復(fù)發(fā)性口腔潰瘍病人血清維生素D 水平與免疫功能的相關(guān)性

賈艷霞，劉寧?kù)o，耿曉麗，，王小琴

1.山西醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院，山西 030001；2.山西醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院

復(fù)發(fā)性口腔潰瘍（recurrent oral ulcer, ROU）又稱復(fù)發(fā)性阿弗他潰瘍（recurrent aphthous ulcer，RAU），是最常見(jiàn)的口腔黏膜疾病之一，主要表現(xiàn)為反復(fù)發(fā)作的口腔黏膜潰瘍，潰瘍多呈圓形或橢圓形，多見(jiàn)于唇、頰及舌的黏膜部位，有復(fù)發(fā)性、周期性和自限性的特點(diǎn)[1]。目前，發(fā)病原因及致病機(jī)制尚不明確[2]。近年來(lái)，在對(duì)ROU 病因的研究中，免疫因素、感染因素及維生素缺乏已成為國(guó)內(nèi)外學(xué)者關(guān)注的焦點(diǎn)。細(xì)胞因子是一類非常多樣化的分子，包括100 多種分泌因子，可分為白介素(IL)、腫瘤壞死因子(TNF)、干擾素(IFN)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGF)、集落刺激因子(CSF)和各種趨化因子(CXCL)[3]。Ujevi? 等[4]提 出 葉 酸 和 維 生 素B 缺 乏 是ROU 的誘因，目前關(guān)于維生素D 與ROU 之間的關(guān)系鮮有研究，本研究旨在探討ROU 病人維生素D 水平與免疫功能相關(guān)指標(biāo)的相關(guān)性，為探討ROU 發(fā)病機(jī)制提供參考依據(jù)。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

2022 年5 月—2022 年6 月于山西省某三級(jí)甲等醫(yī)院根據(jù)納入與排除標(biāo)準(zhǔn)招募122 例ROU 病人作為ROU 組，同期體檢120 名正常人作為對(duì)照組。納入標(biāo)準(zhǔn)：1）至少有2 次ROU 發(fā)病史，病史至少半年以上；2）反復(fù)發(fā)作，至少每隔1 個(gè)月發(fā)作1 次；3）病人潰瘍發(fā)生在唇、頰、舌等處，數(shù)目1～5 個(gè)，直徑不超過(guò)5 mm，局部疼痛、潰瘍充血、邊緣整齊、基部不硬、中心稍凹，其上覆以灰黃色或淺黃色假膜等臨床表現(xiàn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：白塞病、癌性潰瘍、創(chuàng)傷性潰瘍、結(jié)核性潰瘍、糜爛性扁平苔蘚、梅毒性潰瘍、病毒性口炎、壞死性涎腺化生者及其他疾病或藥物引起的潰瘍者等；合并有肝腎疾病、糖尿病、家族性高膽固醇血癥、甲狀腺和甲狀旁腺疾病以及惡性腫瘤病史；患有骨質(zhì)疏松癥或有骨質(zhì)疏松癥治療史、內(nèi)分泌疾病和絕經(jīng)后婦女的病人；自身免疫性疾病；妊娠試驗(yàn)陽(yáng)性、妊娠期或哺乳期婦女、計(jì)劃妊娠者；3 個(gè)月內(nèi)服用過(guò)皮質(zhì)類固醇、免疫抑制劑等已知對(duì)人體臟器有損害的藥物。本研究已經(jīng)我院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 檢測(cè)方法

1.2.1 血清25-羥維生素D[25-(OH)-D]水平檢測(cè)

25-(OH)-D 是血液循環(huán)中濃度最高的維生素D 衍生物，可以較準(zhǔn)確地體現(xiàn)體內(nèi)維生素D 水平的狀況，將血清25-(OH)-D 水平＜20 ng/mL 定義為維生素D 缺乏[5-8]。血清25-(OH)-D 采用串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)，試劑盒購(gòu)于江蘇豪思生物科技有限公司。所有研究對(duì)象均于清晨在空腹?fàn)顟B(tài)下抽取靜脈血5 mL，離心后留取血清，置于-80 ℃條件下保存待測(cè)。

1.2.2 細(xì)胞因子檢測(cè)

采用流式細(xì)胞計(jì)數(shù)儀，檢測(cè)Th1 型細(xì)胞因子水平[包括白細(xì)胞介素-2(IL-2)、γ-干擾素(IFN-γ)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)]，檢測(cè)試劑購(gòu)自江西賽基生物技術(shù)有限公司。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 25.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。符合正態(tài)分布的定量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）描述，兩組間比較采用t檢驗(yàn)；偏態(tài)資料的定量資料以中位數(shù)（四分位數(shù)）[M(P25，P75)]描述，兩組間比較采用秩和檢驗(yàn)；定性資料以例數(shù)及百分比（%）描述，進(jìn)行χ2檢驗(yàn)。ROU 組病人血清25-羥維生素D 水平與細(xì)胞因子水平的相關(guān)性采用Spearman 相關(guān)性分析。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05（雙側(cè)檢驗(yàn)）。

2 結(jié)果

2.1 一般資料

本研究納入ROU 病人122 例，其中男39 例，女83例；年齡（44.21±15.37）歲；對(duì)照組120 名，男42 名，女78 名；年齡（47.51±15.90）歲。兩組年齡、性別比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

2.2 兩組維生素D 水平及缺乏率比較

ROU 組血清25-(OH)-D 水平低于對(duì)照組，差異有 統(tǒng) 計(jì) 學(xué) 意 義(Z=-4.863，P＜0.001)。ROU 組 維生素D 缺乏率高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=13.450，P＜0.001)。見(jiàn)表1。

