血清IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α、CRP在兒童IBD早期診斷及活動性評估中的應用研究

段亞群

炎癥性腸病（IBD）是一種非特異性的慢性腸道炎性疾病，包括潰瘍性結腸炎（UC）、克羅恩病（CD），近年兒童IBD 患病人數急劇增長[1-2]。UC 主要損害結腸和直腸，而CD 可損害從口腔到肛門間的任意胃腸道部位，以小腸末端與結腸較為多見[3-4]。IBD 患兒以腹痛、血便、腹瀉等為主要臨床表現，該病發病機制較為復雜，臨床尚未完全明晰，通常認為與遺傳、環境、感染等多種因素聯系緊密。各種引發異常免疫反應的因素均可能造成疾病發生和急性活動，異常的免疫反應會導致免疫系統攻擊消化道內的正常細胞，導致腸黏膜發生炎性改變，持續受損，且慢性炎癥基礎上可能合并急性炎癥，故炎癥反應在IBD 的發生、發展中扮演重要角色[5]。白介素-2（IL-2）、白介素-6（IL-6）、白介素-8（IL-8）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、C 反應蛋白（CRP）均為臨床常見的炎癥因子，但臨床關于其能否用于早期診斷IBD，并對其活動性進行評估尚未形成統一共識。基于此，本研究以2020 年2 月—2023 年2 月江西省兒童醫院收治的108 例IBD 患兒為研究對象，分析IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α、CRP 在此類患兒中的作用，信息如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

將2020 年2 月—2023 年2 月本院收治的108 例IBD 患兒（UC 57 例、CD 51 例）納入觀察組，另將同期于本院行體檢的84 例健康兒童納入對照組。納入標準：觀察組診斷符合文獻[6]《兒童炎癥性腸病診斷和治療專家共識》中相關標準，伴有不同程度的腹瀉、惡心等表現；具有較高的依從性。排除標準：認知障礙，難以進行正常交流；合并全身性感染；凝血功能、免疫系統異常；合并傳染性疾病；嚴重心腦血管疾病；肝腎等臟器功能不全。本研究已報本院醫學倫理委員會審核通過。患兒家屬對本試驗知曉，并自愿簽訂知情同意書。

1.2 方法

標本采集：采集所有受試者的晨起空腹靜脈血3 mL 置于干燥EDTA 抗凝管中，輕輕搖晃抗凝管，靜置20 min 后以3 000 r/min 的速率離心10 min，分離血清和血漿后分裝于1 mL 的冷凍管，置于-4 ℃冰箱保存待檢。檢測方法：以酶聯免疫吸附法測定IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α、CRP。

1.3 觀察指標及判定標準

（1）對照組與觀察組各項血清指標對比。對比兩組IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α、CRP 差 異。（2）UC活動組、UC 不活動組及對照組各項血清指標對比。依據小兒潰瘍性結腸炎活動指數（PUCAI）將UC 患兒分為UC 活動組與UC 不活動組，其中不活動：評分＜10 分；輕度活動：評分≥10 分；中度活動：評分≥30 分；重度活動：評分≥65 分[7]。分析對比三組IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α、CRP 差異。（3）CD 活動組、CD 不活動組及對照組各項血清指標對比。依據小兒克羅恩病活動指數（PCDAI）將CD 患兒分為CD 活動組與CD 不活動組，其中不活動：評分0～10 分；輕度活動：評分11～30 分；中度活動：評分31～60 分；重度活動：評分≥61 分[8]。對比三組IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α、CRP 差異。（4）IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α、CRP 在IBD 患兒中的診斷效能。繪制受試者操作特征（ROC）曲線，分析IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α、CRP 單獨和聯合診斷IBD 患兒的臨床價值。

1.4 統計學處理

選用SPSS 20.0 分析數據。計數資料以率（%）表示，以χ2檢驗；計量資料以（±s）表示，兩組間比較以t 檢驗，多組間比較以方差分析，兩兩比較以LSD 檢驗；繪制ROC 曲線，分析IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α、CRP 檢測診斷IBD 的效能，以曲線下面積（AUC）評估：AUC≤0.5 表明無診斷價值；0.5＜AUC≤0.7 表明診斷價值較低；0.7＜AUC≤0.9 表明診斷價值中等；AUC＞0.9 表明診斷價值較高。以P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 對照組和觀察組一般資料對比

對照組男43 例，女41 例；年齡6～14 歲，平均（10.31±1.05）歲。觀察組男61 例，女47 例；年齡6～15 歲，平均（10.36±1.01）歲。兩組性別、年齡比較，差異均無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。

2.2 對照組與觀察組各項血清指標對比

觀 察 組 的IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α、CRP水平均高于對照組，差異均有統計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 對照組與觀察組各項血清指標對比（±s）

組別 IL-2（pg/mL） IL-6（pg/mL） IL-8（pg/mL） TNF-α（ng/mL） CRP（mg/L）對照組（n=84） 1.20±0.57 105.69±13.21 35.46±6.89 0.46±0.05 3.21±0.57觀察組（n=108） 6.00±1.43 272.00±20.53 93.00±10.37 2.60±0.46 10.74±1.69 t 值 29.010 68.029 46.069 48.019 43.274 P 值 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000

2.3 UC 活動組、UC 不活動組及對照組各項血清指標對比

將UC 不活動患兒歸為UC 不活動組，共35 例，將中度、重度活動患兒歸為UC 活動組，共22 例。三組各血清指標比較，差異均有統計學意義（P＜0.05）；UC 活 動 組 的IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α、CRP 水平均高于UC 不活動組與對照組，且UC 不 活 動 組 的IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α、CRP 水平均高于對照組，差異均有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 UC活動組、UC不活動組及對照組各項血清指標對比（±s）

