DC-CIK細(xì)胞生物療法結(jié)合同步放化療在中晚期肺小細(xì)胞癌中的臨床應(yīng)用

鐘新云 龍 瀛

萬載縣人民醫(yī)院內(nèi)三科 (江西 宜春 336100)

非小細(xì)胞癌(NSCLC)是肺癌患者主要類型(約占80%)，發(fā)病早期無特異性表現(xiàn)，使其早期確診率處于較低現(xiàn)狀，甚至多數(shù)患者在疾病確診后，經(jīng)病理檢查后發(fā)現(xiàn)疾病處于中晚期，錯(cuò)過最佳治療時(shí)機(jī)，且無論是采用手術(shù)，還是放化療治療，其效果均不理想[1-2]。基于手術(shù)、靶向治療局限性明顯，多數(shù)患者只能從放化療中獲得疾病控制，延長治療時(shí)間。自腫瘤免疫治療出現(xiàn)并應(yīng)用于臨床后，使其成為治療惡性腫瘤的主要方法。其中樹突狀細(xì)胞DC、細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(CIK)是臨床重點(diǎn)研究的免疫細(xì)胞，且DC-CIK細(xì)胞臨床應(yīng)用最為廣泛，于體內(nèi)分離有效的T淋巴細(xì)胞，并在注入白介素(IL)-2、干擾素(IFN)-?等因子，增加細(xì)胞數(shù)量，并注入抗CD3單抗，進(jìn)而提高T淋巴細(xì)胞識別能力，準(zhǔn)確清除腫瘤細(xì)胞，促使腫瘤細(xì)胞凋亡[3]。因此，本研究對中晚期NSCLC患者采用DC-CIK細(xì)胞生物療法結(jié)合同步放化療治療，旨為臨床晚期肺癌免疫治療提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 臨床資料選取我院2020年1月至2022年6月期間收治且被病理診斷為NSCLC患者80例，按隨機(jī)數(shù)字表法分為兩組，對照組40例，男23例，女17例；年齡40～75(59.82±4.15)歲；病理類型：鱗癌21例，腺癌15例，其他4例；臨床分期：ⅢA期22例，ⅢB期12例，Ⅳ期6例；觀察組40例，男21例，女19例；年齡40～76(60.12±4.21)歲；病理類型：鱗癌20例，腺癌12例，其他8例；臨床分期：ⅢA期20例，ⅢB期12例，Ⅳ期8例；兩組患者基線資料比較(P＞0.05)，可對比。

納入標(biāo)準(zhǔn)：入組患者經(jīng)影像學(xué)、病理等綜合檢查，符合NSCLC診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]；預(yù)估患者生存時(shí)間＞3個(gè)月；患者經(jīng)血尿常規(guī)、肝腎、凝血等功能檢查，無異常情況；存在影像學(xué)可以測量的病灶；患者對研究知情，并簽署了同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：對生物免疫抑制劑過敏者；伴心腦血管疾病、代謝系統(tǒng)疾病、內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病者；胸腔大量積液者；伴肺部感染、肺結(jié)核等其他肺部疾病者；伴中樞神經(jīng)系統(tǒng)廣泛性轉(zhuǎn)移者；臨床資料不全者。

1.2 方法對照組：采用放化療治療，放療：瑞士醫(yī)科達(dá)公司產(chǎn)的PRECISE型直線加速器6mV-X線三維適形照射治療，每天照射劑量為2Gy，每周5次，總共照射劑量為50～60Gy。同時(shí)在放療當(dāng)天給予DP化療治療，多西他賽(江蘇恒瑞醫(yī)藥，國藥準(zhǔn)字H20020543)75mg/m2，靜脈滴注，d1；順鉑(南京制藥廠，國藥準(zhǔn)字H20030675)75mg/m2，靜脈滴注，d1～4；4周為1個(gè)周期，與放療先同步2個(gè)周期，在放療結(jié)束并間隔4周后，再進(jìn)行鞏固化療，連續(xù)4個(gè)周期。

