QuEChERS-GC-MS/MS 檢測蔬菜中敵敵畏、毒死蜱、二甲戊靈等7 種農藥殘留

葛 斌

（鄭州市食品藥品檢驗所，河南鄭州 450000）

現如今農藥已經是農業生產中不可或缺的重要組成部分，農藥主要用于預防、消滅、控制危害農業生產過程中的有害生物及有目的地調節、控制、影響植物[1-4]。農藥在農業生產過程中起到了保障農作物生長、調節農作物生長發育的作用。現階段，農藥種類繁多，化學結構復雜，作用機理不同，防治對象各異。我國是農業生產大國，農藥是預防控制病蟲害的有效工具，且現在還沒有任何防治手段可以替代農藥的作用[5]。農藥根據結構可以分為無機農藥、生物農藥、有機農藥。無機農藥即從天然礦物中得到的化合物，如硫黃粉等，多用于有機蔬菜的種植。無機農藥一般分子量比較小，所以穩定性較差，不適合與其他農藥混用。生物農藥是利用生物或者生物代謝物進行病蟲害防治，如白僵菌、阿維菌素等，這類農藥一般只針對某一類病蟲有防治效果，對人體相對安全，多數用于有機食品、綠色食品種植[6]。有機農藥即人工合成農藥，有機農藥種類繁多，化學機構復雜，大多屬于高分子化合物，多數適宜現用現配，混合使用。按照作用不同主要可分為5 種：①有機殺蟲類，主要有有機磷類、氨基甲酸酯類、擬除蟲菊酯類等；②有機殺螨劑，主要是一些含錫、不含錫的殺螨劑；③有機殺菌劑，包括二硫代氨基甲酸酯類、二甲酰亞胺類、苯并咪唑類等；④有機除草劑，主要有苯氧羧酸類、氨基甲酸酯類、二苯醚類等；⑤植物生長調節劑，主要是生長素類、細胞分裂素類等。

為保障公眾食品安全，農藥使用一定要注意安全間隔期，《食品安全國家標準 食品中農藥最大殘留限量》（GB 2763—2021）中明確規定了每一種農藥的最大殘留限量，農藥殘留超標則有可能對人體健康造成影響。當前蔬菜中農藥殘留的檢測方法有液相色譜法、氣相色譜法、氣相色譜串聯質譜法和液相色譜串聯質譜法[7-9]，其中氣相色譜串聯質譜法和液相色譜串聯質譜法是目前主流的檢測方法，具有高通量、定性準確、前處理便捷等優點。本文通過使用氣相色譜-三重四極桿串聯質譜（Gas Chromatography-Triple Quadrupole Tandem Mass Spectrometry，GCMS/MS），優化前處理方法，建立了蔬菜中敵敵畏、毒死蜱、二甲戊靈等7 種農藥的快速檢測方法。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

乙腈（色譜純），美國fisher 公司；敵敵畏、毒死蜱、二甲戊靈、腐霉利、殺撲磷、己唑醇、狄氏劑，純度均大于97%，TRC-CANADA 公司；實驗用水為超純水。

Trace-TQS8000 EVO型三重四極桿氣質聯用儀，配有電子轟擊源，美國賽默飛世爾科技公司；振蕩器，美國賽默飛世爾科技公司；MG-2200 型氮氣吹干儀；離心機，中國湘儀集團；電子天平，梅特勒-托利多儀器上海有限公司。

1.2 實驗方法

1.2.1 標準儲備液的配制

使用移液槍分別吸取7 種農藥各0.1 mL，使用乙腈定容至10 mL 容量瓶中，配制成10 mg·L-1的中間液，使用時根據需要配制成5 ng·mL-1、10 ng·mL-1、50 ng·mL-1、100 ng·mL-1、200 ng·mL-1和500 ng·mL-1的標準溶液。所有中間液避光存放在-18 ℃冰箱中。

1.2.2 樣品前處理稱取10 g 樣品于50 mL 離心管中，加入10 mL 1.0%乙酸-乙腈振蕩提取20 min，之后加入4 g硫酸鎂、1 g 氯化鈉、1 g 檸檬酸鈉后渦旋5 min，3 000 r·min-1離心2 min，取上清液6 mL 轉移至裝有150 mg AMS、50 mg C18和10 mg GCB 凈化劑的離心管中，渦旋5 min，3 000 r·min-1離心2 min，取上清液2 mL，40 ℃氮氣吹干，復溶，過濾膜進樣。

考慮到不同復溶液試劑對提取率的影響，分別使用乙腈、乙酸乙酯、正己烷進行最終定容，結果發現正己烷效果最佳，因此最終復溶液選用正己烷。

1.3 儀器條件

1.3.1 色譜條件

色 譜 柱：安 捷 倫HP-5MS 毛 細 管 柱（30 m×300 μm，0.25 μm）；柱箱升溫程序：初始柱溫50 ℃，保持1.5 min 后以25 ℃·min-1上升至180 ℃，后以10 ℃·min-1上升至300 ℃，保持6 min；進樣口溫度：300 ℃；載氣：N2；恒流模式；進樣量：1.0 μL。

考慮到進樣方式對出峰時間的影響，本研究對比分析了不分流進樣、不分流脈沖進樣兩種進樣模式。結果顯示，不分流脈沖進樣峰形更加尖銳，效果更好，相較于不分流進樣出峰時間提前，可以更加快速地完成檢測，所以本研究最終選擇不分流脈沖進樣模式。

1.3.2 質譜條件

電離子源（EI 源），采用選擇反應檢測模式（SRM模式），傳輸線溫度300 ℃。保留時間、定量離子對、定性離子對參數見表1。

表1 7 種農藥的質譜優化參數

2 結果與分析

2.1 標準曲線

使用陰性基質的正己烷溶液將中間液配制成5 ～500 ng·mL-1的標準曲線，以峰面積（Y）為縱坐標，以濃度（X）為橫坐標，繪制標準曲線。結果顯示，7 種農藥在5 ～500 ng·mL-1濃度內線性良好，相關系數（R2）均大于0.990，檢出限為1.0 ng·mL-1，定量限為3.0 ng·mL-1，詳見表2。

表2 7 種農藥的線性方程、線性范圍、相關系數、檢出限及定量限

2.2 回收率與精密度

為評價該方法的有效性，測定了回收率和日內精密度參數。將高（200 ng·mL-1）、中（100 ng·mL-1）、低（50 ng·mL-1）3 個濃度的標準溶液加入空白陰性樣品，回收率為83.20%～105.92%，日間穩定性（n=3）為3.9%～11.5%，詳見表3。結果表明，該方法準確、穩定，適用于常規分析。

表3 7 種農藥的加標回收率及相對標準偏差（n=3）

3 結論

本文采用QuEChERS-氣相色譜-串聯質譜儀法建立了一種同時測定蔬菜中7 種農藥殘留的檢測方法，選擇1.0%乙酸-乙腈為提取溶劑，經QuEChERS 前處理凈化，取2 mL 上清液氮氣吹干，正己烷復溶，不分流脈沖模式進樣。方法驗證結果顯示，方法線性關系良好，快速、便捷，具有較高的靈敏度、選擇性和準確性，易于實現高通量處理，適用于蔬菜中農藥殘留含量的分析。此外，該方法還有較強的擴展性，對于多種基質中農藥殘留的檢測都具有可借鑒性，可進一步開展新的研究。