L（934）正交試驗法優選3 種靜脈用難溶性抗菌藥物調配方法*

伊迪熱斯江·艾力，劉玉花，艾則孜江·艾爾肯，周 靜，宋 涵

（新疆醫科大學第一附屬醫院，新疆 烏魯木齊 830011）

對靜脈用藥調配中心（PIVAS）進行全面質量管理，特別是調配環節的質量控制，是規避調配風險、提高藥品質量、確保患者靜脈用藥安全的重要保證［1-2］。不溶性微粒是指在藥物生產、使用過程中經各種途徑引入的微小顆粒，粒徑介于1～50 μm，為肉眼不可見、易動性、非代謝性的粒子［3］，是《中國藥典（一部）》《美國藥典》《英國藥典》《日本藥典》中均明確規定的輸液常規檢查項目。不溶性微粒能引起炎性反應、肉芽腫、血管栓塞、熱原反應，甚至可能引起腫瘤［4］。研究表明，難溶性粉針劑在調配過程中易出現不溶性微粒數超出藥典標準的現象［5-6］。我院PIVAS 藥師在調配中發現，哌拉西林他唑巴坦鈉、頭孢呋辛鈉、頭孢哌酮鈉舒巴坦鈉3 種粉針劑溶解速率慢，初溶時間長，藥品說明書中無詳細的調配過程描述，尚無溶解完全的統一判斷標準，缺乏統一、標準的調配操作規程，導致調配結果參差不齊。為此，本研究中采用L9（34）正交試驗法優選上述3 種靜脈用難溶性抗菌藥物的調配方法，為PIVAS 調配環節的標準化管理提供參考。現報道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

BSC-ⅡA2型生物安全柜，SW-CJ-1B型水平層流臺，均購自蘇凈集團蘇州安泰空氣技術有限公司；TL - 2000 型振蕩器（泉州鯉城區東壩實驗儀器廠）；30 mL 一次性使用無菌溶藥注射器（山東威高集團醫用高分子制品股份有限公司）；0.45 μm 微孔濾膜（上海市新亞凈化器件廠）；SGO-PH200A 型生物顯微鏡（深圳市深視光谷光學儀器有限公司）。

1.2 試藥

注射用哌拉西林鈉他唑巴坦鈉（商品名特治星，Hanhui Pharmaceuticals Co，Ltd，批號為22024121，規格為每支4.5 g）；注射用頭孢呋辛鈉（山東潤澤制藥有限公司，批號為5220400306，規格為每支1.5 g）；注射用頭孢哌酮鈉舒巴坦鈉（商品名舒普深，輝瑞制藥有限公司，批號為FR2228，規格為每支1.5 g）；5%葡萄糖注射液（新疆華世丹藥業股份有限公司，批號為211016115）；滅菌注射用水（批號為22041004B），0.9%氯化鈉注射液（批號為G122052807），均購自四川科倫藥業股份有限公司。

2 方法與結果

2.1 不溶性微粒測定與計數

溶液調配均由專業藥學人員按無菌操作，在百級潔凈條件下對靜脈用藥進行混合調配。調配后，按2020年版《中國藥典（四部）》通則0903 不溶性微粒檢查法，用注射器抽取標示裝量為100 mL的藥液25 mL，沿濾器內壁緩慢注入經預處理的濾器（濾膜直徑25 mm）中。靜置1 min，緩慢抽濾至濾膜近干，再用微粒檢查用水25 mL，沿濾器內壁緩慢注入，洗滌，并抽濾至濾膜近干，用平頭鑷子將濾膜移至平皿上，微啟蓋子，使濾膜適當干燥，閉合平皿，置顯微鏡載物臺上，調好入射光，放大100 倍進行顯微測量，調節顯微鏡至濾膜格柵清晰，移動坐標軸，測定有效濾過面積中粒徑大于10 μm的微粒數，計算3 個供試品測定結果的平均值。根據顯微計數法統計難溶性抗菌藥物溶解后不溶性微粒的數量，在顯微鏡下（放大100 倍）觀察藥物溶解不完全時的觀測結果見圖1 A，溶解完全時的觀測結果見圖1 B。

A.溶解不完全時 B.溶解完全時圖1 頭孢呋辛鈉顯微鏡觀測結果（×100）A.When cefuroxime sodium is incompletely dissolved B.When cefuroxime sodium is completely dissolvedFig.1 Microscopic observation results of cefuroxime sodium（×100）

2.2 調配方法優選

正交試驗設計與結果：根據3種難溶性抗菌藥物的藥品說明書確定各自的調配方法，即先將藥物與一定體積的初溶溶劑混合，振搖，再加入溶劑至醫囑/處方規定的總量。據以往工作經驗可知，振蕩時間（因素A）、初溶溶劑體積（因素B）、溶劑品種（因素C）是影響藥物調配效果的主要因素，以復溶后藥液不溶性微粒數量為考察指標，并根據每種藥品的溶解特性、西林瓶體積，同時兼顧調配效率，確定每種藥品正交試驗中各因素的水平值。L9（34）正交試驗因素與水平見表1，試驗設計與結果見表2。可見，各因素的影響大小依次為振蕩時間＞初溶溶劑體積＞溶劑品種；哌拉西林鈉他唑巴坦鈉、頭孢呋辛鈉、頭孢哌酮鈉舒巴坦鈉的優選調配條件分別為A2B3C2，A2B2C2，A2B3C2。