觀察組：在對照組基礎(chǔ)上采用DC-CIK細(xì)胞生物療法，先采集外周血細(xì)胞、分離血細(xì)胞，獲取單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)，對其進(jìn)行分離培養(yǎng)，于貼壁PBMC添加人重組GM-CSF800 U/mL、IL-4 500 U/mL、腫瘤壞死因子(TNF)-α等含有自體血清培養(yǎng)基，連續(xù)培養(yǎng)1周，得到DC；于未貼壁PBMC加入IFN-? 1000 U/mL、IL-2 300U/mL、IL-1β100 U/mL、anti-CD3mAb50 ng/mL與含有自體血清的培養(yǎng)基內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)，獲取CIK細(xì)胞。取部分細(xì)胞進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)、真菌培養(yǎng)，待診斷結(jié)果為陰性，采集誘導(dǎo)擴(kuò)增后的DC-CIK，用生理鹽水對細(xì)胞進(jìn)行連續(xù)洗滌3次，并配制為100mL液體，并在60min將其靜脈回輸給患者，每天1次，每次回輸細(xì)胞數(shù)量為2.5×109/L，每間隔2d輸注1次，連續(xù)5次為1個(gè)療程，每次化療前2周進(jìn)行免疫治療，共4個(gè)療程。

1.3 觀察指標(biāo)(1)免疫功能：在治療前后采集患者外周血4mL，抗凝，梯度離心后獲得PBMC，分別添加相應(yīng)抗體，混合均勻，孵育15min，連續(xù)洗滌2次，采用上海然哲儀器設(shè)備有限公司產(chǎn)的NovoCyte型流式細(xì)胞儀檢測T淋巴細(xì)胞亞群，包括CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、NK細(xì)胞；(2)近期效果：參照實(shí)體瘤評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)[5]，于治療4周后評價(jià)，完全緩解(CR)：影像學(xué)檢查中，最大的腫瘤體積已經(jīng)消失，未出現(xiàn)新的病灶，并維持4周時(shí)間以上；部分緩解(PR)：可測量的病灶長徑之和降低30%以上，并維持4周時(shí)間以上；疾病穩(wěn)定(SD)：可測量的病灶長徑之和降低并不足30%，或增加幅度不足20%；進(jìn)展(PD)：可測量的腫瘤體積較之前增加，或經(jīng)影像學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)出現(xiàn)新的腫瘤病灶；疾病控制率=CR率+PR率；(3)觀察兩組患者治療期間的不良反應(yīng)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法SPSS 26.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件。計(jì)量資料符合正態(tài)分布經(jīng)(±s)表示，采取t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以百分比率(%)表示，采取χ2檢驗(yàn)；P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 兩組近期效果比較觀察組近期效果高于對照組(P＜0.05)，見表1。

表1 兩組近期效果比較[n(%)]

2.2 兩組免疫指標(biāo)比較兩組治療前免疫指標(biāo)水平比較(P＞0.05)，觀察組治療后CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、NK細(xì)胞水平高于治療前，CD8+細(xì)胞低于治療前(P＜0.05)，而對照組治療后CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、NK細(xì)胞水平降低，CD8+細(xì)胞增加(P＜0.05)，且觀察組變化幅度較對照組明顯(P＜0.05)，見表2。

表2 兩組免疫指標(biāo)比較(%)

2.3 兩組不良反應(yīng)比較觀察組惡心嘔吐、肝腎功能損傷、放射性肺炎、血小板減少發(fā)生率低于對照組(P＜0.05)，其他指標(biāo)比較(P＞0.05)，見表3。

表3 兩組不良反應(yīng)比較[n(%)]

