氣相色譜法測定代用茶中三氯殺螨醇殘留量的不確定度評定

原 超

（長治市綜合檢驗檢測中心，山西長治 046000）

近年來，代用茶因具有增強免疫力、改善睡眠等功效而在市場上熱銷，深受消費者喜愛。代用茶產品通常由藥食同源或保健品類中的一種或多種物質組成，農藥殘留與重金屬含量超標是市場監管部門在代用茶產品抽檢監測中最常見的問題[1-2]。《代用茶》（GH/T 1091—2014）[3]中規定，三氯殺螨醇等11 種農藥殘留組分按《蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農藥多殘留的測定》（NY/T 761—2008）中的方法測定，當檢測結果臨近最大殘留限量時，為獲得準確可靠的檢測數據，檢驗人員需要科學合理地進行測量不確定度評定。本研究依據《測量不確定度評定與表示》（JJF 1059.1—2012）[4]中的方法，評定氣相色譜法測定代用茶中三氯殺螨醇殘留量的測量不確定度。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

某品牌代用茶，購自金威超市；100 μg·mL-1三氯殺螨醇溶液標準樣品，農業農村部環境保護科研監測所；乙腈，色譜純，德國默克公司；正己烷、丙酮，色譜純，美國賽默飛世爾公司。

1.2 儀器與設備

GC-2010 氣相色譜儀帶ECD 檢測器，日本島津公司；ME3002E 電子天平（精度0.01 g），瑞士梅特勒—托利多公司；HY-4A 數顯調速振蕩器，杰瑞爾電器公司；HSC-B 水浴氮吹儀，天津市恒奧科技公司；JL-SPE-12B 固相萃取裝置，上海靳瀾儀器公司；Mega BE-Fl 固相萃取柱（1 gm 6 mL），美國安捷倫公司。

1.3 試驗方法

參照《蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農藥多殘留的測定》（NY/T 761—2008）第2 部分方法二進行測定[5]。

1.3.1 試樣制備凈化

準確稱取5.0 g 經粉碎混勻的代用茶試樣，放入具塞三角瓶中，精確加入20.0 mL 超純水與50.0 mL乙腈，120 r·min-1的振蕩器中振蕩30 min，過濾，濾液收集于裝有約6 g氯化鈉的100 mL具塞比色管中，加塞劇烈振蕩1 min，靜置30 min。待分層后，準確吸取10.0 mL 上層乙腈溶液于50 mL 燒杯中，置于80 ℃水浴鍋中通氮氣蒸發至近干，加入2.0 mL 正己烷，蓋上鋁箔，待凈化。

將固相萃取柱依次用5.0 mL 丙酮+正己烷（1+9）、5.0 mL 正己烷預淋洗條件化，棄去淋洗液，當淋洗液流至吸附層時，迅速加入待凈化溶液，將洗脫液收集于15 mL 具塞刻度試管中，再用5.0 mL丙酮+正己烷（1+9）沖洗2 次燒杯，將洗滌液過柱并收集于上述試管中，置于50 ℃水浴氮吹儀中蒸發至小于5 mL，全部轉移至5 mL 容量瓶中，用正己烷定容，渦旋混勻，氣相色譜儀分析。

1.3.2 標準溶液配制

準確吸取0.5 mL 濃度為100 μg·mL-1的三氯殺螨醇溶液標準樣品于5 mL 容量瓶中，用正己烷稀釋定容至刻度，配制成10 μg·mL-1的三氯殺螨醇標準儲備液。再吸取0.5 mL 三氯殺螨醇標準儲備液于5 mL 容量瓶中，用正己烷稀釋定容至刻度，配制成1 μg·mL-1的三氯殺螨醇標準中間液。

分別吸取0.10 mL、0.25 mL、0.50 mL 三氯殺螨醇標準中間液，0.10 mL、0.25 mL、0.50 mL三氯殺螨醇標準儲備液于6 個10 mL 容量瓶中，用正己烷稀釋定容至刻度，配制成濃度為0.010 μg·mL-1、0.025 μg·mL-1、0.050 μg·mL-1、0.100 μg·mL-1、0.250 μg·mL-1和0.500 μg·mL-1的三氯殺螨醇標準系列溶液。

1.3.3 氣相色譜條件

色 譜 柱：DB-17 毛 細 管 柱（30 m×250 μm，0.25 μm）；載氣：高純N2；柱流速：1.0 mL·min-1；進樣口溫度：280 ℃；進樣方式：分流進樣，分流比10 ∶1；柱溫：初始溫度150 ℃，保持2 min，5 ℃·min-1升溫至280 ℃，保持20 min；檢測器ECD 溫度：300 ℃；尾吹氣N2流量：30 mL·min-1。保留時間定性，峰面積外標法定量。

