大青葉化學成分的研究

袁銘銘，李柯城，2，代 敏，2，周雷罡，周國平*，吳良發*

（1.江西省藥品檢驗檢測研究院，國家藥品監督管理局中成藥質量評價重點實驗室，江西省藥品與醫療器械質量工程技術研究中心，江西 南昌 330029；2.江西中醫藥大學，江西 南昌 330004）

大青葉為十字花科草本植物菘藍Isatis indigoticaFort.的干燥葉，具有利咽止痛、涼血消斑、清熱解毒等功效，臨床上主要用于癰腫、痄腮、發斑發疹、神昏、溫病高熱［1］，具有抗病毒、抗氧化、抗菌、解熱等作用［2-4］，目前報道大青葉的化學成分主要分為生物堿、有機酸、黃酮、苷類等［5-7］。為進一步開發該中藥，明確其藥效物質基礎，課題組對大青葉75%醇提物的正丁醇部位進行提取分離，共分離得到16 個化合物，除化合物9 外均為首次從菘藍屬植物中分離得到。

1 材料

UltiMate 3000 型高效液相色譜儀（美國賽默飛公司）；Varian UNITY INOVA 600 MHz 型超導核磁共振儀（美國Varian 公司）；旋轉蒸發儀（瑞士步琪公司）；Agilent 1260infinity II Prep 型制備液相色譜儀（美國Agilent 公司）；ME204TE 型電子天平（瑞士梅特勒-托利多公司）；Sephadex LH-20 凝膠（瑞典Amersham Biosciences 公司）；YMC-C18柱（日本YMC 公司）；薄層硅膠板、柱層析硅膠（青島海洋化工廠）。甲醇、乙腈為色譜純 （美國Sigma 公司）；其他所用試劑均為分析純；水為純化水。

大青葉由江西藥都仁和制藥有限公司提供，經江西省藥品檢驗檢測研究院周國平主任中藥師鑒定為菘藍IsatisindigoticaFort.的干燥葉。

2 提取與分離

取大青葉18 kg 粉碎，經75%乙醇加熱回流提取，提取液濃縮至無醇味后加水混懸，依次用石油醚（60～90 ℃）、乙酸乙酯、水飽和正丁醇進行萃取，得到正丁醇萃取物（620 g）。

正丁醇萃取物經大孔樹脂D101 分離，以乙醇-水（0 ∶100～95 ∶5） 梯度洗脫，得10%乙醇部位（31.2 g）、50%乙醇部位（104 g）、75%乙醇部位（27.4 g）。

10%乙醇部位（30.8 g） 經硅膠柱分離，以二氯甲烷-甲醇（15 ∶1～1 ∶1） 梯度洗脫，合并洗脫液，得Fr.1～Fr.16。Fr.1 （333 mg） 經制備HPLC純化，以甲醇-0.02% 三氟乙酸水（8 ∶92） 洗脫（體積流量10 mL／min，檢測波長210 nm），得化合物1 （5 mg，tR＝46.8 min）。Fr.6 （148 mg） 經制備HPLC 純化，以甲醇-0.05%三氟乙酸水（2 ∶98） 洗脫（體積流量10 mL／min，檢測波長210 nm），得化合物2 （30.4 mg，tR＝66.2 min）、4（20.8 mg，tR＝78.4 min）、5 （12.6 mg，tR＝83.5 min）。Fr.8 經硅膠柱分離，以二氯甲烷-甲醇（13 ∶1～8 ∶1）梯度洗脫，合并洗脫液，得Fr.8-1～Fr.8-4，Fr.8-2 （172 mg） 經制備HPLC 純化，以甲醇-0.05%三氟乙酸水（8 ∶92） 洗脫（體積流量10 mL／min，檢測波長210 nm），得化合物3（13.7 mg，tR＝55.0 min）。Fr.13 （1.90 g） 經硅膠柱分離，以二氯甲烷-甲醇（8 ∶1～4 ∶1） 梯度洗脫，合并洗脫液，得Fr.13-1～Fr.13-4，Fr.13-4（100 mg） 經制備HPLC 純化，以甲醇-0.01%三氟乙酸水（18 ∶82） 洗脫（體積流量10 mL／min，檢測波長210 nm），得化合物6 （30.5 mg，tR＝41.4 min）。

