TIPE2 Ki67在子宮內膜癌組織中的表達及對預后的評估價值

周麗媛 施喆 劉悅君 李靜霞 崔志利 安欣

子宮內膜癌是影響女性最重要的惡性腫瘤之一，占女性生殖系統疾病的37.7%［1］。近年來，子宮內膜癌的發病率逐年上升，且呈年輕化趨勢［2］。雖然子宮內膜癌預后相對較好，67%的患者發現時處于早期，其5年總生存率可達81%，但IVA、IVB期患者的5年生存率僅為 17% 和 15%［3］，并且一旦復發，治療困難、死亡率高。因此，準確判斷子宮內膜癌的生物學行為特征及臨床預后，為患者選擇個體化的手術治療方案，降低復發風險尤為重要。

腫瘤壞死因子誘導蛋白8樣蛋白2（tumor necrosis factor α induced protein-8 like-2，TIPE 2）為先天免疫和適應性免疫的負調控因子，可抑制抗腫瘤免疫反應，維持免疫穩態［4-5］。腫瘤增殖抗原Ki-67（marker of proliferation Ki-67，Ki-67）是一種由MKI67基因編碼的核蛋白，其表達與細胞的增殖活性正相關，可用作腫瘤標志物和判斷腫瘤侵襲性的良好指標［6-7］。TIPE2、Ki67在子宮內膜癌組織中的表達差異對患者預后的影響尚未完全探明。鑒于此，本研究納入子宮內膜癌患者120例、非子宮內膜癌患者130例，分析子宮內膜組織中TIPE2、Ki67的表達差異及對患者生存的影響，旨在評估TIPE2、Ki67在子宮內膜癌組織中的表達情況及其對患者預后的評估價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年1月至2020年1月河北工程大學附屬醫院婦科收治的子宮內膜癌患者120例作為觀察組，另擇同期收治的子宮肌瘤107例和子宮脫垂患者23例作為對照組，所有患者均接受手術治療。回顧性收集患者臨床及病理資料。研究對象均為女性，對照組年齡33～71歲，平均（57.05±6.95）歲；身體質量指數（body mass index，BMI）18～29 kg∕m2，平均（23.89±2.21）kg∕m2。觀察組年齡34～73歲，平均（56.36±6.60）歲；BMI 18～28 kg∕m2，平均（23.48±2.57）kg∕m2。兩組年齡、BMI等一般資料比較，差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。

納入標準：①子宮內膜癌符合《子宮內膜癌診斷與治療指南（第四版）》［8］中相關診斷標準者；②子宮肌瘤符合《子宮肌瘤的診治中國專家共識》［9］中相關診斷標準者；③子宮脫垂符合《婦產科學》第9版［10］中相關診斷標準者；④近期未參與過其他臨床研究者；⑤臨床資料完整者。

排除標準：①有惡性腫瘤家族史、合并其他惡性腫瘤、甲亢者；②合并肝腎功能不全者；③術前接受放化療、免疫治療者；④合并子宮手術史者；⑤合并自身免疫性疾病、嚴重貧血者；⑥妊娠期或哺乳期者等。本研究獲我院醫學倫理委員會批準（批件號：2021［K］078）。

1.2 方法

1.2.1 實驗室檢查 子宮內膜組織標本固定、石蠟包埋、切片及免疫組化SP方法詳見文獻［11］。采用過氧化物酶標記的鏈霉卵白素試劑盒（B&D公司）檢測石蠟切片中TIPE2、Ki67表達情況，鼠抗人TIPE2、Ki67單克隆抗體購自DAKO公司。結果判定：TIPE2陽性表達表現為細胞核或細胞漿見棕黃色顆粒，Ki67 陽性表達表現為細胞核被染成棕黃色。所有載玻片均采用雙盲法進行半定量評分。從每個標本中隨機抽取10個高倍視野，分別觀察并記錄腫瘤細胞中TIPE2、Ki67陽性染色細胞的百分比（0∶0%；1∶1%～25%；2∶26%～50%；3∶51%～75%；4∶76%～100%）和相應的染色強度（0：無染色；1：淺黃色；2.中等棕褐色；3：深棕褐色）。表達得分由上述兩個分數的結果相乘得到，分數≤3分定義為陰性（-），＞3分者為陽性［11-12］。典型病理圖片見圖1。

圖1 子宮內膜癌組織TIPE2、Ki67免疫組化陽性結果

1.2.2 臨床資料收集 通過本院電子病歷系統收集研究對象臨床資料，包括年齡（＜60歲，≥60歲）、BMI（＜24 kg∕m2，≥24 kg∕m2）、國際婦產科聯盟（FIGO，2009年）［13］分期、病理類型（內膜樣腺癌、非內膜樣腺癌）、淋巴結分級［14］（N0，N1）、肌層浸潤深度（＜1∕2、≥1∕2）、組織學分級（高分化、中低分化）、TIPE2（陽性、陰性）、Ki67（陽性、陰性）。

