外周血T淋巴細胞亞群及免疫球蛋白檢測在MPP患兒病情評估中的臨床價值探究

王愛萍

山東大學第二醫院招遠分院檢驗科，山東招遠 265400

由于小兒自身免疫系統及肺功能發育不完全，容易受到外界病原微生物感染，由肺炎支原體感染引發的肺炎支原體肺炎（mycoplasma pneumoniae pneumonia, MPP）是兒科中常見且多發的疾病，近年來發病率逐漸升高[1-2]。長期以來，科學家們還未完全了解肺炎支原體肺炎發病的詳細機制，但已知其主要與感染、炎癥反應和免疫損傷有關[3-4]。本研究選取2020年5月—2022年5月山東大學第二醫院招遠分院收治的104例MPP患兒為研究對象，擬探討外周血T淋巴細胞亞群、免疫球蛋白與MPP患兒病情的關系，為后期小兒肺炎支原體肺炎病情評估及診斷提供參考。現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院收治的104例MPP患兒作為研究對象。依據病程進展分為急性期組（54例）和恢復期組（50例）。急性期組男28例，女26例；年齡2~10歲，平均（6.00±1.14）歲。恢復期組男26例，女24例；年齡1~11歲，平均（5.82±1.26）歲。另選取同期健康體檢兒童45例作為對照組，男25例，女20例；年齡2~11歲，平均（5.91±1.20）歲。3組上述基線資料比較，差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。本研究經患者或家屬知情同意，且已獲得醫院醫學倫委會批準。

1.2 診斷標準

急性期組表現癥狀為發病3 d內，伴隨咳嗽、發熱等；恢復期組表現癥狀為經治療14 d后，原有的呼吸道癥狀逐漸減輕或消失，肺部體征好轉，患兒的食欲、睡眠和精神狀態逐漸好轉，整體體力狀態開始恢復。

1.3 納入與排除標準

納入標準：①符合MPP的相關診斷者[5]；②痰液培養顯示未出現細菌感染者；③家屬配合度較高。排除標準：①先天性免疫缺陷疾病者；②短期內接受過去敏治療者；③既往使用過免疫抑制劑者。

1.4 方法

1.4.1 T淋巴細胞亞群 3組兒童均抽取空腹靜脈血2 mL，血樣加入抗凝劑后送檢，采用Beckman FC500 MPL流式細胞儀，對CD3＋、CD4＋、CD8＋以及CD4＋/CD8＋、NK細胞以及B細胞的表達水平進行檢測。

1.4.2 免疫球蛋白 3組均抽取空腹靜脈血2 mL抗凝處理后以1 800 r/min的速度進行離心，采用免疫比濁法測定IgM、IgG以及IgA的濃度。

1.5 統計方法

采用SPSS 25.0統計學軟件分析數據，符合正態分布的計量資料以（±s）表示，采用t檢驗。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 3組患兒T淋巴細胞亞群比較

急性期組患兒的CD3＋、CD4＋、CD4＋/CD8＋較恢復期組和對照組均下降顯著，而NK細胞升高明顯，差異有統計學意義（P<0.05）。3組的CD8＋和B細胞比較，差異無統計學意義（P>0.05）。見表1。

表1 3組患兒T淋巴細胞亞群各指標水平比較(±s)

表1 3組患兒T淋巴細胞亞群各指標水平比較(±s)

組別急性期組（n=54）恢復期組（n=50）對照組（n=45）t急性期組與恢復期組值P急性期組與恢復期組值t急性期組與對照組值P急性期組與對照組值t恢復期組與對照組值P恢復期組與對照組值CD3＋（%）63.15±8.45 71.62±7.59 72.35±6.60 5.362<0.001 5.945<0.001 0.498 0.620 CD4＋（%）34.33±6.55 39.51±4.58 40.25±5.88 4.639<0.001 4.689<0.001 0.688 0.493 CD8＋（%）25.47±3.69 24.83±4.66 24.25±5.14 0.779 0.438 1.373 0.173 0.577 0.565 CD4＋/CD8＋1.32±0.22 1.68±0.33 1.79±0.25 6.591<0.001 9.947<0.001 1.815 0.073 NK細胞（%）22.55±5.66 15.75±4.30 16.69±3.52 6.857<0.001 6.037<0.001 1.158 0.250 B細胞（%）11.88±2.09 12.09±1.95 11.36±1.66 0.640 0.524 1.351 0.180 1.954 0.054

2.2 3組患兒免疫球蛋白水平對比

急性期組IgM水平最高，差異有統計學意義（P<0.05）；恢復期組與對照組IgM水平比較，差異無統計學意義（P>0.05）。恢復期組IgG水平最高，差異有統計學意義（P<0.05）；急性期組與對照組IgG水平比較，差異無統計學意義（P>0.05）。對照組IgA水平最高，差異有統計學意義（P<0.05）；急性期組和恢復期組IgA水平比較，差異無統計學意義（P>0.05）。見表2。

表2 3組患兒免疫球蛋白水平對比[(±s)，g/L]

表2 3組患兒免疫球蛋白水平對比[(±s)，g/L]