50%乙醇部位（104 g） 經硅膠柱分離，以二氯甲烷-甲醇（2.5 ∶1） 洗脫，抽干溶劑，收集溶劑部分，再將固定相切成11 份，用甲醇洗脫，合并得Fr.A～Fr.F。Fr.A （4.2 g） 經硅膠柱分離，以二氯甲烷-甲醇（15 ∶1～6 ∶1） 梯度洗脫，合并洗脫液，得Fr.A-1～Fr.A-8。Fr.A-7 （130 mg） 經制備HPLC 純化，以甲醇-0.02%三氟乙酸水（8 ∶92） 洗脫（體積流量10 mL／min，檢測波長210 nm），得化合物7 （37 mg，tR＝77.1 min）。Fr.B（14.3 g） 經硅膠柱分離，以二氯甲烷-甲醇（8 ∶1～2 ∶ 1） 梯度洗脫，合并洗脫液，得Fr.B-1～Fr.B-12。Fr.B-7 （270 mg） 經制備HPLC純化，以乙腈-0.02%三氟乙酸水（14 ∶82） 洗脫（體積流量10 mL／min，檢測波長210 nm），得化合物8 （47 mg，tR＝65.8 min）、11 （11 mg，tR＝102.3 min）。Fr.B-10 （430 mg） 經制備HPLC 純化，以乙腈-0.02% 三氟乙酸水 （18 ∶82） 洗脫（體積流量10 mL／min，檢測波長210 nm），得化合物9 （27 mg，tR＝71.4 min）、10 （30 mg，tR＝84.8 min）。Fr.D （8.4 g） 經硅膠柱分離，以二氯甲烷-甲醇（4 ∶1～1 ∶1） 梯度洗脫，合并洗脫液，得Fr.D-1～Fr.D-4，Fr.D-2 （370 mg） 經制備HPLC 純化，以乙腈-0.02%三氟乙酸水（17 ∶83）洗脫（體積流量10 mL／min，檢測波長210 nm），得化合物12 （27 mg，tR＝74.5 min）。

75%乙醇部位（27.4 g） 經硅膠柱分離，以二氯甲烷-甲醇（25 ∶1～9 ∶1） 洗脫，合并洗脫液，得Fr.Ⅰ～Fr.Ⅵ。Fr.Ⅱ（58 mg） 經制備HPLC 純化，以乙腈-0.05% 三氟乙酸水 （48 ∶52） 洗脫（體積流量10 mL／min，檢測波長210 nm），得化合物13 （18 mg，tR＝52.2 min）。Fr.Ⅳ（610 mg）經Sephadex LH-20 凝膠柱分離，合并得Fr.Ⅳ-1～Fr.Ⅳ-4；Fr.Ⅳ-2 （27 mg） 經制備HPLC 純化，以乙腈-0.02%三氟乙酸水（23 ∶77） 洗脫（體積流量10 mL／min，檢測波長210 nm），得化合物14（8 mg，tR＝58.1 min）；Fr.Ⅳ-3 （98 mg） 經制備HPLC 純化，以甲醇-0.02%三氟乙酸水（40 ∶60）洗脫（體積流量10 mL／min，檢測波長210 nm），得化合物15 （18 mg，tR＝82.4 min）；Fr.Ⅳ-4 （76 mg） 經制備HPLC 純化，以乙腈-0.02% 三氟乙酸水（40 ∶60） 洗脫（體積流量10 mL／min，檢測波長210 nm），得化合物16 （14 mg，tR＝65.3 min）。

3 結構鑒定

化合物1：淡黃色油狀，ESI-MSm／z：291.1［M+Na］+，分子式C17H32O2。1H-NMR （600 MHz，DMSO-d6）δ：5.33 （2H，m，H-2～3），2.23（2H，t，J＝7.2 Hz，H-11），0.86 （3H，t，J＝7.2 Hz，H-17）；13C-NMR （150 MHz，DMSO-d6）δ：129.2 （C-2～3），26.2 （C-4～5），28.6 （C-6），28.2 （C-7），28.3 （C-8），28.4 （C-9），24.7 （C-10），34.7 （C-11），28.6 （C-12），21.7（C-13），28.7 （C-14），30.9 （C-15），13.6 （C-16～17）。以上數據與文獻［8］ 報道基本一致，故鑒定為（Z）-9-heptadecenoic acid。

