超聲引導下FNA聯合HBME-1、IMP-3診斷甲狀腺結節的臨床價值

魯小飛,何 暐,王福建

(杭州市第九人民醫院 超聲科,浙江 杭州 311225)

甲狀腺結節是甲狀腺局部異常增生引起的內分泌疾病,近年來發病率呈上升趨勢[1]。超聲引導下細針穿刺活檢(fine needle aspiration,FNA)是早期臨床鑒別診斷甲狀腺良惡性的重要手段,超聲引導下FNA聯合分子標志物已逐漸成為臨床甲狀腺結節診斷的研究熱點。間皮細胞角蛋白-1(HBME-1)通常表達于機體間皮細胞微絨毛表面,HBME-1對臨床甲狀腺結節病變性質具有較高的診斷價值[2]。胰島素樣生長因子Ⅱ mRNA結合蛋白3(IMP-3)屬于新型mRNA結合蛋白,可影響胰島素樣生長因子Ⅱ轉錄過程,從而調控胚胎增殖過程,與多種惡性病變的發生密切相關[3]?；诖?本研究探討超聲引導下FNA聯合HBME-1、IMP-3在甲狀腺結節臨床診斷中的應用價值,現報告如下。

1 資料與方法

1.1 資料選取 收集杭州市第九人民醫院2019年3月—2021年8月就診的146例甲狀腺結節患者臨床資料,所有患者行超聲引導下FNA。納入標準:①符合甲狀腺結節診斷標準[4];②符合超聲引導下FNA指征;③單側單發;④穿刺標本完整,可進行HBME-1、IMP-3檢測;⑤術前未接受其他相關治療;⑥臨床資料完整。排除標準:①有甲狀腺手術史、甲狀腺激素治療史者;②精神及認知功能嚴重障礙者;③妊娠、哺乳期婦女;④合并其他部位惡性腫瘤者;⑤腎、心等重要臟器嚴重損傷者。研究對象中男38例,女108例;年齡23～72歲,平均(45.84±6.70)歲;病程3～22個月,平均(10.16±2.73)個月;結節最大直徑5～46 mm,平均(13.84±3.98)mm。本研究經醫院倫理委員會批準,患者簽署知情同意書。

1.2 超聲引導下FNA 使用多普勒超聲診斷儀(飛利浦公司,clearvue 550型)進行檢查,高頻線陣探頭(頻率10～13 MHz),觀察并記錄甲狀腺結節的性質、邊界、形態、鈣化情況、彈性評分、回聲、內部血流信號、縱橫比等信息。患者取仰臥位,枕頭墊肩并充分暴露頸前部甲狀腺區域,超聲觀察結節部位及深度,隨后定位,行常規消毒、鋪巾,在超聲引導下采用23G穿刺針經皮穿刺甲狀腺結節,實時監測進針情況,確定病灶取材部位后按下活檢槍扳機,退針后取下活檢條,放置于10%甲醛溶液固定。

1.3 細胞學檢查

1.3.1 HE染色 穿刺組織標本蘇木素染色,分化,伊紅染色,封片,干燥后鏡檢,由兩名經驗豐富的病理醫師診斷。

1.3.2 免疫組化染色 穿刺組織標本置于二甲苯溶液中脫蠟處理,梯度酒精脫水后置于蛋白酶修復液中,37 ℃孵化30 min,加入3% H2O2溶液,去過氧化物酶封閉液密封,孵育10 min后使用PBS沖洗,滴加一抗,放置3 h,PBS沖洗3次,滴加二抗,在37 ℃下孵育0.5 h,PBS沖洗3次,給予DAB反應染色,常規脫水并封片。免疫組化切片由1名高年資病理醫師閱片。HBME-1以細胞膜著色為陽性,IMP-3以細胞質著色為陽性。

1.4 觀察指標 ①記錄甲狀腺結節性質及類型,與術后病理結果作對比;②比較甲狀腺良惡性結節中HBME-1、IMP-3的表達情況;③比較超聲引導下FNA、HBME-1、IMP-3及三者聯合對甲狀腺結節的診斷結果。

1.5 統計學方法 采用SPSS 20.0軟件進行數據分析,計數資料以[n(%)]表示,組間比較采用χ2檢驗;應用受試者工作特征曲線(ROC)分析超聲引導下FNA聯合HBME-1、IMP-3對甲狀腺結節的診斷效能。P<0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 病理結果與超聲引導下FNA及 HBME-1、IMP-3診斷結果比較 術后病理結果顯示,146例甲狀腺結節患者中,良性甲狀腺結節47例,惡性甲狀腺結節99例。詳見表1。超聲引導下FNA診斷結果顯示,甲狀腺良性結節50例,惡性96例;HBME-1診斷結果顯示,甲狀腺良性結節48例,惡性98例;IMP-3診斷結果顯示,甲狀腺良性結節46例,惡性100例;超聲引導下FNA聯合HBME-1、IMP-3診斷結果顯示,甲狀腺良性結節43例,惡性103例。

表1 甲狀腺結節患者的術后病理結果(n=146)Table 1 Postoperative pathological results in patients with thyroid nodules (n=146)

