BRAF V600E基因檢測在甲狀腺乳頭狀癌患者中的診斷價值

張苗 曹培龍 左偉晨 譚星 龍兆博△

(1.西北大學附屬醫院·西安市第三醫院全科醫學科,陜西 西安 710018;2.西安交通大學第一附屬醫院病理科,陜西 西安 710061)

甲狀腺是人體重要內分泌腺之一,其主要功能為合成、貯存以及分泌甲狀腺素。甲狀腺的功能同人體各器官系統的活動以及外部環境存在相互聯系,會對多個器官的正常生長、發育以及代謝功能產生影響[1-2],甲狀腺能夠控制機體使用能量速度、制造蛋白質、調節機體對其他激素的敏感性,在維持機體正常代謝中具有較重要的作用,甲狀腺癌是內分泌系統中最常見的惡性腫瘤,也是頭頸部癌癥中最為常見的癌癥,發病率約為全身癌癥中的1%～5%,女性發病率約為男性的3倍。甲狀腺乳頭狀癌是甲狀腺癌中最為常見的病理類型,約占全部甲狀腺癌的80%左右,且其淋巴結轉移率較高,因甲狀腺乳頭狀癌早期臨床癥狀特異性較低,故而診斷難度相對較高,隨著近些年精準醫學理念的不斷推廣,各種新型鑒別手段不斷被應用于甲狀腺乳頭狀癌的診斷中,BRAF V600E是甲狀腺癌較為常見的基因突變類型[3-5]。本文通過探究絲/蘇氨酸特異性激酶突變基因V600E(BRAF V600E)基因檢測在甲狀腺乳頭狀癌患者中的應用價值,希望為臨床診斷甲狀腺乳頭狀癌提供參考依據。報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇于我院和西安交通大學第一附屬醫院接受治療的94例疑似甲狀腺乳頭狀癌患者為研究對象,其中男55例,女39例,年齡38～58歲,平均年齡(42.85±2.65)歲。納入標準:(1)均經過明確檢查;(2)意識清晰能夠配合進行調研;(3)經初步臨床鑒別疑似甲狀腺乳頭狀癌;(4)經醫院倫理學會批準實施;(5)患者均知情同意并簽署知情同意書。排除標準:(1)合并精神疾病者、意識障礙性疾病者;(2)合并其他惡性腫瘤者;(3)對增強超聲檢查藥劑過敏者;(4)頸部接受消融術或外科手術者;(5)接受放化療患者,不依從、不配合及拒絕參加研究者。

1.2方法 分別對患者實施FNAC以及BRAF突變檢測,其中FNAC檢測依托彩色多普勒超聲診斷儀展開,設置頻率為5～12MHz,患者取仰臥位,充分暴露甲狀腺后,使用常規超聲對結節位置形態進行確定,確定穿刺結節后,實施局部皮下浸潤麻醉,超聲引導下進行穿刺,將提取的內容物使用玻片固定后進行檢測。BRAF突變檢測參照人類BRAF基因V600E突變檢測試劑盒說明書進行,將穿刺提取的沖洗液使用DNA試劑盒提取,而后使用實時熒光定量PCR法擴增得到突變信號。觀察指標及評測標準:FNAC鑒別標準為甲狀腺細胞病理學Bethesda診斷標準[7],BRAF V600E突變標準為樣本外控FAM信號Ct≥28為未突變,<28為出現突變。靈敏度=真陽性/總例數×100%,特異性=真陰性/總例數×100%,陽性預測值=真陽性/檢查陽性×100%,陰性預測值=真陰性/檢查陰性×100%。聯合診斷結果判斷:并聯聯合只要其中一種方法陽性即判斷為陽性,二者陰性判斷為陰性;串聯聯合二者為陽性判斷為陽性,其中一種陰性即判斷為陰性。

2 結 果

2.1FNAC對甲狀腺乳頭狀癌的鑒別價值分析 以病理學檢測結果為金標準,計算顯示FNAC對甲狀腺乳頭狀癌診斷一致性為85.11%,靈敏度為86.67%,特異度為82.35%,陽性預測值為89.66%,陰性預測值為77.78%。見表1。

表1 FNAC對甲狀腺乳頭狀癌的鑒別價值分析

2.2BRAF V600E基因檢測對甲狀腺乳頭狀癌的鑒別價值分析 以病理學檢測結果為金標準,計算顯示BRAF V600E基因檢測對甲狀腺乳頭狀癌的診斷一致性為92.55%,靈敏度為93.33%,特異度為91.18%,陽性預測值為94.92%,陰性預測值為91.18%。見表2。