化合物2：白色粉末，ESI-MSm／z：237.1［M+Na］+，分子式C10H14O5。1H-NMR （600 MHz，DMSO-d6）δ：6.89 （1H，s，H-2），6.70 （1H，d，J＝8.0 Hz，H-6），6.67 （1H，d，J＝8.1 Hz，H-5），4.33 （1H，d，J＝6.2 Hz，H-7），3.74（3H，s，-OCH3），3.44 （1H，dd，J＝11.0，3.9 Hz，H-9a）；13C-NMR （150 MHz，DMSO-d6）δ：134.8 （C-1），111.8 （C-2），147.4 （C-3），145.7 （C-4），115.0 （C-5），120.0 （C-6），74.4（C-8），75.8 （C-8），63.5 （C-9），56.0 （-OCH3）。以上數據與文獻［9］ 報道基本一致，故鑒定為（7R，8S）-赤式-愈創木基丙三醇。

化合物3：白色粉末，ESI-MSm／z：355.2［M+Na］+，分子式C14H20O9。1H-NMR （600 MHz，DMSO-d6）δ：9.22 （1H，s，-OH），6.06 （2H，s，H-3，5），4.64 （1H，d，J＝6.0 Hz，H-1'），3.68 （6H，s，2×OCH3），3.59 （1H，d，J＝11.6 Hz，H-6a'），3.41 （1H，d，J＝13.7 Hz，H-6b'），3.17 （1H，d，J＝6.1 Hz，H-3'），3.12 （1H，t，J＝7.9 Hz，H-4'）；13C-NMR （150 MHz，DMSOd6）δ：127.9 （C-1），153.6 （C-2，6），94.2（C-3，5），154.4 （C-4），103.9 （C-1'），74.61（C-2'），77.5 （C-3'），70.43 （C-4'），76.9 （C-5'），61.5 （C-6'），56.5 （2×OCH3）。以上數據與文獻［10］ 報道基本一致，故鑒定為2，6-二甲氧基-4-羥基-苯酚-1-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。

化合物4：白色粉末，ESI-MSm／z：301.1［M-H］-，分子式C13H18O8。1H-NMR （600 MHz，DMSO-d6）δ：9.04 （1H，s，7-OH），6.89 （1H，d，J＝8.7 Hz，H-6），6.39 （1H，d，J＝2.7 Hz，H-3），6.22 （1H，dd，J＝8.7，2.7 Hz，H-5），4.67 （1H，d，J＝7.4 Hz，H-1'），3.69 （3H，s，2-OCH3），3.66 （1H，dd，J＝11.8，2.1 Hz，H-6a'），3.45 （1H，dd，J＝11.8，5.6 Hz，H-6b'），3.13 （1H，dd，J＝9.7，8.3 Hz，H-4'）；13C-NMR （150 MHz，DMSO-d6）δ：39.1 （C-1），149.7 （C-2），101.2 （C-3），152.5 （C-4），105.7 （C-5），117.0 （C-6），100.6 （C-1'），73.1 （C-2'），76.7 （C-3'），69.5 （C-4'），76.5（C-5'），60.5 （C-6'），55.3 （2-OCH3）。以上數據與文獻 ［11］ 報道基本一致，故鑒定為isotachioside。

