免疫球蛋白和自身抗體在乙型肝炎肝硬化發病和進展中的表達及與預后的關系

魏僖僖

（福建省建甌市立醫院檢驗科，福建 建甌 353100）

乙型肝炎是全球關注的重要健康問題，是導致肝硬化、肝細胞癌的主要原因[1]。其中乙型肝炎肝硬化是其重要的臨床結局，隨著疾病進展，原發性肝癌是肝硬化最嚴重的并發癥。而加強乙型肝炎肝硬化的診治研究，對促進患者靶向治療、改善其預后有重要意義。現代免疫學認為，免疫功能與多種肝臟疾病的發生、演變、進展密切相關，免疫球蛋白是判定機體體液免疫功能的重要指標，具有調控機體免疫功能狀態的作用[2-3]。自身抗體是指自身組織細胞成分的抗體，包括核酸、蛋白、功能細胞組件等，是反映自身免疫性疾病的重要指標[4]。而也有研究發現[5]，自身抗體不僅在自身免疫性肝病中呈異常表達，在乙型肝炎、丙型肝炎等肝臟疾病中也可出現，因此自身抗體與肝臟損害及慢性疾病進展有關。基于此，本文分析免疫球蛋白和自身抗體在乙型肝炎肝硬化發病和進展中的表達及與預后的關系。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選取福建省建甌市立醫院在2021年1月至2022年1月期間收治的乙型肝炎肝硬化患者、乙型肝炎患者和健康體檢者。

納入標準：①乙型肝炎組、肝硬化組乙型肝炎患者均符合乙型肝炎[6]、乙型肝炎肝硬化[7]診斷標準。②近期未服用免疫抑制或凝血、抗炎等藥物。③入組對象精神狀態良好，認知清晰。④對本試驗知情，并簽訂同意書。排除標準：①因病毒、藥物等導致的肝硬化。②酗酒、吸毒、藥物成癮史者。③有免疫缺陷、惡性腫瘤及傳染性疾病者。④合并心、腦、肺、腎等臟器疾病者。⑤近期有手術、外傷及感染史者。⑥處于妊娠或哺乳階段的女性。

1.2 方法 收取120例患者，40例乙型肝炎肝硬化患者為肝硬化組；40例乙型肝炎患者為乙型肝炎組；40名健康體檢者為對照組。收集三組患者性別、年齡、病程、肝功能Chlid-Pugh分級等一般資料。

三組對象均在清晨采集空腹靜脈血5 ml，先對血清樣本進行離心處理，離心15 min，3 500 r/min，離心半徑為8 cm。留取上層清液，采用免疫比濁法檢測免疫球蛋白（Ig）A、IgG、IGM水平，試劑盒由北京九強生物科技有限公司產。自身抗體檢測：采用免疫印跡法檢測，包括熒光核型：胞漿顆粒型、著絲點型、核顆粒型及核周型；德國歐蒙抗核抗體（ANA）：抗線粒體抗體M2亞型（AMA-M2）、抗Ro-52抗體、抗著絲點抗體（ACA），根據抗核抗體譜磨條顏色深淺盤點陽性結果，當見特異性熒光即為陽性。

對肝硬化組患者予以12個月隨訪，將出現消化道出血、肝性腦病等并發癥者歸于預后不良組，其余為預后良好組，比較兩組患者各項指標差異。

1.3 觀察指標 ①比較三組對象IgA、IgG、IgM水平。②比較三組對象自身抗體陽性檢出率，包括胞漿顆粒型、著絲點型、核顆粒型、核周型、AMA-M2、抗Ro-52抗體、ACA。③比較肝硬化組患者預后不良組與預后良好組，比較兩組患者IgA、IgG、IgM水平及自身抗體陽性檢出率。

1.4 統計學方法 SPSS 26.0統計學軟件。計量資料經±s表示，兩組、三組分別用t、F檢驗；計數資料以率表示，應用χ2檢驗；免疫球蛋白、自身抗體與預后的相關性采用Spearman相關性分析，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 三組一般資料對比 肝硬化組40例，男23例，女17例；年齡范圍45～76歲，平均年齡（62.38±4.15）歲；病程1～8年，平均（3.82±0.42）年；肝功能Chlid-Pugh分級：A級10例，B級18例，C級12例；乙型肝炎組40例，男25例，女15例；年齡范圍45～75歲，平均（63.04±4.24）歲；病程1～8年，平均（4.01±0.48）年；肝功能Chlid-Pugh分級：A級8例，B級22例，C級10例；對照組40名，男22名，女18名；年齡45～76歲，平均（64.18±4.35）歲；三組基線資料比較無統計學差異（P＞0.05），可比較。

2.2 三組免疫球蛋白含量對比 與對照組相比，肝硬化、乙型肝炎組的免疫功能均發生改變，且肝硬化組IgA、IgG含量升高明顯（P＜0.05），但三組IgM水平比較無差異（P＞0.05）。見表1。

2.3 三組自身抗體檢測結果對比 肝硬化組自身抗體檢測陽性率明顯高于乙型肝炎組、對照組（P＜0.05），而乙型肝炎組與對照組的自身抗體檢測陽性率比較無明顯差異（P＞0.05）。見表2。

表2 三組自身抗體陽性檢測結果對比[例（%）]

表3-1 比較預后差異兩組免疫球蛋白水平（g/L）

表3-2 比較預后差異兩組自身抗體陽性率檢測結果[例（%）]

