飼料浮萍水平對黃金錦鯉形體及體色的影響

張植元， 范 澤， 胡佳祥， 王雄延， 魏 東 ， 錢 靜， 陳 嬌

（1.四川水利職業(yè)技術(shù)學(xué)院，四川 成都 611200；2.中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黑龍江水產(chǎn)研究所，黑龍江省水生動物病害與免疫重點實驗室，黑龍江 哈爾濱 150070；3.天津農(nóng)學(xué)院水產(chǎn)學(xué)院，天津市水產(chǎn)生態(tài)及養(yǎng)殖重點實驗室，天津 300384）

浮萍，是浮萍科水面漂浮性植物，其廣泛分布于湖泊、 河流和稻田等， 屬于水體污染與毒理檢測、可進行水體修復(fù)的水生植物類群（Sharma 等，2019）。從營養(yǎng)角度來看，浮萍蛋白質(zhì)含量豐富，同時其氨基酸組成理想，與飼料原料豆粕相當(dāng)，因此可成為良好的飼料、食品及生物質(zhì)基質(zhì)資源（楊晶晶等，2021；Sharma 等，2019；Appenroth 等，2018；Ma 等，2018；張植元等；2017）。 目前，浮萍的飼用價值已經(jīng)得到廣泛關(guān)注， 其作為飼料原料或配料飼養(yǎng)豬、 畜禽及魚類均能夠有效促進飼養(yǎng)對象的生長 （張植元等，2017； 李凱年，2015；Cruz-Velásquez 等，2014；許萬祥，1994）。 除此之外，浮萍中豐富的葉黃素與酪氨酸也有助于魚體體色的改善， 并會影響體內(nèi)黑色素的沉積 （張植元等，2017；黃斌等，2011）。

錦鯉體型健碩、體色豐富多彩、易飼養(yǎng)的特性使其倍受觀賞魚愛好者的追崇（劉飛等，2007）。而黃金錦鯉獨特的體色使其從諸多錦鯉品種中脫穎而出。我國對錦鯉已有不少研究，但主要集中在生物學(xué)特性、人工繁育選育、飼養(yǎng)技術(shù)和疾病防治等方面（胡民強，2010），關(guān)于飼料原料對其影響的研究較少， 而將浮萍作為一種原料添加到觀賞魚飼料中的研究至今鮮見報道。 錦鯉體自身無法合成類胡蘿卜素，體表著色需要從外界攝入，因此必須通過飼料中著色劑的添加來解決這一問題（冷向軍和李小勤，2006）。因此，介于浮萍豐富的類胡蘿卜素含量， 本試驗通過研究不同添加水平的浮萍飼料對黃金錦鯉形體及體色的影響， 以期為浮萍在錦鯉飼料中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗用魚與飼養(yǎng)管理 黃金錦鯉魚種來自天津市藍科水產(chǎn)有限公司， 飼養(yǎng)階段在天津農(nóng)學(xué)院循環(huán)水實驗室進行。 試驗分6 組， 每組3 個重復(fù)，養(yǎng)于18 個循環(huán)水族箱，每個水族箱喂養(yǎng)30 尾魚。 試驗魚馴化1 周后，選取體格健壯，規(guī)格相仿[（52.99±1.95）g] 的錦鯉， 隨機分入18 個水族箱中，水溫控制在（29±1.1）℃，pH 為7.8±0.2，投餌率3%，每日9:00 和15:30 投喂，持續(xù)養(yǎng)殖8 周。

1.2 試驗飼料 室外（天津市西青畜牧局示范基地門口河溝中）采集鮮浮萍，清理曬干后進入粉碎機粉碎制成浮萍粉 （粗蛋白質(zhì)：34.6%； 粗脂肪：6.7%；粗纖維：5.0%），以魚粉、全蝦粉、豆粕和棉籽粕作為蛋白源，配制浮萍（干品）替代菜籽粕水平分別為0%、20%、40%、60%、80%、100% 的6種等蛋白（38.6%）飼料，分別記為D1、D2、D3、D4、D5、D6，其組成與營養(yǎng)水平見表1。 各飼料原料均通過粉碎機粉碎過60 目網(wǎng)篩，混合均勻后，使用江蘇牧羊集團牧羊MUZLM V4 型飼料制粒機制成直徑為1.00 mm 的沉性顆粒飼料。

表1 魚飼料組成和營養(yǎng)水平（干物質(zhì)基礎(chǔ)）

1.3 樣本采集 飼養(yǎng)結(jié)束后，各試驗組錦鯉進行禁食2 d 的處理，之后每重復(fù)組選20 尾魚作為樣品，測量體重、體長、體高，并用色彩色差儀（CR-400 型，日本柯尼卡美能達集團）測定體表相關(guān)數(shù)值。 取皮膚、側(cè)線鱗片及背鰭后將其解剖，然后轉(zhuǎn)入-80 ℃低溫冰箱中保存，待測。

