結(jié)膜松弛癥動(dòng)物模型的構(gòu)建和評(píng)估

干靜云，李青松，符之瑄，夷成龍，高翔，張斌，王亞卉

(上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬普陀醫(yī)院，上海 200062)

結(jié)膜松弛癥 (conjunctivochalasis,CCH)是過多的、松弛的、非水腫性的球結(jié)膜堆積在眼球與下瞼緣、內(nèi)、外眥部之間引起的疾病[1]。目前該病尚缺乏一個(gè)公認(rèn)的疾病動(dòng)物模型，該動(dòng)物模型的構(gòu)建對(duì)探索結(jié)膜松弛癥的發(fā)生發(fā)展規(guī)律、有效防治方法具有重要的科學(xué)意義和臨床意義。

在前期建模的初步試驗(yàn)中，本課題組嘗試了基質(zhì)金屬蛋白酶(metalloproteinase,MMP)-3球結(jié)膜下注射、腫瘤壞死因子-α(Tumour necrosis factor alpha,TNF-α)溶液點(diǎn)眼、D-半乳糖皮下注射三種方法[2]。結(jié)果示MMP-3球結(jié)膜下注射的動(dòng)物的下球結(jié)膜在外力作用下形成皺褶，并見疏松和排列紊亂的膠原纖維、碎片狀的彈力纖維、成纖維細(xì)胞的局灶性壞死。表明球結(jié)膜下注射MMPs可能是構(gòu)建CCH動(dòng)物模型的可行方法。

在此結(jié)果的基礎(chǔ)上，課題組通過球結(jié)膜下注射MMP-1、MMP-3的方法來構(gòu)建疾病動(dòng)物模型；通過眼前節(jié)照相和光學(xué)相干成像檢查、淚液蕨類試驗(yàn)、結(jié)膜組織光鏡檢查結(jié)果來評(píng)估造模效果。現(xiàn)將實(shí)驗(yàn)結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器

眼前節(jié)照相儀，產(chǎn)自芬蘭Smartscope M5 OPTOMED公司；Cirrus 4000 HD OCT光學(xué)相干斷層掃描儀，產(chǎn)自德國(guó)CARL ZEISS集團(tuán)。

1.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑

重組人MMP-1，購(gòu)自美國(guó)PerproTech公司；重組人MMP-3，購(gòu)自美國(guó)PerproTech公司；彈力纖維染色試劑盒，購(gòu)于北京索萊寶科技有限公司；鹽酸丙美卡因滴眼液，產(chǎn)自愛爾康(中國(guó))眼科產(chǎn)品有限公司；鹽酸左氧氟沙星滴眼液，產(chǎn)自山東博士倫福瑞達(dá)制藥有限公司。

1.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑的配置

10 μg重組人MMP-1(現(xiàn)配現(xiàn)用)+3.33 mL滅菌注射用水，配成濃度為3000 μg/L；……