOO N K， et al. Accidental self-inflicted handheld laser-induced maculopathy［J］. Ocular Immunology and Inflammation， 2023， 31（1）： 211-214.

［5］ BHAVSAR K V， MICHEL Z， GREENWALD M， et al. Retinal injury from hand-held lasers： a review［J］. Survey of Ophthalmology， 2021， 66（2）： 231-260.

［6］ 金清理， 柯見洪， 薛漫芝. He-Ne激光對人體傷害的分析及防護措施［J］. 激光技術， 2003， 27（2）： 153-157.

JIN Qingli， KE Jianhong， XUE Manzhi. A study on irradiation damage of He-Ne laser and its protections ［J］. Laser Technology， 2003， 27（2）： 153-157.

［7］ KIM K， DESAI M， ELSENSOHN A， et al. A systematic review of laser therapy for vulvar skin conditions［J］. Journal of the American Academy of Dermatology， 2023， 88（5）： 1200-1201.

［8］ 蔡宏， 王毅俠， 張玉寶， 等. 激光技術對創傷后皮膚瘢痕的康復治療［J］. 中國美容整形外科雜志， 2018， 29（3）： 129-132.

CAI Hong， WANG Yixia， ZHANG Yubao， et al. Laser technology in rehabilitation of skin scar after trauma［J］. Chinese Journal of Aesthetic and Plastic Surgery， 2018， 29（3）： 129-132.

［9］ GIANFALDONI S， TCHERNEV G， WOLLINA U， et al. An overview of laser in dermatology： the past， the present and … the future （？）［J］. Open Access Macedonian Journal of Medical Sciences， 2017， 5（4）： 526-530.

［10］ ANDERSON R， PARRISH J. Selective photothermolysis： precise microsurgery by selective absorption of pulsed radiation［J］. Science， 1983， 220（4596）： 524-527.

［11］ 王晗. 激光熱痛刺激引起的皮膚組織溫度分布的研究［D］. 北京： 北京協和醫學院， 2017.

WANG Han. Study on the temperature distribution in skin tissue induced by laser based on thermal pain stimulation［D］. Beijing： Peking Union Medical College， 2017.

［12］ YUN S H， KWOK S J J. Light in diagnosis， therapy and surgery［J］. Nature Biomedical Engineering， 2017， 1（1）： 0008.

［13］ DANG Y Y， REN Q S， LIU H X， et al. Comparison of histologic， biochemical， and mechanical properties of murine skin treated with the 1 064 nm and 1 320 nm Nd：YAG lasers［J］. Experimental Dermatology， 2010， 14（12）： 876-882.

［14］ KIM H J， LEE G M， PARK Y L， et al. Comparison of wound repair after irradiation of rat skin with 1 064 nm Nd：YAG， CO2， and Er：YAG lasers［J］. Korean Journal of Dermatology， 2014， 52（4）： 244-251.

［15］ 周巡， 馬瓊， 劉智搏， 等. 1 064 nm激光不同輻照時間對小鼠皮膚熱損傷的實驗與理論研究［J］. 強激光與粒子束， 2022， 34（1）： 153-158.

ZHOU Xun， MA Qiong， LIU Zhibo， et al. 1 064 nm laser induced thermal injure in mice skin with different laser duration［J］. High Power Laser and Particle Beams， 2022， 34（1）： 153-158.

［16］ 劉智搏， 馬瓊， 周巡， 等. 不同功率密度1 064 nm激光輻照下小鼠皮膚熱損傷研究［J］. 強激光與粒子束， 2023， 35（3）： 5-11.

LIU Zhibo， MA Qiong， ZHOU Xun， et al. Skin damage in mice induced by different power densities of 1 064 nm laser［J］. High Power Laser and Particle Beams， 2023， 35（3）： 5-11.

［17］ 史宏敏， 李濟時， 譚延康， 等. CO2激光對小白豬皮膚急性損傷閾值的研究［J］. 中國生物醫學工程學報， 1985， 4（1）： 47-50.

SHI Hongmin， LI Jishi， TAN Yankang， et al. The CO2 laser injury threshold levels for the skin of young pigs［J］. Chinese Journal of Biomedical Engineering， 1985， 4（1）： 47-50.

［18］ 陳跡， 施良順， 錢煥文， 等. 308 nm激光輻照豬皮膚損傷閾實驗［J］. 激光技術， 1989（6）： 30-33.

CHEN Ji， SHI Liangshun， QIAN Huanwen， et al. The pig skin injury threshold for the XeCl laser output at 308nm［J］. Laser Technology， 1989（6）： 30-33.

［19］ XU F， LU T. Introduction to skin biothermomechanics and thermal pain［M］. Harvard Medical School Harvard University， Cambridge， USA， 2011.

［20］ 徐琴， 徐新明， 張東輝， 等. 新疆長白豬皮膚組織結構與人皮膚組織結構的比較［J］. 實驗動物科學， 2011， 28（3）： 38-40.

XU Qin， XU Xinming， ZHANG Donghui， et al. Comparison of skin structure between Xinjiang Landrace pig and human ［J］. Laboratory Animal Science， 2011， 28（3）： 38-40.

［21］ SUMMERFIELD A， MEURENS F， RICKLIN M E. The immunology of the porcine skin and its value as a model for human skin ［J］. Molecular Immunology， 2015， 66（1）： 14-21.

［22］ 馬寶章， 夏偉亞， 卓瑞鵬， 等. 連續波Nd：YAG激光對人皮膚損傷閾值的研究［J］. 中國激光， 1985， 10： 582-585.

MA Baozhang， XIA Weiya， ZHUO Ruipeng， et al. Study of injury threshold of CW Nd：YAG laser light for human skin［J］. Chinese Journal of Lasers， 1985， 10： 582-585.