表1 L9（34）正交試驗因素與水平Tab.1 Factors and levels of the L9（34）orthogonal test

表2 L9（34）正交試驗設計與結果Tab.2 Design and results of the L9（34）orthogonal test

Shapiro-Wilk 正態性檢驗：采用SPSS 19.0 統計學軟件進行正態性檢驗，P＜0.05 為差異有統計學意義。由表3 可知，3 種藥品每組樣本的檢驗結果均無顯著差異（P ＞0.05），表明接受原假設，3種藥品每組樣本均具有正態性特質。

表3 Shapiro-Wilk正態性檢驗結果（n=3）Tab.3 Results of the Shapiro - Wilk normality test（n=3）

方差分析：采用SPSS 19.0統計學軟件分析，P＜0.05為差異有統計學意義。由表4 可知，溶劑品種對3 種藥品的不溶性微粒數量均無顯著影響（P＞0.05）。哌拉西林鈉他唑巴坦鈉的振蕩時間和初溶溶劑體積的水平變化對結果均有顯著影響（P＞0.05），結合直觀分析結果可確定調配方法，即采用22.5 mL溶劑（滅菌注射用水、0.9%氯化鈉注射液、5%葡萄糖注射液）預溶后，置振蕩器上振蕩120 s，稀釋，調配。頭孢呋辛鈉的振蕩時間和初溶溶劑體積的水平變化對結果均有顯著影響（P＜0.05），結合直觀分析結果可確定調配方法，即采用12.5 mL溶劑（滅菌注射用水、0.9%氯化鈉注射液、5%葡萄糖注射液）預溶后，置振蕩器上振蕩40 s，稀釋，調配。頭孢哌酮鈉舒巴坦鈉僅振蕩時間水平變化對結果有顯著影響（P＜0.05），結合直觀分析結果可確定調配方法，即采用10.0 mL 溶劑（滅菌注射用水、0.9%氯化鈉注射液、5%葡萄糖注射液）預溶后，置振蕩器上振蕩40 s，稀釋，調配。

表4 方差分析結果Tab.4 Results of the ANOVA

2.3 驗證試驗

以0.9%氯化鈉注射液為溶劑，按優選的調配方法進行驗證試驗，結果3種難溶性抗菌藥物中不溶性微粒數量均顯著減少（P＜0.05），表明優選的調配方法穩定、可行。詳見表5。

表5 優化前后3種難溶性抗菌藥物中不溶性微粒數量比較（±s，粒）Tab.5 Comparison of the number of insoluble particles of three intravenous insoluble antibacterial drugs before and after optimization（±s，n）

表5 優化前后3種難溶性抗菌藥物中不溶性微粒數量比較（±s，粒）Tab.5 Comparison of the number of insoluble particles of three intravenous insoluble antibacterial drugs before and after optimization（±s，n）

時間優化前優化后t值P值a b c 18.60±0.50 3.60±0.21 37.070 0.001 15.31±0.67 3.11±0.24 25.570 0.002 16.88±0.66 3.91±0.30 53.970 0.000

3 討論

3.1 溶劑量選擇

由前期單因素試驗結果可知，溶解難溶性藥物的初溶溶劑量少，導致溶解時間延長，且溶解不完全；溶劑量多，增加抽吸力度和調配難度。對于較難溶解的哌拉西林鈉他唑巴坦鈉，為防止藥物外濺，溶解藥物時所抽取藥液以不超過注射器的3/4為宜，我院無菌操作常用注射器量程一般為30 mL，故選擇最大水平點為22.5 mL。

3.2 pH 值對藥物溶解性的影響

頭孢哌酮鈉的pH 值應為4.5～6.5［7］，輸液中加入頭孢哌酮鈉后pH 值為4.0 左右［8］，表明溶液中存在游離酸。而頭孢哌酮游離酸在水中極微溶，故溶液易呈混懸狀。當不同pH 值的輸液與頭孢哌酮鈉混合，澄清或混濁一般以pH 值4.08為限，混濁的原因可能為混合溶液pH 值小于4.08時部分頭孢哌酮游離。但本研究結果顯示，滅菌注射用水、0.9%氯化鈉注射液、5%葡萄糖注射液均可用于調配頭孢哌酮鈉舒巴坦鈉，其原因可能為我院采用的溶劑對調配液的pH 影響不顯著，未明顯影響頭孢哌酮鈉的溶解行為，同時提示溶劑中離子強度對主藥的溶解行為影響較小。

3.3 藥品規格、藥物溶解速率和平衡時間三者的關系

藥物的表觀溶解度會受到藥品粉末過量的影響，這可能是由結晶速率和溶解速率間的競爭所致［9］。平衡溶解度雖不取決于溶液中固體過量的量［10］，但達到飽和的最終速率可能與溶液中固體過量的量成正比，過量越大，飽和速率越快［11］。另外，溶解體積對平衡溶解度的測定結果也有影響，這是由于振搖過程中減小溶劑體系的體積會加快飽和速率，使溶液更快達到平衡［12］。故調配難溶性靜脈用藥品時不可選用過大的初溶溶劑劑量，否則，不僅會降低溶解飽和速率，還會影響調配人員的工作效率。

3.4 研究意義

本研究中通過對混合調配后的成品輸液進行不溶性微粒測定，對我院PIVAS 的難溶性靜脈用藥品的不溶性微粒數量進行嚴格管控，難溶性靜脈用藥品的調配方法可作為規范推廣。其研究意義在于：1）建立了難溶性靜脈用藥品的調配標準，可減少成品輸液中不溶性微粒的含量；2）建立了完善的藥品調配方法，可提高PIVAS 工作效率；3）可嚴格保證靜脈用藥品的質量，提高臨床治療效果。