反復(fù)呼吸道感染患兒細(xì)胞因子及T 淋巴細(xì)胞亞群水平的變化及臨床意義

何其瑞，金玉林，丁興華，徐陽(yáng)

（河南省信陽(yáng)市中心醫(yī)院輸血科，河南 信陽(yáng) 464000）

小兒反復(fù)呼吸道感染（RRI）指在單位年限內(nèi)，呼吸道感染發(fā)生頻次超出正常次數(shù)（7 次以上或下呼吸道感染3 次以上）的呼吸道疾病[1]。空氣污染、環(huán)境變化、嬰幼兒期喂養(yǎng)不當(dāng)以及患兒體質(zhì)等因素，均可誘發(fā)該疾病。在兒科呼吸道疾病中，RRI 的發(fā)病率高達(dá)50%，病程遷延難愈，影響后患兒生長(zhǎng)發(fā)育[2]。小兒由于呼吸系統(tǒng)發(fā)育尚未完善，其鼻腔相對(duì)成年人短且狹窄，故而更易發(fā)生微生物感染；除此之外，小兒免疫細(xì)胞功能與氣道體液免疫功能相對(duì)薄弱，如T 淋巴細(xì)胞含量少且功能差，氣道分泌物中含可抗病原菌的物質(zhì)（如干擾素、補(bǔ)體等）少，使得小兒成為RRI 的主要發(fā)病人群[3-4]。為探究反復(fù)呼吸道感染患兒細(xì)胞因子及T 淋巴細(xì)胞亞群水平的變化及臨床意義，本次研究選擇2020年4 月至2021 年4 月期間我院收治的反復(fù)呼吸道感染患兒40 例及正常健康兒童40 例作為研究對(duì)象，詳細(xì)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2020 年4 月至2021 年4 月期間我院收治的反復(fù)呼吸道感染患兒40 例及正常健康兒童40 例作為研究對(duì)象，分別作為反復(fù)呼吸道感染組（n=40）、對(duì)照組（n=40）。對(duì)照組男性23例，女性17 例；年齡1～13 歲，平均（5.84±1.46）歲。反復(fù)呼吸道感染組男性22 例，女性18 例；年齡1～12歲，平均（5.94±1.53）歲。兩組一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），有可比性。

1.2 納入標(biāo)準(zhǔn)與排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）符合《諸福棠實(shí)用兒科學(xué)(第7 版)》[5]中關(guān)于RRI 的診斷標(biāo)準(zhǔn)；（2）年齡≤14 歲；（3）發(fā)病頻率為0～2 歲，1 年呼吸道感染≥7 次或支氣管炎＞3 次，2 歲以上至5歲，1 年呼吸感染≥6 次或支氣管炎＞2 次，5 歲以上至14 歲，1 年上呼吸道感染≥5 次或支氣管炎＞2 次。

排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）原發(fā)性系統(tǒng)缺陷、先天性呼吸系統(tǒng)畸形因素造成的呼吸道感染；（2）合并嚴(yán)重貧血、糖尿病、結(jié)核或明顯臟器功能障礙；（3）入組前7 d 曾使用免疫制劑、益生菌或維生素等可能對(duì)研究結(jié)果產(chǎn)生影響患兒。

1.3 方法

1.3.1 治療方法 入組患兒均采用維生素D 滴劑[國(guó)藥控股星鯊制藥（廈門(mén)）有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H35021450]治療，800 U/次，1 次/d。在此基礎(chǔ)上，給予對(duì)照組患兒布拉氏酵母菌散（法國(guó)百科達(dá)制藥廠，批準(zhǔn)文號(hào)S20100086）口服治療，0.25 g/次，2次/d，連續(xù)治療20 d、停藥10 d 為一療程，共治療2個(gè)療程。