1.4 形體指標(biāo)的測定 形體指標(biāo)計算公式如下：

式中：Wt 為終末魚體質(zhì)量，g；Wn 為內(nèi)臟重，g；t 為養(yǎng)殖周期，d；L 為試驗?zāi)~體長，cm；T 為試驗?zāi)~體高，cm。

1.5 體色指標(biāo)測定

1.5.1 體表色差值的測定 試驗開始、 第4 周和結(jié)束時，用色彩色差儀測定魚體白度值（L*）、紅度值（a*）、黃度值（b*）、總色差（△E*）。

1.5.2 總類胡蘿卜素的測定 參考陳曉明等（2004）的研究方法并略做修改：用電子分析天平準(zhǔn)確分別稱取皮膚、胸鰭、側(cè)線鱗片0.1 g，用丙酮定容至5 mL，放入超聲波清洗機低溫超聲波振蕩45 min 后取出，以4000 r/min 離心10 min，放入冰箱（4 ℃）中靜置24 h。 將所得的色素萃取液分別置于1 cm 比色皿中，以丙酮為空白對照管（比色皿加蓋以防止丙酮揮發(fā)， 影響比色效果），用Thermo Spectronic UVmini-1240 型紫外分光光度計進行掃描，找出最大吸收峰處的波長（448 nm），在該波長下測定各組色素萃取液的吸光度值。 總類胡蘿卜素含量計算公式如下：

式中：A 為吸光度值；K 為常數(shù)（104）；V為提取液體積，mL；E 為摩爾消光系數(shù)（2500）；G 為樣品質(zhì)量，g。

1.6 數(shù)據(jù)處理分析 數(shù)據(jù)均以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示，采用SPSS 18.0 對所得數(shù)據(jù)進行單因素方差分析（one-way ANOVA）， 若差異達到顯著水平， 則采用Duncan’s 法進行多重比較，顯著性水平為P＜0.05。

2 結(jié)果

2.1 飼料浮萍水平對黃金錦鯉形體指標(biāo)的影響由表2 可知，各組錦鯉體重/體長（L/T）與肥滿度（CF）均表現(xiàn)為升高的趨勢，且均以D6 組與D5 組最高，體重/體長（L/T）指標(biāo)相較于最低組D2 提高15.51% ～17.25%（P＜0.05），肥滿度（CF）相較于最低組D1 顯著提高17.14% ～20.82% （P＜0.05）；體長/體高（L/T）表現(xiàn)為下降的趨勢，D6 組最低，相比D1 組顯著降低6.67%（P＜0.05）；內(nèi)臟指數(shù)（VIS）整體表現(xiàn)為下降趨勢，其中D5 組與D6 組顯著低于D2 組， 降低16.18%～18.04%（P＜0.05）；空殼率（DOR）表現(xiàn)為上升的趨勢，且D6 組與D5 組差異不顯著（P＞0.05），D6 組顯著高于對照組D1 組，顯著提高1.38%（P＜0.05）。

表2 飼料浮萍水平對黃金錦鯉形體指標(biāo)的影響

2.2 飼料浮萍水平對黃金錦鯉體色的影響

2.2.1 飼料浮萍水平對黃金錦鯉體表色差值的影響 由表3 ～表6 可知， 同一飼料組投喂的黃金錦鯉在3 個不同階段的各色差值均出現(xiàn)變化：白度值（L*）均隨投喂時間的增長呈現(xiàn)下降的趨勢，整體來看下降9.35% ～16.23%，且初始白度值（L*）顯著高于其他時期（P＜0.05）；D6與D2 組紅度值（a*）在三個階段差異均不顯著（P＞0.05）， 而其他各組大致呈下降的趨勢；據(jù)黃度值（b*）結(jié)果顯示，D6、D3 與D4 組在三個階段存在顯著差異（P＜0.05），均呈現(xiàn)出先上升后下降的趨勢；各組的總色差（△E*）在三個階段均呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢，且中期（4 周）階段顯著大于其他兩個階段，提高14.00% ～14.52%（P＜0.05）。

表4 飼料紫背浮萍水平對黃金錦鯉紅度值（a＊）的影響

表5 飼料紫背浮萍水平對黃金錦鯉黃度值（b＊）的影響

表6 飼料紫背浮萍水平對黃金錦鯉總色差（△E＊）的影響

同一階段的不同飼料組投喂的黃金錦鯉各色差值也都出現(xiàn)了變化：末期（8 周）階段，白度值（L*）以D6 與D5 組表現(xiàn)最高，且顯著高于D2 組，相較于D2 組提高2.83%～6.31%（P＜0.05）， 其他兩個階段各組差異不顯著（P＞0.05）；中期（4 周）與末期（8 周）兩個階段，紅度值（a*）均隨著飼料紫背浮萍的添加量提高呈現(xiàn)先下降后上升的趨勢， 且D6 組顯著高于D3 組，提高83.33%～89.36%（P＜0.05）；中期（4 周）與末期（8 周）兩個階段黃度值（b*）大致呈現(xiàn)上升趨勢， 且D5 組與D6 組顯著高于對照組D1 組， 相較于D1 組提高7.40% ～36.59%（P＜0.05）；中期（4 周）與末期（8 周）兩個階段各組的總色差（△E*）均呈現(xiàn)上升的趨勢，D6 組顯著高于對照組D1 組，提高6.27%～6.86%（P＜0.05）。