2 結果與分析

2.1 不確定度分析

2.1.1 數學模型建立代用茶樣品中三氯殺螨醇殘留量的計算公式為

式中：X為代用茶樣品中三氯殺螨醇殘留量，mg·kg-1；m為稱取代用茶樣品質量，g；C為上機試液中三氯殺螨醇的質量濃度，μg·mL-1；V1為加入乙腈提取液體積，mL；V2為移取分層后乙腈層體積，mL；V3為試液最終定容體積，mL。

2.1.2 不確定度來源

試驗過程中測量不確定度的來源為樣品稱量過程、試液移取定容過程、標準溶液賦值、標準曲線擬合和測量重復性產生的分量。

2.2 測量不確定度分量評定

2.2.1 樣品稱量過程產生的不確定度分量urel(m)

使用ME3002E 電子天平稱取5.0 g 代用茶樣品，由檢定證書知，示值誤差為0.01 g，偏載誤差為0.03 g，重復性誤差為0.02 g，按正態分布考慮，則

2.2.2 試液移取定容產生的不確定度分量urel(V)

使用50 mL 單標線吸量管（A 級）移取50.0 mL乙腈提取液，使用10 mL 單標線吸量管（A 級）吸取10.0 mL 經分層后的乙腈層溶液，試液最終使用5 mL單標線容量瓶（A級）用正己烷定容至5.0 mL，根據《常用玻璃量器》（JJG 196—2006）獲得各自容量允差，20 ℃時，玻璃量器的不確定度分量按矩形分布，取。假設實驗溫差為±5 ℃，乙腈、正己烷的膨脹系數均為1.37×10-3mL·℃-1，溫差引入的不確定度按照均勻分布計算，結果見表1。試液移取定容過程產生的不確定度分量為。

表1 玻璃量器引入的相對不確定度

2.2.3 標準溶液賦值的不確定度分量urel(cb)

三氯殺螨醇溶液標準樣品編號GSB05—2311—2016，批202209，標準樣品證書中的擴展不確定度為U=kurel(cb)=0.001（k=2），。

2.2.4 標準曲線擬合過程產生的不確定度分量urel(q)將配制的三氯殺螨醇標準系列溶液重復測定3 次，數據統計見表2，用最小二乘法擬合線性回歸方程，三氯殺螨醇濃度在0.010 ～0.500 μg·mL-1時，線性方程為Y=201 847.1C+392.2，其中b=201 847.1，a=392.2。該過程產生的標準不確定度計算為

表2 標準系列溶液的測定數據

式中：n為標準系列溶液測試次數，n=18；P為代用茶樣品測試次數，P=6；代用茶樣品測試的平均值為0.542 mg·kg-1，代入2.1.1 數學模型，計算得C=0.108 4 μg·mL-1，標準系列溶液各濃度點的平均值，相對標準不確定度為

2.2.5 測量重復性產生的不確定度分量urel(s)

將某品牌代用茶樣品在期間精密度條件下測試6 次，結 果 分 別 為0.532 mg·kg-1、0.545 mg·kg-1、0.529 mg·kg-1、0.548 mg·kg-1、0.536 mg·kg-1和0.562 mg·kg-1，平均值X—為0.542 mg·kg-1，標準偏差s為0.022 60，則標準不確定度為

2.3 合成與擴展不確定度評定

2.3.1 合成不確定度

5 個不確定度分量各不相關，按照公式計算相對合成不確定度為

標準合成不確定度為

u=0.542×0.080 8=0.014 7 mg·kg-1

2.3.2 擴展不確定度

取包含因子k=2，置信概率95%，代用茶樣品中三氯殺螨醇殘留量的測量擴展不確定度為U=ku=0.029 mg·kg-1。

2.4 測量不確定度結果

氣相色譜法測定代用茶中三氯殺螨醇殘留量為（0.542±0.029）mg·kg-1（k=2，P=95%）。

3 結論

分析評定氣相色譜法測定代用茶中三氯殺螨醇殘留量的不確定度，各不確定度分量對測量不確定度結果的相對貢獻大小依次為標準曲線擬合分量urel(q)、測量重復性分量urel(s)、試液移取定容分量urel(V)、樣品稱量分量urel(m)、標準溶液賦值分量urel(cb)，標準曲線擬合過程及人為操作因素對測量結果的影響較大，檢驗檢測機構應重視儀器設備的維護保養和實驗人員的操作水平培訓，降低測量不確定度，使檢測結果更為準確可靠。