1.3.2 檢測(cè)方法 取患兒靜脈血5 mL，經(jīng)3 000 r/min分離血清后將其置于-4℃冰箱保存待檢。采用武漢默沙克生物科技有限公司生產(chǎn)的相關(guān)試劑盒，以免疫比濁法測(cè)定患兒免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）；采用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定血清25 羥基纖維素D3 [25（OH）D3]，采用BD FACSCanto 做干擾素γ（IFN-γ），白細(xì)胞介素-4（IL-4）水平和患兒T 淋巴細(xì)胞亞群（CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+）進(jìn)行檢測(cè)[5-9]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 20.0 工具進(jìn)行處理，計(jì)量資料（比如[25（OH）D3]、IFN-γ 等指標(biāo)）用（）表示（組間對(duì)比采用t 檢驗(yàn)），P＜0.05 為對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 免疫球蛋白對(duì)比 反復(fù)呼吸道感染組治療前、治療后與對(duì)照組的IgG、lgA、IgM 水平結(jié)果，見(jiàn)表1。

表1 兩組治療前后免疫球蛋白對(duì)比（）

表1 兩組治療前后免疫球蛋白對(duì)比（）

注：與治療前對(duì)比，*P＜0.05；與對(duì)照組對(duì)比，#P＜0.05。

2.2 兩組25（OH）D3、IFN-γ、IL-4 對(duì)比 反復(fù)呼吸道感染組治療前25（OH）D3、IFN-γ 水平較對(duì)照組低，IL-4 水平較對(duì)照組高（P＜0.05），治療后，反復(fù)呼吸感染組25（OH）D3、IFN-γ 水平顯著提高，IL-4水平顯著降低（P＜0.05），治療后25（OH）D3、IFN-γ、IL-4 與對(duì)照組對(duì)比無(wú)明顯差異（P＞0.05），見(jiàn)表2。

表2 兩組25（OH）D3、IFN-γ、IL-4 對(duì)比（）

表2 兩組25（OH）D3、IFN-γ、IL-4 對(duì)比（）

2.3 兩組T 淋巴細(xì)胞亞群水平對(duì)比 反復(fù)呼吸道感染組治療前CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平較對(duì)照組低，CD8+水平較對(duì)照組高（P＜0.05），治療后，反復(fù)呼吸感染組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平顯著提高，CD8+水平顯著降低（P＜0.05），治療后T 淋巴細(xì)胞亞群水平與對(duì)照組對(duì)比，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05），見(jiàn)表3及圖1。

圖1 兩組T 淋巴細(xì)胞亞群水平

表3 兩組T 淋巴細(xì)胞亞群水平

3 討論

RRI 臨床主要表現(xiàn)為咳嗽咳痰、流鼻涕、乏力等，與一般呼吸道感染相似，但由于該病反復(fù)發(fā)作，病程遷徙，不及時(shí)治療容易誘發(fā)其他系統(tǒng)疾病[10]。小兒由于呼吸系統(tǒng)發(fā)育尚未完善，其鼻腔相對(duì)成年人短且狹窄，故而更易發(fā)生微生物感染[11-12]。除此之外，小兒免疫細(xì)胞功能與氣道體液免疫功能相對(duì)薄弱，如T 淋巴細(xì)胞含量少且功能差，氣道分泌物中含可抗病原菌的物質(zhì)（如干擾素、補(bǔ)體等）少，使得小兒成為RRI 的主要發(fā)病人群[13]。

IgA、IgG、IgM 是體液免疫的主要組成部分，是反映體液免疫功能的主要指標(biāo)。25（OH）D3 有調(diào)節(jié)細(xì)胞免疫的作用，IFN-γ、IL-4 為反映炎性因子的指標(biāo)，其中IFN-γ 能夠抑制IL-4 水平，減輕炎性癥狀；T 淋巴細(xì)胞亞群則是反映細(xì)胞免疫功能的指標(biāo)[14]。本次研究中，反復(fù)呼吸道感染組治療前，IgG、IgA、IgM、25（OH）D3、IFN-γ 水平較對(duì)照組低（P＜0.05），IL-4 水平較對(duì)照組高，治療后，反復(fù)呼吸感染組IgG、IgA、IgM、25(OH)D3、IFN-γ 顯著提高，IL-4水平顯著降低（P＜0.05），治療后與對(duì)照組對(duì)比，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。