化合物5：白色粉末，ESI-MSm／z：301.0［M-H］-，分子式C13H18O8。1H-NMR （600 MHz，DMSO-d6），δ：6.69 （1H，d，J＝2.8 Hz，H-2），6.66 （1H，d，J＝8.5 Hz，H-6），6.46 （1H，dd，J＝8.6，2.8 Hz，H-5），4.67 （1H，d，J＝7.7 Hz，H-1'），3.73 （3H，s，3-OCH3），3.71 （1H，dd，J＝11.8，2.2 Hz，H-6'），3.45 （1H，dd，J＝11.8，6.2 Hz，H-6'），3.31～3.25 （1H，m，H-5'），3.24 （1H，dd，J＝8.0，8.8 Hz，H-3'），3.12 （1H，dd，J＝9.8，8.7 Hz，H-4'）；13C-NMR （150 MHz，DMSO-d6）δ：141.8 （C-1），148.2 （C-2），102.9 （C-3），151.2 （C-4），108.4 （C-5），115.6 （C-6），102.2 （C-1'），73.8 （C-2'），77.2 （C-3'），70.4 （C-4'），77.5（C-5'），61.3 （C-6'），55.9 （3-OCH3）。以上數據與文獻 ［11］ 報道基本一致，故鑒定為tachioside。

化合物6：白色粉末，ESI-MSm／z：406.2［M-H］-，分子式C19H33O9。1H-NMR （600 MHz，DMSO-d6）δ：5.92 （1H，dd，J＝16.0，1.3 Hz，H-7），5.68 （1H，dd，J＝15.9，5.9 Hz，H-8），4.37 （1H，d，H-10），4.00 （1H，t，J＝11.6，4.3 Hz，H-4'），1.79 （1H，ddd，J＝12.6，4.3，2.1 Hz，H-4eq），1.62 （2H，dd，J＝12.0，4.4 Hz，H-4ax，2ax），1.42 （1H，ddd，J＝12.2，4.3，2.1 Hz，H-2eq），1.14 （3H，d，J＝6.3 Hz，H-10），1.10 （3H，s，H-13），1.02 （3H，s，H-11），0.74 （3H，s，H-12）；13C-NMR （150 MHz，DMSO-d6）δ：40.03 （C-1），43.6 （C-2），71.9（C-3），41.9 （C-4），76.0 （C-5），77.3 （C-6），129.1 （C-7），135.3 （C-8），67.3 （C-9），24.9（C-10），27.4 （C-11），26.0 （C-12），27.2 （C-13），101.5 （C-1'），73.8 （C-2'），77.1 （C-3'），70.3 （C-4'），76.9 （C-5'），61.3 （C-6'）。以上數據與文獻［12］ 報道基本一致，故鑒定為（3S，5R，6R，7E，9S）-megastigman-7-ene-3，5，6，9-tetrol 3-O-β-D-glucopyranoside。

化合物7：黃色粉末，ESI-MSm／z：723.2［M-H］-，分子式C33H40O18。1H-NMR （600 MHz，DMSO-d6）δ：7.56 （1H，d，J＝15.8 Hz，H-7'），7.53 （1H，d，J＝15.7 Hz，H-7），7.31 （1H，d，J＝2.1 Hz，H-2?），7.06 （1H，m，H-6?），6.98（2H，s，H-2″，6″），6.70 （1H，d，J＝7.1 Hz，H-5?），6.52 （1H，d，J＝15.9 Hz，H-8'），6.44（1H，d，J＝15.9 Hz，H-8），5.81 （1H，d，J＝8.4 Hz，H-1），4.93 （1H，t，J＝9.0 Hz，H-2），4.08 （1H，d，J＝7.5 Hz，H-1'），3.98 （1H，d，H-6b），3.92 （3H，s，3?-OCH3），3.78 （6H，s，3″，5″-OCH3），3.39 （1H，dd，H-4），3.23（1H，dd，H-3'），2.95 （1H，dd，H-2'）；13C-NMR （150 MHz，DMSO-d6）δ：92.0 （C-1），72.7 （C-2），73.8 （C-3），69.3 （C-4），76.4（C-5），67.4 （C-6），146.0 （C-7），113.4 （C-8），164.9 （C-9），102.9 （C-1'），73.2 （C-2'），76.4 （C-3'），69.9 （C-4'），76.4 （C-5'），60.3（C-6'），146.0 （C-7'），113.4 （C-8'），165.7（C-9'），124.0 （C-1″），106.2 （C-2″），148.0（C-3″），138.8 （C-4″），147.4 （C-5″），106.5（C-6″），124.3 （C-1?），110.9 （C-2?），148.0（C-3?），148.1 （C-4?），114.6 （C-5?），121.8（C-6?），56.1 （3″，5″，3?-OCH3）。以上數據與文獻［13］ 報道基本一致，故鑒定為6-O-β-Dglucopyranosy-β-D-（1-O-sinapoyl-2-O-feruloyl）glucopyranose。