2.2 HBME-1、IMP-3的表達情況 甲狀腺惡性結節組,HBME-1、IMP-3陽性表達率分別為90.91%(90/99)、88.89%(88/99);甲狀腺良性結節組,HBME-1、IMP-3陽性表達率分別為17.02%(8/47)、25.53%(12/47);2組差異均有統計學意義(χ2=78.843、59.281,均P<0.05)。

2.3 診斷符合率 以術后病理結果為“金標準”,超聲引導下FNA聯合HBME-1、IMP-3的診斷符合率(91.78%,134/146)高于超聲引導下FNA診斷符合率(78.77%,115/146)、IMP-3診斷符合率(84.25%,123/146),差異均有統計學意義(χ2=9.845、3.928,均P<0.05);超聲引導下FNA聯合HBME-1、IMP-3診斷符合率與HBME-1診斷符合率,差異無統計學意義(χ2=0.957,P>0.05)。HBME-1診斷符合率為88.36%(129/146),高于超聲引導下FNA診斷符合率(78.77%),差異有統計學意義(χ2=4.887,P<0.05);超聲引導下FNA診斷符合率與IMP-3診斷符合率比較,HBME-1診斷符合率與IMP-3診斷符合率比較,差異均無統計學意義(χ2=1.454、1.043,均P>0.05)。

2.4 診斷效能 ROC曲線顯示,超聲引導下FNA聯合HBME-1、IMP-3診斷甲狀腺結節的AUC為0.895,高于三者單獨診斷的0.765、0.869、0.817,差異均有統計學意義(Z=4.325、2.283、3.205,均P<0.05)。見圖1。

圖1 超聲引導下FNA聯合HBME-1、IMP-3診斷甲狀腺結節的ROC曲線Figure 1 ROC curves of ultrasound-guided FNA combined with HBME-1 and IMP-3 in the diagnosis of thyroid nodules

3 討論

甲狀腺結節的病因較為復雜,患者臨床主要表現為甲狀腺內存在腫塊,且結節隨吞咽動作上下移動[5]。甲狀腺惡性結節具有病情進展迅速、易轉移等特點,對患者的生活品質及安全造成了威脅[6]。因此,探尋有效、迅速的檢查方式是現階段臨床診斷甲狀腺結節良惡性的熱點問題。超聲引導下FNA是臨床有效診斷甲狀腺結節良惡性的手段,但FNA屬于有創性檢查,易引起并發癥,少數患者穿刺后可能發生血管神經性反應引起的惡心、心悸及頭暈等癥狀[7]。近年來隨著分子生物學技術的迅速發展,多種分子標志物正逐漸用于甲狀腺結節的早期診斷中,但現階段多數標志物的檢測尚處于研究階段,故篩選有關甲狀腺結節病變性質鑒別診斷的分子標志物對后續臨床方案的治療及患者轉歸尤為重要。

本研究結果顯示,甲狀腺惡性結節組HBME-1陽性表達率高于甲狀腺良性結節組,提示HBME-1與甲狀腺惡性結節的發生存在密切聯系。HBME-1廣泛分布于上皮和間皮細胞腫瘤中,其具體結構及生化作用尚未完全明確,國內外研究均認為HBME-1能調控腫瘤細胞生長、轉移及腫瘤血管形成過程,從而影響腫瘤發生發展[8-9]。現階段HBME-1在臨床上多用于間皮細胞癌、乳腺癌及胰腺癌的診斷,近年來臨床逐漸重視其診斷甲狀腺癌的價值[10]。既往報道顯示,HBME-1在甲狀腺良性結節中不表達或呈弱陽性表達,在甲狀腺惡性結節中呈彌漫性強陽性表達[11]。

本研究中甲狀腺惡性結節組IMP-3陽性表達率高于良性結節組,表明IMP-3與甲狀腺結節惡性病變的發生相關,這可能是因為P53/Cyc信號通路在IMP-3作用下可與p53共同作用被激活,導致癌細胞DNA發生活性增殖,并促進癌細胞早期分化調控因子轉錄,最終誘發惡性病變。IMP-3是定位于人類染色體7p11.5的癌癥相關蛋白,在細胞增殖及遷移過程中具有重要作用[12]。在機體正常生理狀態下,IMP-3主要表達于胚胎組織中,在健康成年人正常組織中表達較少,但其機體細胞發生癌變時會發生去分化而重新分泌胚胎時期特有的蛋白[13]。國外研究發現,IMP-3多表達于胃癌、宮頸癌等癌組織中,能通過影響胰島素樣生長因子Ⅱ表達而促進腫瘤細胞增殖及分化[14]。由ROC曲線可知,超聲引導下FNA聯合HBME-1、IMP-3診斷甲狀腺結節的AUC高于三者單獨診斷,提示超聲引導下FNA聯合HBME-1及IMP-3可以明顯提高診斷效能。

綜上所述,超聲引導下FNA和HBME-1、IMP-3水平對甲狀腺結節的診斷價值較高,三者聯合有助于提高甲狀腺結節的臨床診斷率,具有良好的臨床應用價值。