1.3 觀察指標

1.3.1 TIPE2、Ki67表達 采用免疫組織化學方法分析觀察組、對照組子宮內膜組織中TIPE2、Ki67的表達情況。

1.3.2 子宮內膜癌患者預后分析 所有患者在規范治療結束后開始隨訪，每3～6個月隨訪1次，隨訪方式為電話隨訪和門診隨訪。隨訪內容包括是否定期復查，復查項目及結果；是否出現復發，復發癥狀及復發時間；是否死亡及死亡原因和時間等。隨訪終點為患者死亡或達到隨訪截止時間（2022年6月）。比較性別、年齡、BMI、FIGO分期、高血壓病、糖尿病、病理類型、淋巴結分級、肌層浸潤深度、組織學分級、手術方式、術后并發癥、TIPE2及Ki67組間生存率的差異及對預后的影響。

1.4 統計學方法 使用SPSS 21.0統計軟件進行分析。計數資料以［例（%）］表示，予以χ2檢驗或校正χ2檢驗進行比較。計量資料用表示，兩組間差異比較采用t檢驗。TIPE2、Ki67與淋巴結轉移的相關性用χ2檢驗和Phi （Φ）系數比較，Phi （Φ）系數表示兩分類變量之間的關聯程度：Φ＜0.3時，表示相關較弱；Φ＞0.6時，表示相關較強［15］。Kaplan-Meier法繪制生存曲線，組間生存分析用log-rankχ2檢驗，子宮內膜癌患者預后分析采用Cox比例風險回歸模型。以P＜0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 子宮內膜組織中TIPE2、Ki67表達水平比較 觀察組TIPE2陽性率低于對照組，而Ki67陽性率高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 兩組患者TIPE2、Ki67表達比較[例(%)]

2.2 TIPE2表達與子宮內膜癌患者預后的關系 對120例子宮內膜癌患者隨訪2年，生存93例，死亡27例，生存率77.50%。對子宮內膜癌患者2年生存率進行分析，結果顯示：TIPE2陰性患者2年生存率為72.1%，TIPE2陽性患者為91.2%，Ki67陽性患者2年生存率為57.5%，Ki67陽性患者為87.5%，以上兩組生存率比較，經log-rankχ2檢驗，差異有統計學意義（P＜0.05）。

Cox模型分析（病理類型、淋巴結分級、肌層浸潤深度、組織分級、TIPE2、Ki67）顯示，TIPE2陰性（HR=3.736，95%CI=1.016～13.157）是影響患者預后的獨立危險因素（P＜0.05）。見表2、圖2。

表2 子宮內膜癌患者預后的Cox回歸模型分析

2.3 TIPE2表達與子宮內膜癌患者臨床病理特征的關系 本研究按照TIPE2表達差異進行分組，結果顯示TIPE2陰性與組織分化呈正相關，差異有統計學意義（χ2=18.397，Φ=0.392，P＜0.001）。見表3。

表3 子宮內膜癌組織TIPE2與組織分級的相關性分析

3 討論

子宮內膜癌是常見的婦科惡性腫瘤，近年來，我國子宮內膜癌的發病率也呈現逐年升高的趨勢［16］。手術是治療子宮內膜癌的主要手段，但患者預后仍不樂觀［17-18］。既往研究表明，TIPE2可通過抑制細胞外信號調節蛋白激酶1∕2及核轉錄因子NF-κB的表達，從而發揮抑制腫瘤微炎癥環境的作用［19］。TIPE2還可抑制腫瘤細胞增殖、遷移及侵襲［20-21］。Ki67是一種廣泛用于評估腫瘤增殖情況的標志物，腫瘤細胞增殖活躍時，Ki67表達增高［22］。

本研究中，120例子宮內膜癌患者2年生存率77.50%，與既往研究［23］結果類似。與正常子宮內膜組織相比，TIPE2陽性率在子宮內膜癌組織中低，Ki67陽性率高，且TIPE2陰性與子宮內膜癌不良預后相關。與此同時，TIPE2陰性與組織分化相關，與既往研究［11-12］結果一致。因此，TIPE2、Ki67表達情況對預后具有一定的評估價值，TIPE2可作為子宮內膜癌治療的預后指標，為進一步研究TIPE2對子宮內膜癌細胞惡性生物學行為提供了一定臨床依據。

本研究存在的不足之處包括：子宮內膜癌病理類型主要為內膜樣腺癌，而非內膜樣腺癌病例較少，尚不能反映TIPE2和Ki67水平對非內膜樣腺癌患者預后的影響，需要進一步擴大樣本量，增加非內膜樣腺癌病例進行驗證。此外，本課研究未針對TIPE2對子宮內膜癌惡性生物學行為的影響及相關的分子通路進行研究，將是本課題組以后的重點研究方向，以期為針對TIPE2的靶向治療提供理論基礎。