化合物8：白色粉末，ESI-MSm／z：180.1［M+H］+，分子式C9H9NO3。1H-NMR （600 MHz，DMSO-d6）δ：11.32 （1H，s，7-OH），8.45（1H，d，J＝8.3 Hz，H-3），7.97 （1H，d，J＝7.2 Hz，H-6），7.54 （1H，t，J＝7.8 Hz，H-4），7.11 （1H，t，J＝7.6 Hz，H-5），2.12 （3H，s，-CH3）；13C-NMR （150 MHz，DMSO-d6）δ：119.6（C-1），140.6 （C-2），117.0 （C-3），133.4 （C-4），122.2 （C-5），130.8 （C-6），168.2 （C-8），24.78 （C-9），169.5 （-COOH）。以上數據與文獻［14］ 報道基本一致，故鑒定為2-（乙酰胺基）-苯甲酸。

化合物9：白色粉末，ESI-MSm／z：223.1［M-H］-，分子式C11H12O5。1H-NMR （600 MHz，DMSO-d6）δ：12.17 （1H，s，-COOH），8.93（1H，s，-OH），7.50 （1H，d，J＝15.9 Hz，H-7），6.98 （2H，s，H-2，6），6.42 （1H，d，J＝15.9 Hz，H-8），3.80 （6H，s，2 × OCH3）；13C-NMR （150 MHz，DMSO-d6）δ：124.4 （C-1），105.8 （C-2），147.8 （C-3），137.8 （C-4），147.8 （C-5），105.8 （C-6），144.6 （C-7），115.9 （C-8），167.8 （-COOH），55.9 （-OCH3）。以上數據與文獻［15］ 報道基本一致，故鑒定為芥子酸。

化合物10：白色粉末，ESI-MSm／z：385.5［M-H］-，分子式C17H22O10。1H-NMR （600 MHz，DMSO-d6）δ：β-isomer 7.64 （1H，d，J＝15.8 Hz，H-7'），α-isomer 7.55 （1H，d，J＝15.8 Hz，H-7'），7.03 （4H，s，H-2'α，6'α，2'β，6'β），6.58 （1H，d，J＝15.8 Hz，H-8'），6.53 （1H，d，J＝15.9 Hz，H-8'），5.48 （1H，d，H-1），4.26 （1H，d，J＝7.8 Hz，H-1），4.19 （1H，dd，J＝11.9，5.9 Hz，H-6α），3.98 （1H，dd，J＝11.7，2.4 Hz，H-6β），3.61 （1H，dd，J＝11.4，5.6 Hz，H-6α），3.79 （12H，s，4×OCH3），3.45（1H，dd，J＝10.2，5.7 Hz，H-6β）；13C-NMR（150 MHz，DMSO-d6）δ：α-isomer 94.2 （C-1），73.8 （C-2），72.6 （C-3），69.8 （C-4），69.3（C-5），63.5 （C-6），124.5 （C-1'），106.4 （C-2'，6'），148.1 （C-3'，5'），138.6 （C-4'），146.7 （C-7'），114.8 （C-8'），166.8 （C-9'），56.1 （3'，5'-OCH3），β-isomer 103.1 （C-1），76.3 （C-2），76.5 （C-3），73.4 （C-4），76.4（C-5），68.2 （C-6），124.3 （C-1'），106.3 （C-2'，6'），148.0 （C-3'，5'），138.3 （C-4'），145.6 （C-7'），114.3 （C-8'），165.4 （C-9'），6.11 （3'，5'-OCH3）。以上數據與文獻［16］ 報道基本一致，故鑒定為 4-O-sinapoyl-α／β-Dglucopyranose。