2.4 比較不同預后兩組免疫球蛋白及自身抗體差異 隨訪12個月，肝硬化組患者出現預后不良12例，預后良好28例，預后不良組IgA、IgG水平及自身抗體檢出陽性率均高于良好組（P＜0.05）。見表3。

2.5 相關性分析 Spearman相關性分析，IgA、IgG、胞漿顆粒型、著絲點型、核顆粒型、核周型、AMA-M2、抗Ro-52抗體、ACA與肝硬化患者的不良預后呈正相關性（r＝0.721，0.682，0.712，0.690，0.704，0.684，0.672，均P＜0.05）。

3 討論

當前，慢性乙型肝炎無特異性根治方法，抗病毒藥物多是抑制病毒復制，但無法徹底清除病毒。而慢性乙型肝炎進展至肝硬化的發生、發展機制尚未明確，多認為是乙型肝炎病毒（HBV）并不能直接殺傷肝細胞，多是在感染病毒后導致機體免疫功能障礙，以及人體為了清除病毒感染而誘發的免疫損傷，最終導致患者肝細胞破壞及肝臟炎癥反應，最后發展至肝硬化形成[8]。因此免疫功能與乙型肝炎肝硬化的發生、演變及進展關系緊密。根據免疫功能變化，可有效評估患者肝臟功能，對評價患者預后有重要意義。

體液免疫系統包括抗體及補體，其中免疫球蛋白是反映體內免疫系統的重要指標，主要由漿細胞合成及分泌，并與相應抗原特異性結合后形成的糖蛋白，在人體抗感染免疫系統中起到重要防御功能[9]。免疫球蛋白具有抗菌、加強細胞吞噬能力、抗病毒等作用，并能在補體的輔助作用下殺死病原體。IgA、IgG、IgM在機體內含量最高，本研究發現，肝硬化、乙型肝炎組IgA、IgG含量均高于對照組，且肝硬化組IgA、IgG含量均高于乙型肝炎組（P＜0.05）。其中肝硬化患者隨訪12個月，預后不良組IgA、IgG含量高于良好組（P＜0.05）。說明根據免疫球蛋白水平能夠評價慢性乙型肝炎患者病情，評估肝硬化患者預后結局。分析原因：IgA在血液內的含量略微低于IgG，其代謝速度快、半衰期短，維持著人體重要的免疫防御作用[10]。IgG在血液內含量最高，是免疫應答的主要抗體，可活化補體，發揮調理素，促進吞噬細胞對病原體的吞噬作用[11]。IgM在血液內的含量較低，在早期感染中發揮著免疫防御作用。由于乙型肝炎肝硬化患者通常存在異常免疫應答，受自身特異性抗原刺激，機體清除病毒感染，進而會誘發免疫損傷，導致IgA、IgG含量急劇升高[12]。而三組IgM含量比較無明顯差異，可能是IgM是脾臟的最大生產器官，且在感染早期可能會出現異常表達，而在肝硬化及慢性疾病期的表達并不明顯，故需要進一步論證。

自身免疫是機體正常的生理功能，自身免疫過度則會誘發自身免疫性疾病。有研究指出[13]，病毒感染與自身免疫疾病密切相關，當機體誘發病毒感染后，會誘發過度的自身免疫活性，導致自身免疫性疾病的出現。當機體感染HBV病毒后，誘發自身免疫損傷及肝細胞損傷，引起肝臟疾病慢性進展；同時可能會激發體內自身抗體的產生，導致相應的免疫應答及免疫病理反應，損傷肝細胞，導致疾病進展[14]。本研究發現，肝硬化組自身抗體胞漿顆粒型、著絲點型、核顆粒型、核周型、AMA-M2、抗Ro-52抗體、ACA檢測陽性率高于乙型肝炎組、對照組，且肝硬化預后不良組自身抗體檢出陽性均高于良好組（P＜0.05）。據馮婧等[15]學者研究發現，原發性膽汁性肝硬化患者自身抗體檢出陽性率高于對照的健康組。結果發現，乙型肝炎肝硬化患者均發生自身免疫損傷，且與肝細胞損傷密切相關，隨著疾病進展，預后越差，自身抗體陽性率越高。可能是HBV病毒感染后會誘發自身抗原修飾，進而激發自身免疫；同時會導致自身免疫系統紊亂，長期自身免疫紊亂會致肝細胞硬變及癌變，加重肝臟損害，促進疾病進展，致患者預后差。

本研究發現，Spearman相關性分析，IgA、IgG、胞漿顆粒型、著絲點型、核顆粒型、核周型、AMA-M2、抗Ro-52抗體、ACA陽性檢出率與肝硬化患者不良預后呈正相關性。通過對乙型肝炎肝硬化患者進行免疫球蛋白及自身抗體的檢測，可發現患者免疫防御機制異常及自身免疫系統紊亂，而根據免疫功能評價可在一定程度上評價患者預后結局，對肝臟疾病患者病理狀態、損傷程度有重要意義。

綜上所述，當乙型肝炎患者進展至肝硬化后，IgA、IgG水平明顯升高，自身抗體陽性檢出率增加，伴有明顯的免疫系統損傷及自身抗體異常，能夠預測患者預后結局。因此，監測患者免疫功能改變可為評估疾病預后及臨床治療提供依據。但本研究尚有不足，樣本量少、研究時間短，使研究結果存在偏倚，故需要臨床進一步論證。