T 淋巴細(xì)胞亦可簡(jiǎn)稱為T(mén) 細(xì)胞，主要來(lái)源于骨髓的淋巴干細(xì)胞，并且在胸腺中發(fā)育并成熟[15]。T細(xì)胞的異質(zhì)性較高，根據(jù)T 細(xì)胞表面標(biāo)志物以及分化抗原的差異，分為不同的亞群，主要包括CD4和CD8 T 淋巴細(xì)胞二個(gè)亞群，生理狀態(tài)下，T 細(xì)胞的數(shù)目和亞群的比例維持在恒定水平，其中CD4占T 淋巴細(xì)胞的60%～65%，CD8 占30%～35%，CD4 和CD8 的比例在正常機(jī)體中處于穩(wěn)定狀態(tài)，各個(gè)亞群之間既相互協(xié)作又相互制約，當(dāng)機(jī)體免疫狀態(tài)發(fā)生改變時(shí)，二者的比值隨之變化[16-17]。T 細(xì)胞具有介導(dǎo)細(xì)胞適應(yīng)性免疫作用，是發(fā)揮細(xì)胞免疫的主要細(xì)胞。成熟的T 細(xì)胞中只能檢測(cè)到CD4或CD8 分子的表達(dá)，而這兩種分子的主要作用是在T 細(xì)胞抗體對(duì)抗原進(jìn)行識(shí)別或者對(duì)T 細(xì)胞活化信號(hào)進(jìn)行傳導(dǎo)時(shí)，起輔助作用[8]。CD4 主要分布在T細(xì)胞的輔助細(xì)胞誘導(dǎo)亞群和抑制細(xì)胞誘導(dǎo)亞群表面，CD4 的結(jié)構(gòu)是一條單鏈的跨膜蛋白，在其遠(yuǎn)膜端的2 個(gè)結(jié)構(gòu)域結(jié)合主要組織相容性抗原Ⅱ的β2的結(jié)構(gòu)域，對(duì)T 細(xì)胞轉(zhuǎn)化為效應(yīng)細(xì)胞和B 細(xì)胞生成抗體具有輔助作用。CD8 主要分布抑制性T 淋巴細(xì)胞和殺傷性T 淋巴細(xì)胞表面，CD8 是由兩條肽鏈組成的，即組成的異二聚體（CD8α 和β）的細(xì)胞外區(qū)各包含一個(gè)結(jié)構(gòu)域，該結(jié)構(gòu)與能夠結(jié)合MHC I 類分子的α3 功能區(qū)，進(jìn)而使信號(hào)發(fā)生轉(zhuǎn)導(dǎo)。CD8 還可直接將靶細(xì)胞裂解，或者將其殺死，主要作用機(jī)制由穿孔素、顆粒酶、淋巴毒素相互作用完成的，CD8 通過(guò)作用Fasl 促進(jìn)靶細(xì)胞的凋亡[19]。CD3 屬于T 細(xì)胞的另一個(gè)亞群，具有5 種肽鏈的跨膜蛋白，表達(dá)于所有T 細(xì)胞表面。CD3 主要與TCR 相結(jié)合形成復(fù)合物，CD3 的作用是將TCR 通過(guò)對(duì)抗原所產(chǎn)生的活化信號(hào)進(jìn)行識(shí)別，活化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)至T 細(xì)胞中[20]。CD3 是所有T 細(xì)胞的表面標(biāo)志物，因此CD3 的數(shù)值可反應(yīng)T 細(xì)胞狀態(tài)。通過(guò)對(duì)CD3、CD4、CD8 進(jìn)行研究，了解T 細(xì)胞的反應(yīng)情況。反復(fù)呼吸道感染組治療前CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平較對(duì)照組低，CD8+水平較對(duì)照組高（P＜0.05），治療后，反復(fù)呼吸道感染組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平顯著提高，CD8+水平顯著降低（P＜0.05），治療后T 淋巴細(xì)胞亞群水平與對(duì)照組對(duì)比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

綜上所述，RRI 患兒細(xì)胞因子及T 淋巴細(xì)胞亞群存在異常，可用于評(píng)估病情，而且有利于評(píng)估治療效果。