3 討 論

同步放化療是治療中晚期NSCLC患者的主要方法，能夠直接殺傷腫瘤細(xì)胞，抑制腫瘤細(xì)胞復(fù)制、合成，促使腫瘤細(xì)胞凋亡[6]。但放化療并不能完全徹底殺滅細(xì)胞，而且腫瘤患者自身免疫功能減退，在放化療后會(huì)致自身免疫功能降低。本研究發(fā)現(xiàn)，對照組治療后CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、NK細(xì)胞水平降低，CD8+細(xì)胞增加(P＜0.05)。說明同步放化療時(shí)，會(huì)時(shí)NSCLC患者免疫功能下降。故而免疫療法成為臨床研究重點(diǎn)。

DC-CIK細(xì)胞生物療法治療時(shí)，DC細(xì)胞作為體內(nèi)主要的抗原提呈細(xì)胞，通過對體內(nèi)腫瘤抗原進(jìn)行攝取、加工處理，并將腫瘤抗原信息傳遞至免疫細(xì)胞，進(jìn)而誘導(dǎo)體內(nèi)效應(yīng)T細(xì)胞、細(xì)胞因子等免疫因子的釋放，從而起到顯著的抗癌作用[7]。CIK細(xì)胞屬于免疫活性細(xì)胞，其內(nèi)具備CD3+CD56+細(xì)胞，可抑制腫瘤細(xì)胞活性，促進(jìn)細(xì)胞凋亡的作用[8]。通常臨床常采用T細(xì)胞亞群檢測機(jī)體細(xì)胞免疫功能，一般腫瘤患者存在CD3+、CD4+細(xì)胞減少，CD8+細(xì)胞增加情況，使其處于免疫抑制狀態(tài)，進(jìn)而降低體內(nèi)免疫功能對腫瘤細(xì)胞的識別及殺傷能力，以此促使腫瘤細(xì)胞生長或增殖[9]。本組研究，觀察組治療后CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、NK細(xì)胞水平高于對照組，CD8+細(xì)胞低于對照組(P＜0.05)。說明DC-CIK細(xì)胞生物療法結(jié)合同步放化療可提高中晚期NSCLC患者免疫功能，其結(jié)果論證了上述理論。

在臨床效果方面，觀察組近期控制率82.50%高于對照組的57.50%，惡心嘔吐、肝腎功能損傷、放射性肺炎、血小板減少發(fā)生率低于對照組(P＜0.05)。其結(jié)果與其他學(xué)者研究相一致，孫明華[10]研究顯示聯(lián)合明DC-CIK細(xì)胞生物療法治療后客觀緩解率70.59%高于對照組的44.12%(P＜0.05)，陸婉玲等[11]研究表明聯(lián)合免疫療法后患者粒細(xì)胞減少法率明顯降低。推測原因是同步放化療殺滅腫瘤細(xì)胞，促使細(xì)胞凋亡的同時(shí)；采用免疫療法可進(jìn)一步增加抗腫瘤活性，分泌諸多細(xì)胞因子凋亡腫瘤細(xì)胞；同時(shí)免疫療法抗腫瘤譜廣，適應(yīng)性廣，能夠清除微小腫瘤病灶或轉(zhuǎn)移腫瘤細(xì)胞，故而能提高腫瘤治療細(xì)胞；另外免疫治療可增加效應(yīng)細(xì)胞數(shù)量，激活體內(nèi)免疫系統(tǒng)，刺激機(jī)體產(chǎn)生獲得性免疫，以此能加強(qiáng)機(jī)體對抗腫瘤細(xì)胞的免疫功能，減少相關(guān)并發(fā)癥的發(fā)生，提高患者治療安全性[12]。

綜上所述，DC-CIK細(xì)胞生物療法結(jié)合同步放化療可提高中晚期非小細(xì)胞癌患者近期效果，免疫水平明顯提高，降低免疫抑制狀態(tài)，并能減少治療不良反應(yīng)的發(fā)生，應(yīng)用價(jià)值高，值得臨床應(yīng)用。