表2 UC活動組、UC不活動組及對照組各項血清指標對比（±s）

#與對照組相比，P＜0.05；*與UC 不活動組相比，P＜0.05。

組別 IL-2（pg/mL） IL-6（pg/mL） IL-8（pg/mL） TNF-α（ng/mL） CRP（mg/L）對照組（n=84） 1.20±0.57 105.69±13.21 35.46±6.89 0.46±0.05 3.21±0.57 UC 不活動組（n=35） 5.30±0.96# 204.61±15.26# 58.96±6.38# 1.89±0.26# 6.28±1.26#UC 活動組（n=22） 8.79±1.83#* 353.49±27.46#* 145.95±13.28#* 4.31±0.69#* 18.71±1.96#*F 值 628.727 2 038.922 1 656.683 1 483.795 1 788.446 P 值 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000

2.4 CD 活動組、CD 不活動組及對照組各項血清指標對比

將CD 不活動患兒歸為CD 不活動組，共35 例，將輕度、中度、重度活動患兒歸為CD 活動組，共16 例。三組各血清指標比較，差異均有統計學意 義（P＜0.05）；CD 活 動 組 的IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α、CRP 均高于CD 不活動組與對照組，且CD不活動組的IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α、CRP 均高于對照組，差異均有統計學意義（P＜0.05）。見表3。

表3 CD活動組、CD不活動組及對照組各項血清指標對比（±s）

表3 CD活動組、CD不活動組及對照組各項血清指標對比（±s）

#與對照組相比，P＜0.05；*與CD 不活動組相比，P＜0.05。

組別 IL-2（pg/mL） IL-6（pg/mL） IL-8（pg/mL） TNF-α（ng/mL） CRP（mg/L）對照組（n=84） 1.20±0.57 105.69±13.21 35.46±6.89 0.46±0.05 3.21±0.57 CD 不活動組（n=35） 5.24±1.32# 250.80±10.93# 46.62±7.56# 1.55±0.36# 6.89±1.70#CD 活動組（n=16） 5.51±1.61#* 358.98±28.47#* 146.31±14.26#* 4.05±0.53#* 17.96±1.84#*F 值 285.277 2 463.036 1 228.359 1 346.619 1 113.387 P 值 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000

2.5 IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α、CRP 在IBD 患兒中的診斷效能

ROC 結 果 顯 示：IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α、CRP 聯合檢測診斷IBD 的AUC 高于單獨檢測，見表4、圖1、圖2。

圖1 IL-2、IL-6、IL-8單獨及聯合檢測診斷IBD患兒的ROC曲線圖

圖2 TNF-α、CRP單獨檢測診斷IBD患兒的ROC曲線圖

表4 IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α、CRP在IBD患兒中的診斷效能

3 討論

IBD 是一種嚴重威脅人們身心健康的慢性非特異性腸道炎性疾病，其病情易反復發作，且治療難度大[9-10]。IBD 起病較為緩慢，炎癥的嚴重程度與發病部位不同，臨床表現亦存在較大的差異[11-12]。臨床尚未明晰IBD 的發病機制，一般認為是由環境、遺傳等因素共同造成免疫功能紊亂，并在多種炎癥因子的作用下引起的腸道黏膜屏障損傷[13-15]。積極探尋IBD 的發病機制，施以個體化的治療手段，對于改善患兒的預后意義重大。

IL-2 通常由T 細胞生成，具有活化T 細胞，誘導細胞因子產生，促進自然殺傷細胞增殖的作用，其在增強殺傷活性及產生細胞因子方面扮演重要角色[16-17]。IL-6 是細胞因子的核心成員，能夠誘導輔助型T 細胞2 免疫反應，還能夠促進炎癥反應，被認為是炎癥持續的標志[18]。IL-8 是趨化因子家族的細胞因子，主要由巨噬細胞產生，能夠傳遞信息、激活和調節免疫細胞，還可介導T 細胞、B 細胞活化和增殖分化[19]。TNF-α 是一種涉及系統性炎癥的細胞因子，屬于引起急相反應的眾多細胞因子中的一員，其主要由活化的單核細胞和巨噬細胞產生，是腸道上皮增殖和凋亡的主要促炎性細胞因子，可誘導結腸上皮細胞凋亡，加快UC 的發生[20-21]。CRP 為臨床常見的非特異性炎性標志物，是一種在病原菌入侵機體時，由肝臟合成的用于保護身體的急性時相反應蛋白，其通過激活補體和加強吞噬細胞的吞噬而發揮作用，當機體處在炎癥反應狀態時，CRP 的表達會顯著上升[22-23]。本研究結果顯示，觀察組的IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α、CRP 均高于對照組，提示在IBD 患兒機體內存在強烈的炎癥反應，上述炎癥因子呈異常高表達水平。本研究中，UC 活動組與CD 活動組的IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α、CRP 均高于UC 不活動組與CD 不活動組及對照組，表明IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α、CRP 能夠有效評估IBD 患兒的活動性，患兒的病情越嚴重，其表達水平越高。本研究ROC 曲線結果顯示，IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α、CRP 聯合檢測診斷IBD 的AUC 高于單獨檢測，表明上述炎癥因子聯合檢測能夠早期及時診斷出IBD，為臨床提供可靠的參考。

綜上所述，IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α、CRP在IBD 患兒機體內呈異常高表達，患兒病情越重，其水平越高，聯合檢測能夠早期診斷出IBD，并評估患兒病情的活動性。