組別急性期組（n=54）恢復期組（n=50）對照組（n=45）t急性期組與恢復期組值P急性期組與恢復期組值t急性期組與對照組值P急性期組與對照組值t恢復期組與對照組值P恢復期組與對照組值IgM 2.31±0.51 1.49±0.40 1.43±0.58 9.074<0.001 8.031<0.001 0.592 0.555 IgG 8.55±1.47 9.72±1.04 8.82±1.45 4.652<0.001 0.916 0.362 3.502 0.001 IgA 1.78±0.44 1.60±0.57 2.62±0.33 1.810 0.073 10.564<0.001 10.519<0.001

3 討論

研究表明，肺炎支原體（mypoplasma pneumonia,MP）容易引起上呼吸道感染，其中10%為肺炎[6]。除可引發肺炎外，小兒感染MP感染后還可能會出現多種并發癥，常見的包括：中耳炎、哮喘、肺不張、胸腔積液、化膿性淋巴結炎等。此外，在未及時治療的情況下，還可造成心肌炎、肝炎、貧血等嚴重并發癥。感染患兒體內的MP利用其粘附因子附著在宿主細胞上，接著通過釋放毒性物質來對宿主細胞造成損害，進而改變它們的抗原結構。這種損傷和改變會誘導B細胞產生抗體，并誘發機體出現病理免疫反應[7]。有學者指出MP通過吸道黏膜表面的上皮細胞侵入到內部，經過一系列過程后能釋放核酸酶和過氧化氫等分解酶，核酸酶可以分解DNA和RNA等核酸體分子，從而破壞細胞核的結構和功能；過氧化氫則可引起氧化應激反應，導致氧自由基等活性物質的生成，損傷細胞膜、線粒體等結構，促進炎癥反應和細胞凋亡的發生[8-10]。

在機體正常免疫應答中，各淋巴群（尤其是T細胞）既相互制約又協作配合以保證形成適度的免疫應答，清除機體內抗原性異物，共同完成免疫功能[11-12]。CD4＋細胞與CD8＋細胞都是重要的T細胞亞群，CD4＋細胞主要作用是輔助其他免疫細胞，如增強吞噬細胞的抗感染和B細胞的免疫應答作用；CD8＋細胞的主要功能是直接抑制或殺傷靶細胞，例如病毒感染的細胞、癌細胞等，它們通過釋放細胞毒素快速消滅被感染的細胞，并防止病原體擴散到身體的其他部位[13-14]。在本研究中，急性期組患兒的CD3＋（63.15±8.45）%、CD4＋（34.33±6.55）%、CD4＋/CD8＋（1.32±0.22）較恢復期組和對照組均下降顯著，其NK細胞（22.55±5.66）%升高明顯（P<0.05），在沈陽等[15]的研究中，急性期患兒CD3＋（62.14±2.11）%、CD4＋（31.45±2.55）%、CD4＋/CD8＋（1.12±0.25）、NK細胞（28.23±2.44）%，與本研究組結果基本一致，表明MPP患兒進入急性期階段時，免疫功能出現紊亂，導致機體有效防御能力下降、免疫細胞被消耗、抵抗力削弱，并可能引起各種急性期特有的臨床表現。同時，NK細胞過度活化也會導致機體損傷。當臨床采取相關治療手段后，肺炎支原體的病原體數量逐漸減少，機體免疫細胞恢復至正常水平，使得疾病進入恢復期。恢復期內，患兒的免疫細胞水平與正常兒童持平。IgA、IgG、IgM等免疫球蛋白是由B淋巴細胞合成、分泌，每種類型都有不同的免疫應答效能和分布位置[16]。由于小兒免疫力低下，MP容易通過呼吸道黏膜表面的上皮細胞進入到內部，經過大量繁殖并擴散到周圍組織，導致機體局部免疫作出相應的炎癥反應，如出現發燒、咳嗽、胸痛等癥狀。另外，MP還能釋放蛋白質毒素來破壞宿主細胞，誘導免疫細胞釋放更多的炎癥介質，從而導致炎癥反應的加劇[15]。而在機體感染MP后，病原會刺激B細胞的有絲分裂增加，促使B細胞產生針對MP的IgG、IgM及IgA抗體，一方面，部分人體組織可能與MP的抗原成分相似，另一方面，MP引起宿主細胞膜的抗原發生改變，這也是導致機體發生自身免疫損傷的主要原因之一[17-18]。在本次臨床研究中，急性期組的IgM水平（2.31±0.51）g/L最高，恢復期組的IgG水平（9.72±1.04）g/L最高，在張丹丹等[19]的研究中，重癥組的IgM水平1.25（1.00，1.68）g/L，輕癥組的IgG水平7.77（5.90，8.84）g/L，以上指標均高于對照組（P<0.05），與本研究結果一致，說明患兒感染MP時，病原體會刺激B細胞產生特異性IgG、IgM。在免疫應答初期，血清中出現的抗體為IgM，是急性期升高明顯的一種，而IgG則需要2周后才開始上升[20-21]。當IgA水平升高時，則可能表明機體在急性期內B細胞過度被激活，從而導致了免疫功能亢進和免疫應答過度，加重了對機體的傷害并導致病情惡化。

綜上所述，MPP患兒隨著病情的進展變化，機體免疫狀態會出現改變，加強對MPP患兒外周血T淋巴細胞亞群、免疫球蛋白的監測，有利于臨床醫師評估患兒病情，把握疾病進展。