2.2.2 飼料浮萍水平對黃金錦鯉體表總類胡蘿卜素的影響 由表7 可知， 同一飼料組投喂的黃金錦鯉在不同組織間總類胡蘿卜素含量大致均呈現(xiàn)相同的差異，肌肉中總類胡蘿卜素含量顯著低于其他各組（P＜0.05），而D1、D2 組與D3 組其他組織間類胡蘿卜素含量差異不顯著（P＞0.05），其他三組各組織總類胡蘿卜素含量均為胸鰭＞皮膚＞鱗片＞肌肉。而同一組織中，各飼料組投喂黃金錦鯉除肌肉的總類胡蘿卜素含量無顯著差異（P＞0.05），其他各組織中均隨著紫背浮萍添加量的提高呈現(xiàn)上升的趨勢， 且D6 組顯著高于對照組D1 組，相較于D1 組提高50.00% ～587.27%（P＜0.05）。

表7 飼料紫背浮萍水平對黃金錦鯉體表總類胡蘿卜素的影響mg/kg

3 討論

錦鯉的鑒賞主要體現(xiàn)在形體健碩與色澤鮮艷兩個方面。 錦鯉的成長會經(jīng)歷幼鯉、若鯉、成鯉與壯鯉等多個時期， 每個生長時期都要進行定期的專業(yè)化挑選， 而體型的美觀與否是挑選的第一指標(biāo)也是最重要的參照指標(biāo)（朱力和普歌，2006）。王廣軍（2000）在錦鯉的鑒賞質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中提出，錦鯉體長與體高的比例為2.6 ～3.0:1 時相對理想，本試驗結(jié)果顯示， 六組不同紫背浮萍添加水平飼料投喂下的錦鯉， 體長與體高的比例均大致在該范圍內(nèi)，且D4 組與D6 組表現(xiàn)最為理想，結(jié)合空殼率與內(nèi)臟指數(shù)指標(biāo)表明， 紫背浮萍添加量的提高使錦鯉對于飼料的吸收更充分， 在水中的活動量增加，最終表現(xiàn)出更為美觀的體型。

錦鯉被業(yè)界稱之為水中“活寶石”，其豐富多彩的體色總是會讓鑒賞者稱贊與陶醉。 幾乎所有品種的錦鯉（寫類與別甲類除外）體表著色均需從外界攝入類胡蘿卜素， 因此必須通過飼料中著色劑的添加來解決這一問題。 白東清等（2010）通過對紅白錦鯉投喂含有不同水平β-胡蘿卜素的飼料試驗表明，其添加量為1.0 ～2.5 g/kg 時對紅白錦鯉增色效果最好；李建光等（2009）試驗結(jié)果表明， 飼料中添加辣椒紅素與胡蘿卜素對錦鯉均起到了良好的增色效果。 孫金輝等（2016）在飼料中添加紅辣椒粉對錦鯉體色影響的研究中提到，體表的色差值與類胡蘿卜素含量有一定的相關(guān)性。本試驗結(jié)果顯示， 黃金錦鯉體表組織色素含量高低順序為：鰭條＞皮膚＞鱗片＞肌肉，而隨著紫背浮萍添加量的提高， 黃金錦鯉的體表各組織中總類胡蘿卜素的含量相應(yīng)地升高，且黃度值（b*）也有明顯的提高， 說明紫背浮萍中含量豐富的葉黃素被黃金錦鯉高度吸收。但值得注意的是，養(yǎng)殖8 周后，各組黃金錦鯉體表白度值（L*）大致均在下降，且黃度值（b*）在養(yǎng)殖第4 周時表現(xiàn)最高，之后也呈下降趨勢， 這可能是由于室內(nèi)養(yǎng)殖環(huán)境不同于室外養(yǎng)殖采光度好所導(dǎo)致的結(jié)果。

綜上， 在形體指標(biāo)方面， 綜合體長/體高（L/T）、體重/體長（W/L）及肥滿度（CF）等結(jié)果表明，紫背浮萍作為植物蛋白源替代菜籽粕促使黃金錦鯉的形體向正常錦鯉鑒賞要求情況下發(fā)展，且D6組效果最顯著；在體色方面，綜合體表色差值與總類胡蘿卜素含量結(jié)果發(fā)現(xiàn)，養(yǎng)殖8 周后，黃金錦鯉的白度值（L*）呈下降的趨勢，黃度值（b*）呈上升的趨勢， 促使黃金錦鯉體表的色彩往最美的方向發(fā)展， 且各組織總類胡蘿卜素含量隨紫背浮萍添加量提高呈上升趨勢，D6 組顯著高于其他組。 因此，飼料浮萍添加水平為14%時，更有利于黃金錦鯉體型趨于美觀，達到體表增色的效果。