化合物11：白色粉末，ESI-MSm／z：777.2［M+Na］+，分子式C34H42O19。1H-NMR （600 MHz，DMSO-d6）δ：7.58 （1H，d，J＝15.8 Hz，H-7″），7.56 （1H，d，J＝15.8 Hz，H-7?），7.07 （2H，s，H-2″，6″），7.03 （2H，s，H-2?，6?），6.64（1H，d，J＝15.8 Hz，H-8″），6.54 （1H，d，J＝15.9 Hz，H-8?），5.30 （1H，d，H-1），4.60（2H，m，H-6，6b'），4.42 （1H，m，J＝9.4，12.1 Hz，H-6b'），4.10 （1H，m，H-5），3.81（1H，t，H-5'），3.77 （12H，s，4 × OCH3）；13C-NMR （150 MHz，DMSO-d6）δ：92.0 （C-1），70.6 （C-2），74.0 （C-3），69.7 （C-4），69.8（C-5），63.7 （C-6），61.2 （C-1'），105.2 （C-2'），77.5 （C-3'），74.8 （C-4'），77.6 （C-5'），67.8 （C-6'），124.3 （C-1″），106.6 （C-2″，6″），147.6 （C-3″），138.9 （C-4″），147.6 （C-5″），143.7 （C-7″），115.7 （C-8″），165.1 （C-9″），125.1 （C-1?），106.7 （C-2?，6?），148.3 （C-3?），139.1 （C-4?），148.4 （C-5?），145.7 （C-7?），116.6 （C-8?），166.2 （C-9?），56.43 （-OCH3）。以上數據與文獻 ［17］ 報道基本一致，故鑒定為6，6'-di-O-sinapoylsurcose。

化合物12：黃色粉末，ESI-MSm／z：755.1［M+H］+，分子式C34H42O19。1H-NMR （600 MHz，DMSO-d6）δ：7.60 （1H，d，J＝15.7 Hz，H-7'），7.51 （1H，d，J＝15.7 Hz，H-7），7.00 （4H，s，H-2，2'，6，6'），6.54 （1H，d，J＝15.9 Hz，H-8'），6.49 （1H，d，J＝15.9 Hz，H-8），5.44（1H，d，J＝8.3 Hz，H-1），4.85 （1H，dd，J＝8.5，Hz，H-2），4.32 （1H，d，H-1'），3.75（12H，s，4 × OCH3）；13C-NMR （150 MHz，DMSO-d6）δ：93.74 （C-1），73.0 （C-2），73.4（C-3），69.4 （C-4），75.9 （C-5），67.7 （C-6），102.7 （C-1'），72.1 （C-2'），75.8 （C-3'），68.9（C-4'），76.1 （C-5'），63.1 （C-6'），55.68 （4×OCH3），acyl 123.9 （C-1），105.9 （C-2），147.6（C-3，5），137.9 （C-4），106.0 （C-6），145.1（C-7），113.9 （C-8），164.9 （C-9），124.0 （C-1'），105.9 （C-2'），147.6 （C-3'，5'），138.2（C-4'），106.0 （C-6'），146.3 （C-7'），114.4（C-8'），166.3 （C-9'）。以上數據與文獻 ［13］報道基本一致，故鑒定為6-O-β-D-glucopyranosy-β-D-（1-O-sinapoyl-2-O-sinapoyl） glucopyranose。

化合物13：黃色針狀物，ESI-MSm／z：279.1［M+H］+，分子式C16H22O4。1H-NMR （600 MHz，DMSO-d6）δ：7.70 （4H，dd，J＝5.9，3.3 Hz，H-2～3，5～6），4.23 （4H，t，H-9，9'），0.92 （6H，t，J＝7.4 Hz，H-12，12'）；13C-NMR （150 MHz，DMSO-d6）δ：132.2 （C-1，4），132.0 （C-2，6），129.1 （C-3，5），167.5 （C-7，7'），65.5 （C-9，9'），30.5 （C-10，10'），19.1 （C-11，11'），14.0（C-12，12'）。以上數據與文獻［18］ 報道基本一致，故鑒定為對苯二甲酸二丁酯。