表1 兩組維生素D 水平及缺乏率比較

2.3 兩組血清細(xì)胞因子水平比較

ROU 組病人的血清IL-2 水平明顯低于對(duì)照組，IFN-γ 水平高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。ROU 組病人血清TNF-α水平略高于對(duì)照組，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。詳見(jiàn)表2。

表2 兩組受檢者的血清細(xì)胞因子比較[M(P25,P75)] 單位：pg/mL

2.4 ROU 病人血清25-(OH)-D 水平與細(xì)胞因子的相關(guān)性

相關(guān)性分析結(jié)果顯示，ROU 病人血清25-(OH)-D 水平與TNF-α、IL-2 相關(guān)性均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P＞0.05)，與IFN-γ 呈正相關(guān)(P＜0.05)。見(jiàn)表3。

表3 ROU 病人血清25-（OH）-D 水平與細(xì)胞因子水平的相關(guān)性

3 討論

ROU 為常見(jiàn)的口腔黏膜疾病，在反復(fù)發(fā)作過(guò)程中，口腔黏膜疼痛劇烈且難以忍受，嚴(yán)重影響病人的生活質(zhì)量[9]。有調(diào)查發(fā)現(xiàn)，普通人群中有10%～25%罹患此病，其發(fā)病率也高達(dá)20%，發(fā)病年齡多為20～45歲，50 歲以上極少發(fā)病，女性略多于男性[10]。

3.1 ROU 與細(xì)胞因子

近期多項(xiàng)研究表明，促炎性Th1 型細(xì)胞因子（IL-2，TNF-α，IFN-γ）的增多及抗炎性Th2 型細(xì)胞因子、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子的降低可能是ROU 的發(fā)病機(jī)制，這同樣也是自身免疫疾病發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)因素[11]。同時(shí)，Lewkowicz等[12]發(fā)現(xiàn)，病人血清中存在多種抗口腔黏膜上皮抗原的抗體，進(jìn)一步證明ROU 具有自身免疫疾病特征。有研究發(fā)現(xiàn)，ROU 病人IL-2 水平升高，認(rèn)為IL-2 作為致炎細(xì)胞因子分泌增加可加重炎癥反應(yīng)，從而加重潰瘍[13-15]；若降低血清IL-2 的表達(dá)水平，可以減輕機(jī)體細(xì)胞炎癥水平，有利于控制炎癥反應(yīng)，促進(jìn)潰瘍愈合[16-17]。另有研究顯示，ROU 病人IL-2 水平下降，認(rèn)為IL-2 下降導(dǎo)致T細(xì)胞和B細(xì)胞增殖、分化和活化的功能降低，因而IL-2 水平下降不利于機(jī)體免疫功能調(diào)控、組織修復(fù)及潰瘍愈合，進(jìn)而導(dǎo)致ROU 發(fā)生及病情加重[18-19]。TNF-α 具有廣泛的生物活性，具有抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、抗感染和促炎癥反應(yīng)的作用[20]。多項(xiàng)研究顯示，ROU 病人TNF-α 水平升高，TNF-α 參與ROU 的發(fā)病過(guò)程，并表現(xiàn)出促炎作用[13-14,16,18,21-22]。陳茜等[23]研究顯示，重型ROU 病人IFN-γ 表達(dá)水平明顯高于輕型組，且IFN-γ 表達(dá)水平與臨床類型、潰瘍面積、疼痛程度呈正相關(guān)，提示IFN-γ與病情嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，IFN-γ 表達(dá)水平升高，潰瘍面積增大，與本研究結(jié)果一致。

3.2 ROU 與維生素D

維生素D 在鈣磷穩(wěn)態(tài)和骨代謝中的作用已經(jīng)確定，越來(lái)越多的證據(jù)表明，維生素D 可以與多種免疫細(xì)胞（巨噬細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞和T 細(xì)胞）內(nèi)的維生素D 受體相結(jié)合從而影響免疫功能[24]。流行病學(xué)研究顯示，維生素D 缺乏是導(dǎo)致自身免疫性疾病發(fā)生的危險(xiǎn)因素[25]。Khabbazi 等[26]研 究 顯 示，ROU 病 人 的 血 清 維 生素D 水平低于健康個(gè)體。Lalla 等[27]的一項(xiàng)研究表明，與安慰劑相比，使用復(fù)合維生素治療可顯著減少RAU發(fā)作的次數(shù)。與本研究結(jié)果一致。

3.3 ROU、維生素D 與細(xì)胞因子的關(guān)系

維生素D 可以與免疫細(xì)胞內(nèi)的維生素D 受體相結(jié)合，進(jìn)而影響免疫細(xì)胞發(fā)揮免疫功能。多項(xiàng)研究表明，維生素D 參與機(jī)體免疫系統(tǒng)的調(diào)控，且ROU 具有一定的自身免疫疾病特征。Kurylowicz 等[28]認(rèn)為維生素D可以改變分泌型細(xì)胞因子的分布，包括減少Th1 型細(xì)胞因子的產(chǎn)生和增加Th2 型細(xì)胞因子的產(chǎn)生。有多項(xiàng)研究報(bào)道，維生素D 轉(zhuǎn)變?yōu)榛钚孕问胶竽芡ㄟ^(guò)抑制淋巴細(xì)胞的過(guò)度增殖參與機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)[29]。因此，考慮維生素D 缺乏可能作為一種誘發(fā)因素，通過(guò)誘發(fā)自身免疫系統(tǒng)改變從而導(dǎo)致病人罹患ROU。