表2 FNAC對甲狀腺乳頭狀癌的鑒別價值分析

2.3并聯聯合診斷對甲狀腺乳頭狀癌的鑒別診斷價值分析 將FNAC和BRAF V600E基因檢測并聯聯合起來,計算聯合診斷對甲狀腺乳頭狀癌的鑒別價值,結果顯示,聯合鑒別的診斷一致性為97.87%,靈敏度為98.33%,特異度為97.06%,陽性預測值為98.33%,陰性預測值為97.06%。并聯聯合診斷較單一診斷檢測價值有明顯提高,差異有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 聯合檢測對甲狀腺乳頭狀癌的鑒別價值分析

2.4串聯聯合診斷對甲狀腺乳頭狀癌的鑒別診斷價值分析 將FNAC和BRAF V600E基因檢測串聯聯合起來,計算聯合診斷對甲狀腺乳頭狀癌的鑒別價值,結果顯示,聯合鑒別的診斷一致性為78.72%,靈敏度為66.67%,特異度為100.0%,陽性預測值為100.0%,陰性預測值為62.96%,串聯聯合診斷較單一診斷、并聯聯合檢測特異度明顯提高,差異有統計學意義(P<0.05)。見表4。

表4 串聯聯合診斷對甲狀腺乳頭狀癌的鑒別診斷價值分析

3 討 論

甲狀腺癌屬于頭頸部常見惡性腫瘤之一,約占頭頸部惡性腫瘤的5%,其主要包括乳頭狀癌、濾泡狀癌、未分化癌及髓樣癌,其中最常見的是乳頭狀癌,約占總發病人數的70%。甲狀腺癌好發于中青年及老年人,且女性發病率高于男性,老年人發病率高于中青年。甲狀腺乳頭狀癌惡性程度較低,早期臨床癥狀不明顯,多表現為甲狀腺區域無痛性腫塊,質地軟硬不一,部分患者會因瘤體侵犯喉返神經而出現聲音嘶啞[8]。對甲狀腺乳頭狀癌的早期鑒別有助于改善患者預后,提高患者臨床治療效果,近些年隨著生物技術的不斷發展,基因檢測在甲狀腺乳頭狀癌鑒別診斷中的價值逐漸被發掘出來。

本文通過設立對照分組的方式,就BRAF V600E基因檢測在甲狀腺乳頭狀癌中的鑒別診斷價值進行了分析,結果顯示,以病理學結果為金標準,超聲引導FNAC對甲狀腺乳頭狀癌的診斷一致性為85.11%,靈敏度為86.67%,特異度為82.35%,陽性預測值為89.66%,陰性預測值為77.78%,BRAF V600E對甲狀腺乳頭狀癌的診斷一致性為92.55%,靈敏度為93.33%,特異度為91.18%,陽性預測值為94.92%,陰性預測值為91.18%,經過二者聯合檢測顯示并聯聯合檢測顯示診斷對甲狀腺乳頭狀癌的鑒別診斷一致性為97.87%,靈敏度為98.33%,特異度為97.06%,陽性預測值為98.33%,陰性預測值為97.06%。并聯聯合診斷較單一診斷檢測價值有明顯提高,串聯檢測顯示診斷一致性為78.72%,靈敏度為66.67%,特異度為100.0%,陽性預測值為100.0%,陰性預測值為62.96%,串聯聯合診斷較單一診斷、并聯聯合檢測特異度明顯提高,根據診斷的目的采用串聯或者并聯,比如需要盡早發現疾病,需要提高診斷靈敏度,并且盡早給予有效診斷治療,如果需要排除非患者需要進行串聯檢測,提高診斷特異度。雖然基因檢測相較超聲引導FNAC檢測診斷價值更優,但其差異并不具有統計學意義,而將二者與聯合檢測相比可以發現,聯合檢測的診斷一致性、靈敏度、特異度、陽性預測值和陰性預測值均明顯高于任意單獨檢測。本文作者分析認為,超聲引導FNAC檢測雖然目前也是甲狀腺結節性質鑒別的重要輔診手段,但由于細胞病理學診斷的局限性,其仍有約10%～40%的患者難以鑒別出來,基因檢測相較FNAC具有更高的靈敏度和特異度,因BRAF V600E突變會導致蛋白激酶信號通路持續活化,從而誘發細胞的異常增殖與分化,從而促進腫瘤的發生與發展[9-10]。然而雖然BRAF V600E突變會增加甲狀腺乳頭狀癌的發生率,但甲狀腺乳頭狀癌的誘發因素并非單純BRAF V600E突變,因而診斷價值也存在一定不足。聯合檢測可以兼具FNAC與BRAF V600E突變檢測的優點,因而其診斷價值相對更高。

綜上所述,BRAF V600E基因檢測對甲狀腺乳頭狀癌具有一定的鑒別價值,但聯合FNAC檢測能夠明顯提高診斷的準確性。