化合物14：黃色粉末，ESI-MSm／z：249.2［M+H］+，分子式C16H8O3。1H-NMR （600 MHz，DMSO-d6）δ：8.48 （1H，dt，J＝8.0，0.9 Hz，H-8），8.32 （1H，dt，J＝7.9，1.1 Hz，H-6'），7.95 （1H，d，J＝7.9 Hz，H-3'），7.94 （1H，t，J＝7.7 Hz，H-5），7.88 （1H，m，H-4'），7.86（1H，t，J＝7.7，1.4 Hz，H-7），7.78 （1H，m，H-5'），7.48 （1H，t，J＝7.5，1.0 Hz，H-6）；13C-NMR （150 MHz，DMSO-d6）δ：145.5 （C-2），158.2 （C-3），182.9 （C-4），125.2 （C-5），127.4（C-6），138.2 （C-7），117.5 （C-8），146.5 （C-9），122.7 （C-10），123.8 （C-1'），146.9 （C-2'），130.4 （C-3'），135.6 （C-4'），130.3 （C-5'），127.4 （C-6'），172.0 （C-7'）。以上數據與文獻［19］ 報道基本一致，故鑒定為胭木二酮。

化合物15：白色晶體，EI-MSm／z：163.1［M+H］+，分子式C10H10O2。1H-NMR （600 MHz，DMSO-d6）δ：7.41 （2H，d，J＝7.0 Hz，H-2，6），7.32 （2H，t，J＝7.7 Hz，H-3，5），7.23（1H，t，J＝7.1 Hz，H-4），6.49 （1H，d，J＝15.4 Hz，H-7），6.31 （1H，dt，J＝16.9，7.0 Hz，H-8），3.19 （2H，d，J＝7.0 Hz，H-9）；13C-NMR （150 MHz，DMSO-d6）δ：136.6 （C-1），128.5 （C-2，6），127.2 （C-3，5），125.9 （C-4），123.1 （C-7），132.1 （C-8），37.71 （C-9），172.5 （C-10）。以上數據與文獻［20］ 報道基本一致，故鑒定為反式-4-苯基-3-丁烯酸。

化合物16：白色無定形固體，ESI-MSm／z：238.2 ［M + H］+，分子式C11H15N3O3。1H-NMR（600 MHz，pyridine-d5）δ：12.00 （1H，s，2-NH），8.87 （1H，d，J＝8.1 Hz，H-3），8.49（1H，d，J＝8.0 Hz，H-6），7.53 （1H，t，J＝7.9 Hz，H-4），7.08 （1H，t，J＝7.4 Hz，H-5），5.59 （1H，s，3-NH），0.79 （3H，t，J＝7.4 Hz，H-1'）；13C-NMR （150 MHz，pyridine-d5）δ：132.1 （C-1），135.0 （C-2），122.9 （C-3），121.3 （C-4），133.5 （C-5），118.4 （C-6），13.6（C-1'），19.0 （C-2'），31.0 （C-3'），40.5 （C-4'），153.9 （C＝O）。以上數據與文獻［21］ 報道基本一致，故鑒定為N-butyl-N'-（2'-nitrophenyl）urea。該化合物為首次從植物中發現，其1H-NMR、13C-NMR數據見表1，結構見圖1。

圖1 化合物16 結構Fig．1 Structure of compound 16

表1 化合物16 的1H-NMR、13C-NMR 數據Tab．1 1H-NMR and 13C-NMR data on compound 16

4 結論

本研究從大青葉75% 醇提物的正丁醇萃取部位共分離得到16 個化合物，包括13 個有機酸類、1 個生物堿類、1 個木脂素類、1 個單萜。有機酸類成分具有抗炎鎮痛、抗血栓、抑菌作用［22-24］；其中化合物1 具有抗真菌活性［8］，化合物10 具有抗自由基活性［16］，化合物15 具有保護農作物的作用（防止稻瘟病、炭疽病）［20］。其余化合物藥理活性尚不明確。本研究通過對大青葉的化學成分研究，豐富了其物質基礎，為后續大青葉活性物質篩選及臨床應用研究提供參考，從而更好的開發利用該藥用資源。